馬鈴薯致病疫霉及其拮抗菌的篩選與鑒定
發(fā)布時(shí)間:2021-04-14 15:44
采用組織分離法分離鑒定馬鈴薯致病疫霉,同時(shí)比較3株拮抗菌對(duì)馬鈴薯致病疫霉的抗菌效果,以期獲得1株更具有生防潛力的拮抗細(xì)菌,并加以鑒定。用涂布分離法得到3株拮抗菌,通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定馬鈴薯致病疫霉和這3株拮抗菌。同時(shí)比較這些拮抗菌對(duì)馬鈴薯致病疫霉游動(dòng)孢子釋放、休止孢萌發(fā)和孢子囊直接萌發(fā)的抑制效果,分析菌液對(duì)馬鈴薯晚疫病的預(yù)防效果。結(jié)果鑒定出1株馬鈴薯致病疫霉PLB-2 Phytophthora infestans和1株具有明顯抑制效果的拮抗細(xì)菌WZ-502 Brachybacterium sp.。菌株WZ-502的菌液對(duì)馬鈴薯致病疫霉游動(dòng)孢子釋放、孢子囊直接萌發(fā)和休止孢萌發(fā)有較好的抑制效果。菌株WZ-502菌液濃度為3.65×107 CFU·mL-1、稀釋度為10-2~10-3時(shí),對(duì)馬鈴薯致病疫霉的抑制效果均明顯,稀釋度為10-3時(shí),馬鈴薯致病疫霉孢子囊萌發(fā)率和釋放率均在40%以下。因此,菌株WZ-502對(duì)馬鈴薯致病疫霉抗菌效果顯著,具有一定的生防潛力。
【文章來(lái)源】:浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,32(05)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)
【部分圖文】:
致病疫霉與拮抗細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3種拮抗細(xì)菌對(duì)致病疫霉孢子囊釋放游動(dòng)孢子的抑制效果見(jiàn)表2,拮抗菌原液稀釋度為10.00×10-3、5.00×10-3、2.50×10-3、1.25×10-3、1.00×10-3時(shí),3種拮抗細(xì)菌對(duì)致病疫霉游動(dòng)孢子釋放均有顯著抑制效果;相同菌液濃度下,WZ-502的抑制作用最強(qiáng),濃度越大,其抑制效果越好。細(xì)菌原液稀釋度為10.00×10-3時(shí),WZ-502對(duì)致病疫霉的抑制作用最強(qiáng),游動(dòng)孢子釋放率只有15.38%,顯著低于對(duì)照組(46.15%);WZ-503的抑制效果次之,WZ-406抑制效果最差。細(xì)菌原液稀釋度為1.00×10-3時(shí),WZ-502處理的游動(dòng)孢子釋放率在38.15%左右,仍顯著低于對(duì)照。2.4 拮抗菌對(duì)致病疫霉孢子囊直接萌發(fā)的抑制作用
上述抑制效果表明,拮抗菌WZ-502對(duì)致病疫霉生長(zhǎng)、游動(dòng)孢子釋放、孢子囊直接萌發(fā)、休止孢萌發(fā)的抑制作用最強(qiáng)。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用拮抗菌WZ-502,在分子水平對(duì)其進(jìn)行了分類鑒定。PCR擴(kuò)增結(jié)果表明,拮抗菌WZ-502的16S rDNA全長(zhǎng)1 424 bp。BLAST比對(duì)顯示,WZ-502與副凝聚短狀桿菌Brachybacterium paraconglomeratum strain LMG 19861(NR022502)同源性達(dá)100%。采用NJ法構(gòu)建了13個(gè)菌株(選BLAST同源性最高12個(gè)菌株)的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),結(jié)果顯示,WZ-502菌株與副凝聚短狀桿菌NR025502處于同一分支,且同源性為99%(圖4)。Renske等提出序列相似性在95%~99%,可鑒定為相同屬[12],故鑒定WZ-502為短狀桿菌Brachybacterium sp.。3 結(jié)論與討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]馬鈴薯茄鐮孢菌干腐病生防菌株的篩選、鑒定及其防效[J]. 劉治會(huì),郝蓉蓉,許永鋒,楊成德,張俊蓮. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2019(07)
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[3]三株拮抗菌對(duì)導(dǎo)致馬鈴薯晚疫病的致病疫霉的抑制作用比較[J]. 張亞輝,蔣繼志,王蓓蓓,李穎,萬(wàn)安琪,沙海天. 作物雜志. 2016(04)
[4]馬鈴薯晚疫病菌拮抗粘細(xì)菌YR–35的分離鑒定及其代謝產(chǎn)物穩(wěn)定性[J]. 任興波,張子良,趙璞鈺,武志華,崔海辰,劉惠榮. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2016(03)
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[6]馬鈴薯晚疫病發(fā)病機(jī)理及防治研究[J]. 呂景春,樸青松,王慶華,金春姬. 北京農(nóng)業(yè). 2013(30)
[7]馬鈴薯晚疫病的危害、發(fā)病條件和防治措施[J]. 弓貴明,姬青云. 種子科技. 2012(01)
[8]枯草芽孢桿菌EB-28對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的抑菌作用及防病效果[J]. 李雙東,曹克強(qiáng). 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(24)
[9]地衣芽孢桿菌對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的抑制作用[J]. 張笑宇,胡俊,李玉峰,席先梅,姜曉環(huán). 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2009(02)
[10]地衣芽孢桿菌代謝物對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的抑制作用[J]. 李玉峰,張笑宇,胡俊,姜曉環(huán),楊海明. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(01)
本文編號(hào):3137582
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【部分圖文】:
致病疫霉與拮抗細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3種拮抗細(xì)菌對(duì)致病疫霉孢子囊釋放游動(dòng)孢子的抑制效果見(jiàn)表2,拮抗菌原液稀釋度為10.00×10-3、5.00×10-3、2.50×10-3、1.25×10-3、1.00×10-3時(shí),3種拮抗細(xì)菌對(duì)致病疫霉游動(dòng)孢子釋放均有顯著抑制效果;相同菌液濃度下,WZ-502的抑制作用最強(qiáng),濃度越大,其抑制效果越好。細(xì)菌原液稀釋度為10.00×10-3時(shí),WZ-502對(duì)致病疫霉的抑制作用最強(qiáng),游動(dòng)孢子釋放率只有15.38%,顯著低于對(duì)照組(46.15%);WZ-503的抑制效果次之,WZ-406抑制效果最差。細(xì)菌原液稀釋度為1.00×10-3時(shí),WZ-502處理的游動(dòng)孢子釋放率在38.15%左右,仍顯著低于對(duì)照。2.4 拮抗菌對(duì)致病疫霉孢子囊直接萌發(fā)的抑制作用
上述抑制效果表明,拮抗菌WZ-502對(duì)致病疫霉生長(zhǎng)、游動(dòng)孢子釋放、孢子囊直接萌發(fā)、休止孢萌發(fā)的抑制作用最強(qiáng)。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用拮抗菌WZ-502,在分子水平對(duì)其進(jìn)行了分類鑒定。PCR擴(kuò)增結(jié)果表明,拮抗菌WZ-502的16S rDNA全長(zhǎng)1 424 bp。BLAST比對(duì)顯示,WZ-502與副凝聚短狀桿菌Brachybacterium paraconglomeratum strain LMG 19861(NR022502)同源性達(dá)100%。采用NJ法構(gòu)建了13個(gè)菌株(選BLAST同源性最高12個(gè)菌株)的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),結(jié)果顯示,WZ-502菌株與副凝聚短狀桿菌NR025502處于同一分支,且同源性為99%(圖4)。Renske等提出序列相似性在95%~99%,可鑒定為相同屬[12],故鑒定WZ-502為短狀桿菌Brachybacterium sp.。3 結(jié)論與討論
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[9]地衣芽孢桿菌對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的抑制作用[J]. 張笑宇,胡俊,李玉峰,席先梅,姜曉環(huán). 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2009(02)
[10]地衣芽孢桿菌代謝物對(duì)馬鈴薯晚疫病菌的抑制作用[J]. 李玉峰,張笑宇,胡俊,姜曉環(huán),楊海明. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(01)
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