小麥葉銹菌毒性變異頻繁,新的毒性小種不斷出現(xiàn),往往導(dǎo)致小麥抗葉銹病品種在推廣種植幾年后的抗性喪失。因此,開發(fā)用于田間小麥葉銹病的診斷與預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)的特異性分子標(biāo)記具有重要意義。在前期已經(jīng)完成小麥葉銹菌PHNT轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的基礎(chǔ)上,本研究擬在數(shù)據(jù)庫(kù)中挑選候選效應(yīng)蛋白,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR明確其在葉銹菌侵染小麥后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)模式,根據(jù)差異表達(dá)分析篩選出候選效應(yīng)蛋白,再根據(jù)編碼候選效應(yīng)蛋白的基因序列設(shè)計(jì)引物,對(duì)小麥葉銹菌PHNT基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,旨在開發(fā)小麥葉銹菌特異性分子標(biāo)記。結(jié)果在轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選出24個(gè)候選效應(yīng)蛋白,qPCR檢測(cè)明確其中17個(gè)具有明顯的表達(dá)差異。PCR擴(kuò)增結(jié)果表明,基于候選效應(yīng)蛋白基因PTTG-05290設(shè)計(jì)的引物在小麥葉銹菌PHNT中獲得一條920 bp的條帶,且在檢測(cè)的25種葉銹菌生理小種中均穩(wěn)定存在,而在小麥條銹菌、菜豆銹菌、棗樹銹菌、柳樹銹菌、蘋果樹銹菌及蘆葦銹菌6種銹菌中不能獲得有效擴(kuò)增,表明該引物在小麥葉銹菌中具有特異性。qPCR結(jié)果表明,PTTG-05290在葉銹菌侵染小麥4 d時(shí)達(dá)到表達(dá)高峰,表達(dá)量為0 d的218倍,而0.5 d時(shí)便大量檢測(cè)... 

【文章來(lái)源】：植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2020,21(05)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【部分圖文】：

部分候選效應(yīng)蛋白的表達(dá)模式

為了明確PTTG-05290基因在小麥葉銹菌不同生理小種中的分布情況，提取25個(gè)不同小麥葉銹菌生理小種夏孢子基因組DNA，利用特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增。經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果表明，在檢測(cè)的25個(gè)生理小種中均能獲得同樣大小的擴(kuò)增條帶，說(shuō)明該引物不僅適用于葉銹菌生理小種PHNT，而且適用于所有葉銹菌生理小種（圖3）。圖3 PTTG-05290在葉銹菌不同生理小種中的部分?jǐn)U增結(jié)果

PTTG-05290在葉銹菌不同生理小種中的部分?jǐn)U增結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3131574