昆蟲血淋巴19kDa蛋白（HP19）主要負(fù)責(zé)調(diào)控昆蟲的變態(tài)發(fā)育。蜜蜂是社會性昆蟲,蜂群內(nèi)三種大小、重量、發(fā)育歷期及生物學(xué)功能完全不同的工蜂、雄蜂和蜂王組成,且在其基因組內(nèi)發(fā)現(xiàn)了hp19基因,這為研究hp19對蜜蜂發(fā)育及其調(diào)控機制提供了很好的材料。基因的功能與其在生物體內(nèi)的時空表達(dá)特性密切相關(guān),為探究hp19在西方蜜蜂Apis mellifera三型蜂體內(nèi)的表達(dá)和功能,本研究利用實時熒光定量PCR技術(shù)對hp19在西方蜜蜂工蜂,雄蜂,蜂王各個發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄水平進行測定。測定的結(jié)果顯示,hp19基因在工蜂3齡幼蟲階段高表達(dá),表達(dá)量為參照基因的103-10⁴倍,5齡幼蟲階段顯著降低到參照的10-10²倍,末齡幼蟲表達(dá)量最低,與參照基因處在同一水平。雄蜂在末齡幼蟲階段表達(dá)量也由3齡幼蟲參照基因的10⁴-10⁵倍降至最低的10²倍。蜂王在幼蟲期表達(dá)量穩(wěn)定保持在參照的10²倍,封蓋后逐漸上升,至化蛹前達(dá)到10⁴-10⁵倍。羽化... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 血淋巴蛋白HP19的研究概述
    1 昆蟲儲存蛋白hexamerin
    2 昆蟲血淋巴蛋白HP19
        2.1 HP19對昆蟲變態(tài)發(fā)育的調(diào)控作用
        2.2 非基因水平下的激素調(diào)節(jié)作用
    3 實時熒光定量PCR（FQ-PCR）技術(shù)
    4 RNAi技術(shù)及應(yīng)用
        4.1 RNAi的作用機制
        4.2 RNAi在昆蟲及蜜蜂研究中的應(yīng)用
    5 本實驗的研究意義及擬解決的問題
第二章 西方蜜蜂體內(nèi)hp19的表達(dá)
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
    2 實驗結(jié)果與分析
        2.1 hp19定量引物驗證
        2.2 擴增效率及特異性
        2.3 hp19在意大利蜜蜂體內(nèi)的表達(dá)
    3 結(jié)論與討論
第三章 不同發(fā)育時期西方蜜蜂脂肪體細(xì)胞膜蛋白磷酸化程度
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 膜蛋白SDS-PAGE電泳結(jié)果
        2.2 膜蛋白磷酸化測定結(jié)果
    3 結(jié)論與討論
第四章 合成dsRNA干擾西方蜜蜂hp19基因的表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 hp19干擾引物驗證
        2.2 純化的hp19和egfp dsRNA凝膠電泳
        2.3 dsRNA注射工蜂幼蟲與實驗室條件下的飼養(yǎng)
        2.4 半定量驗證注射干擾結(jié)果
    3 結(jié)論與討論
第五章 總結(jié)與展望
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]家蠶膜蛋白BmOBP2的分離純化及結(jié)晶條件初探[D]. 劉玲玲.浙江理工大學(xué) 2012
[2]蜜蜂球囊菌侵染蜜蜂幼蟲的生物學(xué)與病理學(xué)研究[D]. 鄭志陽.福建農(nóng)林大學(xué) 2010



本文編號：3130906