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西方蜜蜂(Apis mellifera)19 kDa血淋巴蛋白HP19的表達與功能研究

發(fā)布時間:2021-04-11 08:16
  昆蟲血淋巴19kDa蛋白(HP19)主要負責調控昆蟲的變態(tài)發(fā)育。蜜蜂是社會性昆蟲,蜂群內三種大小、重量、發(fā)育歷期及生物學功能完全不同的工蜂、雄蜂和蜂王組成,且在其基因組內發(fā)現了hp19基因,這為研究hp19對蜜蜂發(fā)育及其調控機制提供了很好的材料。基因的功能與其在生物體內的時空表達特性密切相關,為探究hp19在西方蜜蜂Apis mellifera三型蜂體內的表達和功能,本研究利用實時熒光定量PCR技術對hp19在西方蜜蜂工蜂,雄蜂,蜂王各個發(fā)育階段的轉錄水平進行測定。測定的結果顯示,hp19基因在工蜂3齡幼蟲階段高表達,表達量為參照基因的103-104倍,5齡幼蟲階段顯著降低到參照的10-102倍,末齡幼蟲表達量最低,與參照基因處在同一水平。雄蜂在末齡幼蟲階段表達量也由3齡幼蟲參照基因的104-105倍降至最低的102倍。蜂王在幼蟲期表達量穩(wěn)定保持在參照的102倍,封蓋后逐漸上升,至化蛹前達到104-105倍。羽化... 

【文章來源】:福建農林大學福建省

【文章頁數】:58 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 血淋巴蛋白HP19的研究概述
    1 昆蟲儲存蛋白hexamerin
    2 昆蟲血淋巴蛋白HP19
        2.1 HP19對昆蟲變態(tài)發(fā)育的調控作用
        2.2 非基因水平下的激素調節(jié)作用
    3 實時熒光定量PCR(FQ-PCR)技術
    4 RNAi技術及應用
        4.1 RNAi的作用機制
        4.2 RNAi在昆蟲及蜜蜂研究中的應用
    5 本實驗的研究意義及擬解決的問題
第二章 西方蜜蜂體內hp19的表達
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
    2 實驗結果與分析
        2.1 hp19定量引物驗證
        2.2 擴增效率及特異性
        2.3 hp19在意大利蜜蜂體內的表達
    3 結論與討論
第三章 不同發(fā)育時期西方蜜蜂脂肪體細胞膜蛋白磷酸化程度
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
    2 結果與分析
        2.1 膜蛋白SDS-PAGE電泳結果
        2.2 膜蛋白磷酸化測定結果
    3 結論與討論
第四章 合成dsRNA干擾西方蜜蜂hp19基因的表達
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 試驗方法
    2 結果與分析
        2.1 hp19干擾引物驗證
        2.2 純化的hp19和egfp dsRNA凝膠電泳
        2.3 dsRNA注射工蜂幼蟲與實驗室條件下的飼養(yǎng)
        2.4 半定量驗證注射干擾結果
    3 結論與討論
第五章 總結與展望
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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[5]昆蟲RNAi技術與方法[J]. 田宏剛,劉同先,張文慶.  應用昆蟲學報. 2013(05)
[6]在發(fā)育性變化相關基因表達特性檢測中內參基因的有效性和實時定量PCR解析方法的適用性[J]. 胡艷,宋遲,徐文娟,章雙杰,李慧芳.  基因組學與應用生物學. 2013(02)
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碩士論文
[1]家蠶膜蛋白BmOBP2的分離純化及結晶條件初探[D]. 劉玲玲.浙江理工大學 2012
[2]蜜蜂球囊菌侵染蜜蜂幼蟲的生物學與病理學研究[D]. 鄭志陽.福建農林大學 2010



本文編號:3130906

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