鞘翅目是昆蟲綱中最大的一個(gè)目,種類繁多,對(duì)農(nóng)林經(jīng)濟(jì)作物的危害復(fù)雜多樣。其中作為模式昆蟲的赤擬谷盜（Tribolium castaneum,Herbst）繁殖力強(qiáng),世代間隔短,是一種重要的儲(chǔ)藏物害蟲。昆蟲神經(jīng)肽是一類由昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)分泌的微量高效能小分子蛋白質(zhì)（多肽）,通過激活相對(duì)應(yīng)的受體—G蛋白偶聯(lián)受體（G-protein coupled receptors,GPCRs）來調(diào)控昆蟲多種生命活動(dòng),是昆蟲體內(nèi)重要的信號(hào)物質(zhì)。因此,擾亂或阻斷神經(jīng)肽的信號(hào)傳導(dǎo)可使昆蟲的生理機(jī)能發(fā)生障礙,中斷昆蟲活動(dòng)的正常運(yùn)作,從而使害蟲得到控制的目的。本學(xué)位論文基于赤擬谷盜基因組數(shù)據(jù),篩選出Tachykinin（TcTK）及其受體Tachykinin receptor（TcTKR）的前體基因序列,克隆獲得了它們的cDNA序列并進(jìn)行序列和結(jié)構(gòu)分析;利用中國(guó)倉鼠卵母細(xì)胞（Chinese hamster ovary,CHO）異源表達(dá)系統(tǒng)及胞內(nèi)鈣離子流動(dòng)檢測(cè)技術(shù),對(duì)構(gòu)建的pcDNA3.1（+）-TcTKR載體進(jìn)行離體條件下的活性檢測(cè);采用RT-qPCR技術(shù)解析TcTK和TcTKR在赤擬谷盜體內(nèi)的時(shí)空表達(dá)模式;利用免疫組... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

赤擬谷盜神經(jīng)肽TK前體基因結(jié)構(gòu)及氨基酸序列分析

編碼 428 個(gè)氨基酸殘基（圖1-3）。利用在線軟件 TMHMM Server v. 2.0 預(yù)測(cè)到 TcTKR 膜蛋白具有 7 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，是典型的 G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）（圖 1-2）。將 TcTKR 與黑腹果蠅（D. melanogaster, CAA44595）和家蠶（B. mori, NP_001127722）的 TKR 進(jìn)行氨基酸序列比對(duì)分析，結(jié)果如圖 1-3，TcTKR 與它們均具有一定保守性，其中與黑腹果蠅相似性為 46.73%，與家蠶相似性為 50.00%，尤其是跨膜結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列保守性較高。圖 1-2 赤擬谷盜 TKR 蛋白跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)示意圖Fig. 1-2 The Schematic diagram of predicted transmembrane domains of TcTKR圖 1-3 赤擬谷盜 TKR 與其他昆蟲 TKR 氨基酸序列比對(duì)分析（黑色加粗橫線表示跨膜結(jié)構(gòu)域）Fig

第一章 赤擬谷盜 TK 及其受體 cDNA 的克隆與異源表達(dá)赤擬谷盜 TcTKR 基因的 ORF 共 1287 個(gè)核苷酸，編碼 428 個(gè)氨基酸殘基（圖1-3）。利用在線軟件 TMHMM Server v. 2.0 預(yù)測(cè)到 TcTKR 膜蛋白具有 7 個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，是典型的 G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）（圖 1-2）。將 TcTKR 與黑腹果蠅（D. melanogaster, CAA44595）和家蠶（B. mori, NP_001127722）的 TKR 進(jìn)行氨基酸序列比對(duì)分析，結(jié)果如圖 1-3，TcTKR 與它們均具有一定保守性，其中與黑腹果蠅相似性為 46.73%，與家蠶相似性為 50.00%，尤其是跨膜結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列保守性較高。


本文編號(hào)：3120040