產(chǎn)酶溶桿菌中ChpA與PilZ蛋白的鑒定及其調(diào)控菌體運動性的機制研究
發(fā)布時間:2021-04-02 14:38
產(chǎn)酶溶桿菌(Lysobacter enzymogenes)是農(nóng)業(yè)植物病害生物防治中一種重要的革蘭氏陰性細(xì)菌,其由IV型菌毛(Type IV pili,T4P)介導(dǎo)的跳蹭行運動(twitching motility,TM)在抑制植物病原真菌的功能中具有重要作用。但是溶桿菌調(diào)控TM的功能機制還不清楚。本文以產(chǎn)酶溶桿菌OH11菌株作為模式菌,研究發(fā)現(xiàn)了兩個TM調(diào)控因子,ChpA雜合的雙組分蛋白和PilZ結(jié)構(gòu)域蛋白,兩者均正向調(diào)控菌體的TM。本研究發(fā)現(xiàn)雜合的雙組分蛋白ChpA包含7個結(jié)構(gòu)域,具有自身磷酸化、磷酸基團轉(zhuǎn)移、磷酸受體的功能。實驗表型顯示出chpA缺失突變體菌落邊緣的細(xì)胞不再向外滑動,證明了chp 的缺失突變體完全喪失了TM。進一步進行結(jié)構(gòu)域缺失及表型檢測,研究表明負(fù)責(zé)磷酸化和磷酸基團轉(zhuǎn)移的結(jié)構(gòu)域是ChpA調(diào)控TM必不可少的結(jié)構(gòu),而負(fù)責(zé)接受磷酸基團的結(jié)構(gòu)域則是非必要的。此外本研究對chpA缺失突變體的轉(zhuǎn)錄組進行分析,發(fā)現(xiàn)ChpA參與調(diào)控243個基因的表達(dá)。這些基因表達(dá)的產(chǎn)物參與菌體的多種生理和生物進程,首次證明革蘭氏陰性細(xì)菌中保守的ChpA廣泛的影響著基因的表達(dá)。另一方面,研究發(fā)現(xiàn)很...
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2產(chǎn)酶溶桿菌的滑行特征(摘自姜英華,2006;?Qiaim?al.,?2009)??Fig.?1-2?Morphology?of?gliding?motility?in?L.?enzymogens??
£?J?。蓿???』??圖1-2產(chǎn)酶溶桿菌的滑行特征(摘自姜英華,2006;?Qiaim?al.,?2009)??Fig.?1-2?Morphology?of?gliding?motility?in?L.?enzymogens??3產(chǎn)酶溶桿菌對植物病害的生防作用及機制??產(chǎn)酶溶桿菌對多種植物病原真菌、卵菌、細(xì)菌以及線蟲等均具有明顯的拮抗作用??(Palumbo?e/?a/.,2003;?Chen?e,?a/.,2006;?Li?C?a/.,?2006;?Qian?eM/.,2009;?2010)。目前被報??道的產(chǎn)酶溶桿菌有四種,包括腳3.1T8、L?N4-7、Z,?^?2>777〇講呢??C3、早期研究產(chǎn)酶溶桿菌對植物病害的防治主要集中在Z.??3.1T8、人?e;72>,mogcwdsI4-7、I.?C3?三個f中上。I.?3.1??T8對黃瓜褐斑病菌、辣椒疫霉、瓜果腐霉有很好的防治作用。進行溫室實驗發(fā)現(xiàn),??在苗期進行灌根處理,對黃瓜猝倒病防效可以達(dá)到81%,明顯降低病害發(fā)生幾率??(Folmanda/.,2003)。Z.?e%ymog^7eC3能高效防治高羊茅草葉斑病、草坪草褐斑病??(Giesler?&?Yuen
細(xì)菌運動性??溶桿菌沒有鞭毛,菌體的滑行運動主要是IV型菌毛(Type?IV?pili,T4P)介導(dǎo)的(twitching?motility,?TM)。實驗室前期研宄發(fā)現(xiàn)在詰抗真菌前期溶桿菌能夠菌的菌絲上,促進菌體釋放各種抗菌物質(zhì)于菌絲靶點位置,使菌絲快速的消發(fā)揮生防作用,其中吸附過程主要依賴于菌體的T4P介導(dǎo)的TM。T4P位于端部,它能介導(dǎo)細(xì)菌吸附到宿主的上皮細(xì)胞,并通過自身的收縮和伸展而使皮組織或固相表面產(chǎn)生位置移動,所以稱為蹭行運動(Semmlere/a/.,20hidda/.,2000)。在很多實驗室培養(yǎng)條件下觀察具有TM的細(xì)菌,發(fā)現(xiàn)菌落邊向外擴散形成稀薄的的擴散圈,這種現(xiàn)象在半固體的培養(yǎng)基表面上更加nrichsen,?1972)。因此,由T4P介導(dǎo)的TM被作為溶桿菌一種重要的生防機制。??TM在很多種細(xì)菌中都有發(fā)現(xiàn),研宄最多的有綠膿桿菌、淋球菌和粘細(xì)菌。菌細(xì)胞缺少鞭毛且在液體培養(yǎng)環(huán)境中無運動能力,但通過T4P其能夠在濕度較小固體介質(zhì)表面以2-4^m/min的速度進行運動(Shi&Zusman,?1993)。胞指細(xì)胞表面以外的多糖或是滑動介質(zhì)表面的多糖,有研宄證實TM與胞外
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]產(chǎn)酶溶桿菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆與表達(dá)[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,劉鳳權(quán). 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2008(02)
博士論文
[1]產(chǎn)酶溶桿菌生防相關(guān)基因的克隆、功能分析及工程菌構(gòu)建[D]. 錢國良.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
碩士論文
[1]一種新型生防菌菌株OH11的鑒定和生防效果研究[D]. 姜英華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號:3115445
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2產(chǎn)酶溶桿菌的滑行特征(摘自姜英華,2006;?Qiaim?al.,?2009)??Fig.?1-2?Morphology?of?gliding?motility?in?L.?enzymogens??
£?J?。蓿???』??圖1-2產(chǎn)酶溶桿菌的滑行特征(摘自姜英華,2006;?Qiaim?al.,?2009)??Fig.?1-2?Morphology?of?gliding?motility?in?L.?enzymogens??3產(chǎn)酶溶桿菌對植物病害的生防作用及機制??產(chǎn)酶溶桿菌對多種植物病原真菌、卵菌、細(xì)菌以及線蟲等均具有明顯的拮抗作用??(Palumbo?e/?a/.,2003;?Chen?e,?a/.,2006;?Li?C?a/.,?2006;?Qian?eM/.,2009;?2010)。目前被報??道的產(chǎn)酶溶桿菌有四種,包括腳3.1T8、L?N4-7、Z,?^?2>777〇講呢??C3、早期研究產(chǎn)酶溶桿菌對植物病害的防治主要集中在Z.??3.1T8、人?e;72>,mogcwdsI4-7、I.?C3?三個f中上。I.?3.1??T8對黃瓜褐斑病菌、辣椒疫霉、瓜果腐霉有很好的防治作用。進行溫室實驗發(fā)現(xiàn),??在苗期進行灌根處理,對黃瓜猝倒病防效可以達(dá)到81%,明顯降低病害發(fā)生幾率??(Folmanda/.,2003)。Z.?e%ymog^7eC3能高效防治高羊茅草葉斑病、草坪草褐斑病??(Giesler?&?Yuen
細(xì)菌運動性??溶桿菌沒有鞭毛,菌體的滑行運動主要是IV型菌毛(Type?IV?pili,T4P)介導(dǎo)的(twitching?motility,?TM)。實驗室前期研宄發(fā)現(xiàn)在詰抗真菌前期溶桿菌能夠菌的菌絲上,促進菌體釋放各種抗菌物質(zhì)于菌絲靶點位置,使菌絲快速的消發(fā)揮生防作用,其中吸附過程主要依賴于菌體的T4P介導(dǎo)的TM。T4P位于端部,它能介導(dǎo)細(xì)菌吸附到宿主的上皮細(xì)胞,并通過自身的收縮和伸展而使皮組織或固相表面產(chǎn)生位置移動,所以稱為蹭行運動(Semmlere/a/.,20hidda/.,2000)。在很多實驗室培養(yǎng)條件下觀察具有TM的細(xì)菌,發(fā)現(xiàn)菌落邊向外擴散形成稀薄的的擴散圈,這種現(xiàn)象在半固體的培養(yǎng)基表面上更加nrichsen,?1972)。因此,由T4P介導(dǎo)的TM被作為溶桿菌一種重要的生防機制。??TM在很多種細(xì)菌中都有發(fā)現(xiàn),研宄最多的有綠膿桿菌、淋球菌和粘細(xì)菌。菌細(xì)胞缺少鞭毛且在液體培養(yǎng)環(huán)境中無運動能力,但通過T4P其能夠在濕度較小固體介質(zhì)表面以2-4^m/min的速度進行運動(Shi&Zusman,?1993)。胞指細(xì)胞表面以外的多糖或是滑動介質(zhì)表面的多糖,有研宄證實TM與胞外
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]產(chǎn)酶溶桿菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆與表達(dá)[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,劉鳳權(quán). 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2008(02)
博士論文
[1]產(chǎn)酶溶桿菌生防相關(guān)基因的克隆、功能分析及工程菌構(gòu)建[D]. 錢國良.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
碩士論文
[1]一種新型生防菌菌株OH11的鑒定和生防效果研究[D]. 姜英華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號:3115445
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