除蟲(chóng)菊是有著較好殺蟲(chóng)活性并不易產(chǎn)生抗藥性的殺蟲(chóng)植物,其中的有效成分除蟲(chóng)菊素主要由除蟲(chóng)菊的花中提取,故產(chǎn)量受自然條件影響較大,通過(guò)組織培養(yǎng)方式生產(chǎn)除蟲(chóng)菊素具有很好的應(yīng)用價(jià)值。本試驗(yàn)利用根癌農(nóng)桿菌LBA4404和C58對(duì)除蟲(chóng)菊無(wú)菌苗和愈傷組織進(jìn)行誘導(dǎo),形成不定根和冠癭組織,利用真菌誘導(dǎo)子對(duì)除蟲(chóng)菊發(fā)狀根進(jìn)行處理,以期得到高產(chǎn)的除蟲(chóng)菊素生產(chǎn)體系;利用雷公藤不定根生產(chǎn)雷公藤紅素,探討H培養(yǎng)基中大量元素濃度對(duì)雷公藤紅素合成的影響。主要取得以下結(jié)果:1、除蟲(chóng)菊不定根可以通過(guò)不含冠癭組織轉(zhuǎn)化基因的根癌農(nóng)桿菌LBA4404誘導(dǎo)獲得,其生活力較好,可以在固體培養(yǎng)基以及液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng),并且沒(méi)有退化的跡象。其中沒(méi)能檢測(cè)到除蟲(chóng)菊素,卻可以檢測(cè)到治療阿爾茲海默病的特效成分雪花胺,同樣有著工業(yè)化生產(chǎn)的價(jià)值。2、利用除蟲(chóng)菊發(fā)狀根進(jìn)行雙轉(zhuǎn)化研究時(shí)發(fā)現(xiàn),乙酰丁香酮濃度為100μmol/L時(shí),雙轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)率最高為85%,負(fù)壓會(huì)降低除蟲(chóng)菊雙轉(zhuǎn)化的誘導(dǎo)率,根癌農(nóng)桿菌C58對(duì)發(fā)狀根雙轉(zhuǎn)化的誘導(dǎo)率要高于野生根癌農(nóng)桿菌,超聲處理對(duì)雙轉(zhuǎn)化的誘導(dǎo)率沒(méi)有影響。利用根癌農(nóng)桿菌C58誘導(dǎo)得到乳白色的除蟲(chóng)菊冠癭組織細(xì)胞,初步建立了除蟲(chóng)菊冠癭組織... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Ti質(zhì)粒virD（338bp）的PCR檢測(cè)：1:根癌農(nóng)桿菌；2~3:轉(zhuǎn)化的愈傷組織；4：轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的不定根；5:未轉(zhuǎn)化外植體;M:DL2000DNAMaker(從上至下依次為2000bp、1000bp、

由外植體得到的再生無(wú)菌苗

正常生長(zhǎng)的無(wú)菌苗

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]黃花敗醬發(fā)狀根培養(yǎng)體系的建立及其抑菌作用研究[J]. 趙雪,孔維軍,麻馨月,常桂英,董長(zhǎng)穎,楊世海.  世界中醫(yī)藥. 2015(12)
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[4]蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖含量的試驗(yàn)方法改進(jìn)[J]. 丁雪梅,張曉君,趙云,譚智敏,李玉梅,王鵬,唐鴻宇,叢彥龍,包國(guó)章,馬驥超,張金玉,沈景林.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2014(23)
[5]培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件對(duì)除蟲(chóng)菊細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J]. 李群,溫鵬飛,雷嘉敏,崔蕾,李琰,張興.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2014(11)
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[10]微量元素對(duì)雷公藤不定根生長(zhǎng)和次生代謝產(chǎn)物含量的影響[J]. 李琰,溫鵬飛,崔蕾,雷嘉敏,張興.  林業(yè)科學(xué). 2014(02)

博士論文
[1]雷公藤組織培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物及其代謝調(diào)控研究[D]. 李琰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008

碩士論文
[1]雷公藤不定根培養(yǎng)體系優(yōu)化及中試放大研究[D]. 趙磊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]苗藥雷公藤資源調(diào)查及雷公藤紅素提取工藝研究[D]. 何蒙薈媛.貴州民族大學(xué) 2016
[3]雷公藤不定根的兩步培養(yǎng)法及其代謝調(diào)控研究[D]. 雷嘉敏.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[4]雷公藤發(fā)狀根的鑒定和培養(yǎng)及其次生代謝物調(diào)控初步研究[D]. 馮慧娜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)玉米幼胚遺傳轉(zhuǎn)化研究[D]. 莊志揚(yáng).甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥非組培轉(zhuǎn)化方法的探討[D]. 王成杰.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[7]發(fā)根農(nóng)桿菌對(duì)煙草的轉(zhuǎn)化及發(fā)根培育和煙堿合成條件的優(yōu)化[D]. 卓文強(qiáng).中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[8]除蟲(chóng)菊素生物合成的初步研究[D]. 董建新.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003



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