煙粉虱Bemisia tabaci（Gennadius）,隸屬于半翅目粉虱科（Hemiptera:Aleyrodidae）,作為世界性經(jīng)濟害蟲,其寄主植物眾多,給全球范圍內(nèi)的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了巨大危害與經(jīng)濟損失。除吸食植物汁液造成直接危害外,煙粉虱也是傳播植物病毒效率最高的介體之一,瓜類褪綠黃化病毒（Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）就是由煙粉虱Bemisia tabaci B型和Q型以半持久性方式特異性傳播的。近年來,CCYV嚴重危害著我國及亞洲其他地區(qū)的瓜類植物等。很多研究證明植物病毒可以對介體昆蟲產(chǎn)生影響,但目前尚無CCYV對介體煙粉虱影響的系統(tǒng)研究。本研究以B型和Q型煙粉虱、瓜類褪綠黃化病毒及黃瓜等為研究材料,運用分子生物學、昆蟲生態(tài)學等技術(shù),研究CCYV對介體煙粉虱生長發(fā)育和繁殖的影響以及各齡期若蟲的帶毒能力。研究內(nèi)容包括:B型和Q型煙粉虱各齡期種群在健康和感染CCYV的寄主植物黃瓜上的存活率、體型大小、發(fā)育歷期以及各項生命參數(shù)等。此外,我們還利用實時熒光定量法檢測了B型、Q型煙粉虱在帶毒植株上各齡期若蟲的病毒量。期望本研究能為病毒-介體... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學河南省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

煙粉虱的生活史Fig.1ThelifehistoryofBemisiatabaci

圖 2 CCYV 侵染瓜類葉片的癥狀Fig. 2 Symptoms of CCYV infection on melon化病毒研究進展報道的一種新病毒，CCYV 的各項研究工作皆處于初始階段。寄主植抗性研究等方面是當下研究的集中熱點（Okuda et al., 2010; 袁媛, 2013; Okuda et al., 2013）。Okuda et al. (2010)對 CCYV 全序列進行8607 個核酸堿基（nucleotides）（GenBank AB523788），RNA2 有 8（GenBank AB523789）組成（圖 3）。Double antibody sandwich essay （雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法，簡稱 DAS-ELISA）是由 K的一種檢測 CCYV 的方法。隨后，在 2014 年 Wang et al. 建立了一種rse transcription loop-mediated isothermal amplification（環(huán)介導等溫擴方法可快速準確地檢測 CCYV，比常規(guī) RT-PCR 高 105倍。施艷等（達了瓜類褪綠黃化病毒的外殼蛋白，以表達產(chǎn)物為抗原，大量制備特確了煙粉虱傳播該病毒的獲毒時間、傳毒時間和持毒時間等傳毒行為

圖 3 瓜類褪綠黃化病毒（CCYV）的 RNA1 和 RNA2 序列（梁相志，2014）Fig. 3 The sequencing strategy of Cucurbit chlorotic yellows virus (CCYV) RNA1 and RNA2注：圖中矩形代表開放閱讀框（ORFs），黑色框代表預測的 RNA1 編碼的物質(zhì)：Met, 甲基轉(zhuǎn)移酶；Hel, R解旋酶 1；RdRp, 依賴于 RNA 的 RNA 聚合酶；TM，跨膜結(jié)構(gòu)域。RNA1 中的點線部分代表假定的切割位點。OR的名稱標在其下方。比例尺代表 1 kb。Note: Rectangles represent open reading frames (ORFs) in which predicted motifs are shown as filled boxes wnames indicated above: Met, viral methyltransferase; Hel, RNA helicase 1; RdRp, RNA-dependent RNA polymerase; Ttransmembrane domain. A dot-line in RNA1 indicates a presumed cleavage site. The names of ORFs are indicated belThe scale gives approximate sizes in kilobases.1.5 熒光定量技術(shù)1.5.1 熒光定量技術(shù)簡介Higuchi 在 1992 年提出并在 1996 年推出了一種基于 PCR 定性的核酸定量技術(shù) Real-tifluorescent quantitative PCR（實時熒光定量 PCR）。實時熒光定量 PCR 技術(shù)（real-time fluorescquantitative PCR）其主要原理為：在 PCR 擴增體系中，熒光染料或者探針與擴增產(chǎn)物相結(jié)合，

【參考文獻】：
期刊論文
[1]絲瓜多聚泛素基因（LcUBQ）的克隆及表達分析[J]. 陳敏氡,王彬,朱海生,溫慶放.  中國細胞生物學學報. 2018(01)
[2]建蘭花葉病毒SYBR Green I實時熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 梁芳,張燕,王若斕,許申平,程喜梅,崔波.  江西農(nóng)業(yè)大學學報. 2017(03)
[3]甜瓜褪綠黃化病的發(fā)生與傳毒介體煙粉虱群體數(shù)量關(guān)系的調(diào)查[J]. 劉珊珊,嚴蕾艷,王毓洪,古勤生.  中國瓜菜. 2016(11)
[4]馬鈴薯X病毒熒光定量PCR檢測體系的建立及應用[J]. 尚曉楠,吳蓓蕾.  植物保護. 2016(03)
[5]西藏發(fā)現(xiàn)Q型煙粉虱[J]. 盧少華,白潤娥,翟卿,王保海,閆鳳鳴.  應用昆蟲學報. 2016(01)
[6]煙粉虱的生物學及生態(tài)學特性研究[J]. 陶小祥,段瑞華,彭理,黃志寬.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2015(22)
[7]田間系統(tǒng)調(diào)查表明山東省農(nóng)區(qū)煙粉虱優(yōu)勢種為Q隱種[J]. 李洪冉,劉馨,劉小龍,李長友,沈長朋,陶云荔,褚棟.  昆蟲學報. 2015(07)
[8]煙粉虱B型和Q型競爭能力的室內(nèi)比較分析[J]. 盧少華,李靜靜,劉明楊,白潤娥,湯清波,閆鳳鳴.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2015(07)
[9]瓜類黃化褪綠病毒上海分離物外殼蛋白的原核表達及其抗血清的制備[J]. 曾蓉,徐麗慧,顧海峰,陸金萍,戴富明.  中國農(nóng)學通報. 2014(22)
[10]中國部分地區(qū)煙粉虱生物型種類及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析[J]. 許麗麗,蔡力,沈偉江,杜予州.  應用生態(tài)學報. 2014(04)

博士論文
[1]煙粉虱-雙生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的調(diào)控機制[D]. 孫艷春.浙江大學 2016
[2]浙江外來煙粉虱入侵過程及不同生物型煙粉虱生物學特性的比較研究[D]. 徐婧.浙江大學 2009

碩士論文
[1]番茄褪綠病毒的分子鑒定及熒光定量PCR檢測體系的建立與應用[D]. 高利利.山東農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]B型、Q型煙粉虱傳播番茄黃化曲葉病毒的差異研究[D]. 寧雯熙.東北農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]煙草營養(yǎng)對Q型煙粉虱發(fā)育、存活和寄主選擇性的影響及其機理研究[D]. 金鵬.安徽農(nóng)業(yè)大學 2015
[4]煙粉虱—病毒—寄主植物之間互作特性的研究[D]. 陳功.湖南農(nóng)業(yè)大學 2014
[5]熒光定量PCR方法在土傳煙草青枯病生防研究中的應用[D]. 陳巧玲.南京農(nóng)業(yè)大學 2011



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