大熊貓因其物種特殊性,圈養(yǎng)條件下難以準確判斷發(fā)情排卵時間,難配種,難受孕。檢測大熊貓尿液雌二醇（Estradiol,E₂）與孕酮（Progesterone,P₄）濃度變化規(guī)律,有助于準確判斷大熊貓的發(fā)情、受精、懷孕等生殖活動。而現(xiàn)今市場上缺乏成熟的商品化可用于檢測秦嶺大熊貓尿液中E₂和P₄的試劑盒。酶聯(lián)免疫法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）操作簡單、快捷,靈敏性性高,是目前較為成熟可靠的激素檢測方法之一。本研究旨在開發(fā)出可用于秦嶺大熊貓尿液E₂和P₄檢測的ELISA試劑盒,建立秦嶺大熊貓發(fā)情、妊娠檢測技術體系,為檢測大熊貓的生殖活動提供理論依據(jù)。主要研究內(nèi)容和結果如下:（1）制備了可用于試驗動物免疫及酶標板包被的完全抗原E₂-BSA、E₂-OVA、P₄-BSA、P₄-OVA,其中E₂-BSA的偶聯(lián)比... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
文獻綜述
    第一章 大熊貓生殖激素檢測研究進展
        1.1 秦嶺大熊貓的現(xiàn)狀
        1.2 秦嶺大熊貓的生殖激素變化
            1.2.1 大熊貓自身的繁殖能力
            1.2.2 雌性大熊貓發(fā)情期的激素變化
            1.2.3 大熊貓妊娠期的激素變化
        1.3 生殖激素檢測的研究進展
            1.3.1 樣品的采集
            1.3.2 大熊貓生殖激素檢測方式的發(fā)展
            1.3.3 ELISA試劑盒在大熊貓上的應用
        1.4 半抗原與完全抗原
            1.4.1 載體的選擇
            1.4.2 半抗原活化物與載體的偶聯(lián)
        1.5 本研究的目的及意義
試驗研究
    第二章 完全抗原與多克隆抗體的制備
        2.1 試驗材料
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器耗材
        2.2 試驗方法
2及P₄完全抗原的制備與鑒定">            2.2.1 E₂及P₄完全抗原的制備與鑒定
2和P₄完全抗原的鑒定">            2.2.2 E₂和P₄完全抗原的鑒定
            2.2.3 試驗動物免疫
            2.2.4 抗血清的檢測
        2.3 試驗結果
2和P₄完全抗原的鑒定">            2.3.1 E₂和P₄完全抗原的鑒定
            2.3.2 抗血清的檢測
        2.4 試驗討論
            2.4.1 完全抗原的制備與鑒定
            2.4.2 多克隆抗體的制備與檢測
        2.5 試驗小結
2和P₄ ELISA檢測方法的建立">    第三章 大熊貓尿液中E₂和P₄ ELISA檢測方法的建立
        3.1 試驗材料
        3.2 試驗方法
            3.2.1 間接競爭ELISA試驗基本步驟
            3.2.2 酶標板均一性檢測
            3.2.3 ELISA反應條件的篩選
            3.2.4 ELISA標準曲線的繪制
            3.2.5 ELISA試劑盒的性能檢測
            3.2.6 ELISA試劑盒臨床尿樣檢測
        3.3 試驗結果
            3.3.1 酶標板均一性檢測結果
2 ELISA試劑盒反應條件的篩選">            3.3.2 E₂ ELISA試劑盒反應條件的篩選
2 ELISA試劑盒的性能檢測">            3.3.3 E₂ ELISA試劑盒的性能檢測
4 ELISA試劑盒反應條件的篩選">            3.3.4 P₄ ELISA試劑盒反應條件的篩選
4 ELISA試劑盒的性能檢測">            3.3.5 P₄ ELISA試劑盒的性能檢測
            3.3.6 ELISA試劑盒的驗證
            3.3.7 ELISA試劑盒的臨床檢驗
        3.4 試驗討論
2和P₄間接競爭ELISA的建立">            3.4.1 E₂和P₄間接競爭ELISA的建立
            3.4.2 ELISA試劑盒的臨床檢驗
        3.5 試驗小結
結論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介



本文編號：3066106