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一種線性雙鏈RNA病毒的鑒定及其分子生物學(xué)特性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-04 23:08
  山茶刺盤孢菌(Colletotrichum camelliae Massee)可寄生茶樹引起茶云紋葉枯病(Tea Brown Blight)。該病是危害茶樹葉的最常見病害,在世界各茶區(qū)分布廣泛,造成葉枯、芽壞死以及枯萎等癥狀,從而導(dǎo)致茶葉的產(chǎn)量和質(zhì)量的嚴(yán)重下降。本研究從茶葉片上分離得到茶云紋葉枯病菌株LT-3-1,相比正常的茶云紋葉枯病菌株DP-3-1,菌株LT-3-1的菌落形態(tài)較異常,生長(zhǎng)速度較緩慢,致病力也較弱。通過提取LT-3-1和DP-3-1菌株菌絲的dsRNA,發(fā)現(xiàn)LT-3-1中存在8條dsRNA片段,大小分別為2444、2253、2012、1299、1122、1085、1053和990bp,共編碼了10個(gè)開放閱讀框(Open Reading Frame Finder,ORF)。其中dsRNA1、-2、-3、-4、-6、-7都編碼一個(gè)獨(dú)立的開放閱讀框,依次命名為ORF1、ORF2、ORF3、ORF4、ORF6、ORF7,而dsRNA5和-8分別編碼ORF5-1、ORF5-2和ORF8-1、ORF8-2。其中ORF1編碼依賴RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RN... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:94 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

一種線性雙鏈RNA病毒的鑒定及其分子生物學(xué)特性研究


菌株DP-3-1和LT-3-1ApMat基因片段的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳分析

菌落形態(tài),山茶,菌絲生長(zhǎng)速度,刺盤孢


112 山茶刺盤孢菌 DP-3-1 和 LT-3-1 的菌落形態(tài)(I)、菌絲生長(zhǎng)速度(III)和病力分析(II 和 IV).2 Colony morphology(I),growth rate (III) and pathogenicity (II and Istrains DP-3-1 and LT-3-1

序列,菌株,條帶,分子量


的提取及酶處理驗(yàn)證 LT-3-1 和 DP-3-1 的核酸之后,用 DNase I 、 S1 核酸酶后發(fā)現(xiàn),只有菌株 LT-3-1中有 8條 dsRNA條帶,大小在 名為 dsRNA1-dsRNA8(圖 3.1)。 全長(zhǎng) cDNA 序列的克隆與分析膠電泳切膠分離純化回收各 dsRNA 條帶后,經(jīng)隨機(jī)克隆到各條帶的全長(zhǎng) cDNA 序列,dsRNA1-dsRNA8 的大小分1299、1122、1085、1053 和 990 bp,在 GenBank 中相應(yīng)66-KX778773。其中 dsRNA1- dsRNA4,以及 dsRNA6,d且為 ORF1-ORF4、ORF6、ORF7,而 dsRNA5 編碼 ORF碼 ORF8-1、ORF8-2(圖 3.2)。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]5-氟尿嘧啶多克隆抗體的制備和鑒定[J]. 高宇馳,賈巖,王鑫,盧遠(yuǎn)彬,代友超,余詩炎,張俊愛,徐軍發(fā).  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2016(03)
[2]茶云紋葉枯病的發(fā)生規(guī)律及防治[J]. 韓必新.  農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究. 2015(06)
[3]茶云紋葉枯病的發(fā)生與藥劑防治試驗(yàn)[J]. 李正英,姚永松.  茶葉科學(xué)技術(shù). 2011(02)
[4]茶樹云紋葉枯病病原鑒定及其生物學(xué)特性研究[J]. 王志坤,譚萬忠,張克誠,唐繼洪,殷利利.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(04)
[5]柑橘衰退病毒多克隆和單克隆抗體的制備及檢測(cè)效果分析[J]. 王彩霞,王國平,洪霓,姜波,劉輝,吳康為.  生物工程學(xué)報(bào). 2006(04)
[6]甜菜壞死黃脈病毒外殼蛋白基因的表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物抗血清的制備[J]. 姚華建,于嘉林,金元,劉儀.  病毒學(xué)報(bào). 1994(01)

碩士論文
[1]禾谷鐮刀菌AMT1基因的功能研究[D]. 王光輝.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[2]蘋果莖痘病毒的鑒定及其外殼蛋白基因的原核表達(dá)[D]. 楊紹麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào):3064099

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