小菜蛾P(guān)lutella xylostella（L.）是一種危害十字花科作物的世界性害蟲。自上世紀(jì)80年代開始,阿維菌素由于被大量用于農(nóng)業(yè)害蟲防治（包括小菜蛾）而導(dǎo)致高水平抗性的產(chǎn)生。小菜蛾具有遷飛的特性,盡管已有大量的研究闡述了其在我國北方的抗藥性現(xiàn)狀和部分抗性機制,但是對于持續(xù)的種群動態(tài)研究還很少。本研究采用性誘劑對我國北方四個地區(qū)（北京昌平區(qū)和海淀區(qū),河北宣化縣和張北縣）小菜蛾進(jìn)行了長期種群監(jiān)測,實地調(diào)研掌握了上述地區(qū)十字花科蔬菜種植的田間實際管理情況,然后基于DYMEX模型,對誘捕數(shù)據(jù)和田間種植模式進(jìn)行了季節(jié)性物候和種群趨勢豐度模擬分析,旨在明確我國北方地區(qū)小菜蛾種群的來源和相關(guān)影響因素。為了進(jìn)一步明確小菜蛾對阿維菌素的抗性機制,在前期研究基礎(chǔ)上,采用RNA干擾技術(shù)研究了P-糖蛋白（P-glycoprotein,Pgp）基因在小菜蛾對阿維菌素抗性中的作用,旨在闡明小菜蛾對阿維菌素的抗性機制,延緩阿維菌素類藥劑的使用壽命,為農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)提供技術(shù)參考。采用性信息素誘捕技術(shù)對北京海淀區(qū)和昌平地區(qū)（2009年-2015年）、河北宣化縣和張北縣（2009年-2014年）田間小菜蛾的種群動... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 種群動態(tài)模型
        1.1.1 種群動態(tài)研究的發(fā)展
        1.1.2 種群動態(tài)模型的研究進(jìn)展
    1.2 性誘劑在昆蟲中的應(yīng)用
        1.2.1 性誘劑的發(fā)展與應(yīng)用
        1.2.2 性誘劑在小菜蛾種群動態(tài)中的應(yīng)用
    1.3 小菜蛾的抗藥性
        1.3.1 小菜蛾抗性現(xiàn)狀
        1.3.2 小菜蛾抗性機理研究
            1.3.2.1 代謝抗性
            1.3.2.2 靶標(biāo)位點突變
            1.3.2.3 表皮穿透作用降低
            1.3.2.4 ABC轉(zhuǎn)運蛋白
        1.3.3 小菜蛾對阿維菌素抗性
        1.3.4 阿維菌素抗性機制
        1.3.5 小菜蛾阿維菌素抗性發(fā)展
    1.4 RNA干擾技術(shù)
        1.4.1 RNA干擾作用原理
        1.4.2 RNA干擾技術(shù)的應(yīng)用
            1.4.2.1 RNA干擾技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
            1.4.2.2 RNA干擾技術(shù)在昆蟲防治領(lǐng)域的應(yīng)用
            1.4.2.3 RNA干擾技術(shù)在昆蟲抗藥性中的應(yīng)用
    1.5 本研究的內(nèi)容和目的意義
        1.5.1 研究的內(nèi)容和方法
        1.5.2 技術(shù)路線
        1.5.3 研究的目的意義
第二章 基于DYMEX模型的小菜蛾種群動態(tài)分析
    2.1 試驗地點概況
    2.2 試驗材料
    2.3 試驗方法
        2.3.1 氣象資料獲取方法
        2.3.2 小菜蛾田間實際管理數(shù)據(jù)收集
        2.3.3 性誘劑誘捕田間小菜蛾試驗方法
        2.3.4 不同模塊模擬分析方法
            2.3.4.1 DYMEX分析模型關(guān)鍵組成部分
            2.3.4.2 作物模塊分析方法
            2.3.4.3 小菜蛾生活史模塊分析方法
            2.3.4.4 殺蟲劑的施用模塊分析方法
            2.3.4.5 小菜蛾種群場景模擬分析方法
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 小菜蛾田間防治
        2.4.2 小菜蛾田間發(fā)生動態(tài)
        2.4.3 小菜蛾春季遷入量與全年發(fā)生量的關(guān)系
        2.4.4 種群動態(tài)模擬
            2.4.4.1 田間種植模式模擬
            2.4.4.2 季節(jié)性物候?qū)W模擬
            2.4.4.3 種群豐度趨勢模擬
            2.4.4.4 基于四種場景小菜蛾種群數(shù)量模擬
    2.5 結(jié)論與討論
第三章 PxPgp1基因在小菜蛾對阿維菌素抗性中的作用
    3.1 試驗材料和儀器
        3.1.1 供試?yán)ハx
        3.1.2 供試蔬菜
        3.1.3 試驗試劑和試劑盒
            3.1.3.1 生物測定測藥劑
            3.1.3.2 主要試劑及試劑盒
        3.1.4 主要儀器
        3.1.5 培養(yǎng)基及常用溶液
        3.1.6 引物和測序
        3.1.7 生物信息學(xué)工具
    3.2 試驗方法
        3.2.1 小菜蛾室內(nèi)飼養(yǎng)及阿維菌素汰選方法
            3.2.1.1 小菜蛾的室內(nèi)飼養(yǎng)
            3.2.1.2 阿維菌素抗性小菜蛾的汰選
            3.2.1.3 阿維菌素對小菜蛾的生物測定
        3.2.2 小菜蛾P(guān)xPgp1基因的RNA干擾方法
            3.2.2.1 RNA的提取
            3.2.2.2 cDNA的合成
            3.2.2.3 dsRNA合成引物的篩選
            3.2.2.4 目的產(chǎn)物的擴(kuò)增程序
            3.2.2.5 PCR產(chǎn)物的回收與純化
            3.2.2.6 PCR產(chǎn)物與pEASY-T5載體的連接、轉(zhuǎn)化
            3.2.2.7 陽性克隆檢測
            3.2.2.8 序列測定
            3.2.2.9 dsRNA的體外合成
            3.2.2.10 dsRNA的顯微注射
            3.2.2.11 基因相對表達(dá)量分析
            3.2.2.12 小菜蛾P(guān)xPgp1基因干擾后對阿維菌素的敏感性測定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 小菜蛾阿維菌素抗性篩選
        3.3.2 小菜蛾P(guān)xPgp1基因的RNA干擾結(jié)果
            3.3.2.1 小菜蛾RNA的提取
            3.3.2.2 dsEGFP的DNA模板
            3.3.2.3 小菜蛾P(guān)xPgp1基因RNA干擾引物篩選
            3.3.2.4 小菜蛾P(guān)xPgp1基因的RNA干擾
            3.3.2.5 小菜蛾P(guān)xPgp1基因沉默后對阿維菌素的敏感性
    3.4 結(jié)論與討論
第四章 全文結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
圖版



本文編號：3040840