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轉(zhuǎn)錄因子OsbHLH35在水稻抗褐飛虱中的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-24 17:03
  水稻(Oryza sativa)是我國最主要的糧食作物之一,在糧食安全中發(fā)揮著非常重要的作用。褐飛虱(Nilaparvata lugens,brown rice planthopper,BPH)是我國水稻生產(chǎn)上的重要害蟲,嚴(yán)重影響水稻的產(chǎn)量和品質(zhì)。培育抗蟲品種被認(rèn)為是防治BPH的最佳途徑,但BPH致害能力的高度可塑性使傳統(tǒng)的抗性育種和應(yīng)用不能持續(xù)控制該蟲害,因此,防治BPH危害的關(guān)鍵是不斷發(fā)現(xiàn)并利用新型有效的抗BPH基因來進(jìn)行抗性新品種培育。植物遭受植食性昆蟲侵害時(shí)能夠產(chǎn)生誘導(dǎo)抗蟲反應(yīng),其分子機(jī)理一直是研究熱點(diǎn)。植食性昆蟲侵害誘導(dǎo)植物中大量基因的轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生變化,轉(zhuǎn)錄因子在植物中起著重要的作用。bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族是植物轉(zhuǎn)錄因子中最大的家族之一,普遍地參與了植物的生長發(fā)育以及應(yīng)對生物和非生物脅迫,但其在水稻應(yīng)答B(yǎng)PH危害過程中的調(diào)控機(jī)理尚不明確。實(shí)驗(yàn)室前期利用了 GatewayTM大規(guī)模克隆技術(shù),把水稻轉(zhuǎn)錄因子構(gòu)建到轉(zhuǎn)錄激活因子與轉(zhuǎn)錄抑制因子上,通過遺傳與轉(zhuǎn)化獲得了 57,751份分別帶有轉(zhuǎn)錄因子功能獲得和功能喪失的獨(dú)立轉(zhuǎn)基因水稻株系。基于實(shí)驗(yàn)室前期通過苗期集團(tuán)篩選法進(jìn)行抗蟲性篩選,發(fā)... 

【文章來源】:福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

轉(zhuǎn)錄因子OsbHLH35在水稻抗褐飛虱中的功能研究


bHi,H結(jié)構(gòu)

擬南芥,轉(zhuǎn)錄因子


于bHLH錄因子研,就對滯后了。1989年Ludwig從??玉米(Ze<7?7Hfl.usO中首次分離了一個(gè)與花青素合成有關(guān)的擁有bHLH基序的蛋白??LC【85]。直至今日,通過全基因組測序從擬南芥、水稻、煙草(Mco//臟??/Mac謂)、??葡萄(松/■??w_n_/^ra)、番前(So/an_/_vco/?era_cww2)等中分別獲得?164、180、??190、丨9丨和159個(gè)bHLH轉(zhuǎn)錄因子。通過基因序列的系統(tǒng)發(fā)生分析,顯示??植物bHLH轉(zhuǎn)錄因子大多屬于B組。Buck等研宄發(fā)現(xiàn)擬南芥的bHLH成員中有??104個(gè)屬于8組[_;?Heim等研究結(jié)果也表明,植物bHLH轉(zhuǎn)錄因子大部分屬于??B組鑒于植物與動(dòng)物兩者的bHLH轉(zhuǎn)錄因子系統(tǒng)發(fā)生相互獨(dú)立,于是植物??bHLH分類與動(dòng)物不同。由于只有小部分植物bHLH蛋白的功能得到較為透徹的??研究,局限在模式植物中,所以現(xiàn)在植物bHLH轉(zhuǎn)錄因子各個(gè)家族都還沒對應(yīng)的??稱號(hào)。在Buck等的研究中,把植物的295個(gè)bHLH劃分為了?15個(gè)進(jìn)化支[_。??由于模式植物擬南芥和水稻的全基因組測序在較早時(shí)候完成了,所以多數(shù)研究者??對這兩種植物的bHLH家族進(jìn)行了分類,如Heim等的研究將擬南芥133個(gè)bHLH??劃分為12個(gè)主要組Toeldo-Oritz等將147個(gè)擬南芥bHLH轉(zhuǎn)錄因子分成21??個(gè)家族[89];?Li等則將水稻的167個(gè)bHLH分成22個(gè)家族_,依據(jù)bHLH結(jié)構(gòu)??域N端序列特征,將水稻和擬南芥中的bHLH分成4個(gè)小組[,圖1-2)。??

示意圖,轉(zhuǎn)錄因子,轉(zhuǎn)基因水稻,表達(dá)載體構(gòu)建


課題組合作,利用Gateway?大規(guī)?寺〖夹g(shù)將水稻轉(zhuǎn)錄因子構(gòu)建到轉(zhuǎn)錄激活子??與轉(zhuǎn)錄抑制子上,通過遺傳轉(zhuǎn)化得到57,751份分別帶有轉(zhuǎn)錄因子功能獲得和功??能喪失的獨(dú)立轉(zhuǎn)基因水稻株系,包含了水稻絕大部分轉(zhuǎn)錄因子(圖1-3)。??A?2S〇1?EAR4/VP64???〇〇?8?P6NE.PBW?i?__圓?|?1丨|;丨?|||_||??!|il^??圖1-3轉(zhuǎn)錄因子激活和抑制表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻材料信息[117]??(A)已克隆到的各個(gè)家族轉(zhuǎn)錄因子成員數(shù)量;(B)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)載體構(gòu)建示意圖。pBNE、??pBNV、pBCE、pBCV:含有Basta?(除草削)選擇標(biāo)記的T載體:pHNE、pHNV:含有潮??霉素選擇標(biāo)記的T載體。??Fig?1-3?The?infomiation?of?transcription?factor?activates?and?inhibits?expression?of?transgenic?rice??materials[丨17】??(A)?The?members?of?each?family?of?transcription?factors?that?have?been?cloned;?(B)?Construction??of?transcription?factor?expression?vector.?pBNE,?pBNV,?pBCE,?pBCV:?T-vectors?that?contain?Basta??selection?markers;?pHNE

【參考文獻(xiàn)】:
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碩士論文
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[7]秈稻恢復(fù)系褐飛虱和白葉枯病抗性的篩選及其遺傳分析[D]. 方洪民.浙江大學(xué) 2002



本文編號(hào):2997607

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