發(fā)布時間：2020-12-30 15:05

　　幾丁質(zhì)是昆蟲重要的組成成分,幾丁質(zhì)代謝系統(tǒng)的正常運轉(zhuǎn)對昆蟲蛻皮至關(guān)重要。β-N-乙酰葡萄糖苷酶和幾丁質(zhì)酶作為幾丁質(zhì)降解的關(guān)鍵酶,對昆蟲生長發(fā)育具有重要的意義。黏蟲Mythimna separata Walker作為我國糧食作物的主要害蟲,近年來,在我國多個省市地區(qū)大發(fā)生,造成了高密度的集中危害,對我國糧食安全造成嚴(yán)重的威脅。由于幾丁質(zhì)在高等動植物體內(nèi)沒有分布,因此,將β-N-乙酰葡萄糖苷酶和幾丁質(zhì)酶基因作為黏蟲生物農(nóng)藥新的靶標(biāo)基因,是害蟲生物防治技術(shù)研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以黏蟲為試驗材料,克隆獲得新的β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因MsNAG和幾丁質(zhì)酶基因MsCHT7的cDNA序列,并研究黏蟲兩種基因在不同發(fā)育階段和組織中的表達(dá)規(guī)律,及20-羥基蛻皮甾酮（20E）對兩種基因表達(dá)的影響;利用RNAi技術(shù),對MsNAG基因進(jìn)行功能性研究,為黏蟲的生物技術(shù)防治提供新思路。利用RT-PCR和RACE技術(shù)在黏蟲中克隆得到β-N-乙酰葡萄糖苷酶MsNAG的cDNA序列。cDNA序列全長2619 bp,包含1個長度為1785 bp的開放閱讀框,編碼一個含有594個氨基酸的多肽,等電點為5.19,分子量為57.8... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

黏蟲MsNAGcDNA序列全長克隆產(chǎn)物100bp

其中黏蟲 MsNAG 基因氨基酸的信號肽切割位點在 20 和 21 位之間（圖3-5A），MsCHT7 基因氨基酸的信號肽在 26 和 27 位之間（圖 3-5B）。A

齡幼蟲；3：蛹期；4 成蟲2: 6thinstar larvae; 3: pupae; 4: adults圖 3-17 注射 dsRNA 后昆蟲的死亡率Figure 3-17 Insects mortalities after dsRNA injection


本文編號：2947847