昆蟲耐受異源物質(zhì)的主要機(jī)制是解毒代謝酶基因過量表達(dá)導(dǎo)致解毒酶活力增加,且解毒酶基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。本文以水稻重要害蟲褐飛虱為研究材料,克隆和鑒定了褐飛虱三個bZIP超家族基因轉(zhuǎn)錄因子激活伴侶NlATFC、轉(zhuǎn)錄因子CAAT區(qū)增強(qiáng)子結(jié)合蛋白NlCEBP和轉(zhuǎn)錄因子環(huán)腺苷酸反應(yīng)元件結(jié)合蛋白NlCREB,以及藥劑脅迫下三個基因的表達(dá)模式,結(jié)合RNAi探究了三個基因的生物學(xué)功能。主要結(jié)果如下:1.根據(jù)NCBI和InsectBase數(shù)據(jù)庫分析,結(jié)合PCR技術(shù),克隆了 bZIP超家族基因NlATF、NlCEBP和NlCREB cDNA的全長序列,其ORF長度分別為1197 bp、447 bp和906 bp,分別編碼397、148和301個氨基酸殘基,均具有典型的bZIP結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)發(fā)育分析表明褐飛虱的NlATFC與半翅目的煙粉虱親緣關(guān)系較近,而NlCEBP和NlCREB均與半翅目的茶翅蝽的親緣關(guān)系較近。2.利用qRT-PCR分析了褐飛虱NlA TFC、NlCEBP和NlCREB時空表達(dá)模式,結(jié)果表明NlATFC、NlCEBP和NlCREB在褐飛虱不同發(fā)育階段均有表達(dá),NlATFC在卵期... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ｂＺＩＰ基序－ＤＮＡ復(fù)合體結(jié)構(gòu)（熊樂２０１６）??Ｆｉｇ?１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｂＺＩＰ?ｍｏｔｉｆ－ＤＮＡ?ｃｏｍｐｌｅｘ??

３．２．２?Ｍ４７ＴＣ、ＭＣＭ尸和在褐飛虱不同發(fā)育階段的表達(dá)譜??為了探索ＭＪｒＦＣ、和Ａ７ａ？￡５在褐飛虱生長發(fā)育中的作用，采用實(shí)時??熒光定量ＰＣＲ分析了其在不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。結(jié)果如圖９所示，在??卵期的表達(dá)量較高，且表達(dá)量隨齡期的增長而下降，其中４齡若蟲期表達(dá)量最低，５??齡若蟲和成蟲期略有升高；尸在卵期和成蟲期的表達(dá)量較高，其余發(fā)育階段??均維持在一個相對穩(wěn)定且較低的水平；ＭＣ／？五５在成蟲期的表達(dá)量最高，在２齡若??蟲和４齡若蟲期表達(dá)量較低。表明了?ＪＶＬ４７ＦＣ和ｉＶ／ＣＭＰ可能在褐飛虱卵期發(fā)育過??程中具有重要意義，而和可能與褐飛虱成蟲期的生理活動相關(guān)。??３８??

??結(jié)果如圖１０所示，Ｍ４７ＦＣ在中腸的表達(dá)量較高；而ＭＣ￡５Ｐ在脂肪體和馬氏管的??表達(dá)量較高；在中腸和馬氏管的表達(dá)量較高。７ＶＬ４７ＦＣ、和??均在頭部和表皮的表達(dá)量較低，而在脂肪體、中腸和馬氏管中表達(dá)量較高，表明??ＭｊｒＦＣ、ＭＣＥ５Ｐ和Ａ７Ｃ７？￡５可能與褐飛虱脂肪體、中腸和馬氏管功能密切相關(guān)。??Ａ??５ｎ??ｉ?４?ａ??ｉ??ｉ：ｌｉ?■?■?Ｉ?ｉ??Ｈｅａｄ?Ｃｕｔｉｃｌｅ?Ｆａｔ?ｂｏｄｙ?Ｍｉｄ?ｇｕｔ?Ｍａｌｐｉｇｈｉａｎ?ｔｕｂｅ??Ｂ??６－??Ｉ，??ｉＬｉｉｉ??Ｈｅａｄ?Ｃｕｔｉｃｌｅ?Ｆａｔ?ｂｏｄｙ?Ｍｉｄ?ｇｕｔ?Ｍａｌｐｉｇｈｉａｎ?ｔｕｂｅ??Ｃ??ｔ］?ｉｉ??ｉｊ??Ｉ?Ｉ??Ｈｅａｄ?Ｃｕｔｉｃｌｅ?Ｆａｔ?ｂｏｄｙ?Ｍｉｄ?ｇｕｔ?Ｍａｌｐｉｇｈｉａｎ?ｔｕｂｅ??圖１０?Ｍｄ７ＦＣ（Ａ）、ＭＣ￡ＡＰ?（Ｂ）和ＭＣ兄Ｍ?（Ｃ）在不同組織的表達(dá)模式??（柱形圖表示平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤，柱上不同字母表示顯著性差異（Ｐ＜０．０５））??Ｆｉｇ?１０?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｐａｔｔｅｒｎｓ?ｏｆ?ＮＩＡＴＦＣ?（Ａ），?ＮＩＣＥＢＰ?（Ｂ）?ａｎｄ?ＮＩＣＲＥＢ?（Ｃ）?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ??（Ｂａｒ?ｇｒａｐｈ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｍｅａｎ土ＳＥ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｏｎ?ｅａｃｈ?ｂａｒ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｔｈｅ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ??（Ｐ＜０．０５））??４０??


本文編號：2944621