中國不同地區(qū)舞毒蛾mtDNA序列分析及飼養(yǎng)技術(shù)優(yōu)化
【學(xué)位單位】:北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S763.42
【部分圖文】:
本研究共采集了?6個(gè)國家共22個(gè)地理種群的舞毒蛾樣本,相比之前的研究,著??重加大了中國舞毒蛾的采集量。在構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹時(shí),部分COI序列數(shù)據(jù)來自于前期??(Chen?etal.,2015)的研究。詳細(xì)樣本采集信息和序列數(shù)據(jù)見圖2-1,表2-1、2-2。??采集到的舞毒蛾卵塊經(jīng)過消毒處理后,在實(shí)驗(yàn)室孵化并飼養(yǎng)至老熟幼蟲,將老熟幼蟲??饑餓處理24h后用無水乙醇?xì)⑺,后置于-8?#176;C超低溫冰箱(VX380F,Thermo,USA)??凍存,以備DNA的提取。誘捕得到的成蟲烘干后置于三角紙中低溫保存,在需要提??。模危?xí)r取出。國內(nèi)樣本的采集都經(jīng)森林保護(hù)總站批準(zhǔn),國外樣本來源于經(jīng)檢疫部??門許可的舞毒蛾引進(jìn)項(xiàng)目,飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)在動(dòng)植物檢疫室內(nèi)完成。??12??
舞毒蛾樣本采集自40個(gè)地區(qū),其中中國有17個(gè),日本6個(gè),韓國3個(gè),哈薩克??斯坦1個(gè),吉爾吉斯斯坦1個(gè),俄羅斯3個(gè),伊朗1個(gè),歐洲5個(gè),美國3個(gè)。采集??地點(diǎn)及每個(gè)采集地的取樣數(shù)量見圖3-1、表3-1。部分樣本數(shù)據(jù)由美國農(nóng)業(yè)部APHIS??提供。對幼蟲進(jìn)行饑餓處理24小時(shí)后,將幼蟲浸泡在無水乙醇中殺死并脫水備用。??舞毒蛾成蟲毒殺后烘干保存,后進(jìn)行DNA提取。提取基因組DNA具體方法及其質(zhì)??量檢測操作見2.2.2?DNA提取方法。??|?????'?I??0?1,000?'?N??:^^丨::??::??AV?{.0?,-?ft'OT.?fcV?10(1*?0*0*F.?|(KV?O'?0*F?JlO*?0'0*K?115*?0?ft"F?〇?〇*?.?。浚遥?〇?〇????圖3-1線粒體DNA研宄中的舞毒蛾采樣分布圖??Fi
以LvwM/r/^r?wwArosa為外群的基于4個(gè)線粒體蛋白質(zhì)編碼基因的tfopa/*?分歧日期分析,并假設(shè)每個(gè)位點(diǎn)每年替換率為l.blO'樣本根據(jù)其地理來源以不色編碼。后驗(yàn)概率顯示在分支上方。分支長度與分歧時(shí)間成正比(Mya)。??-2?MtDNA?genealogy?and?divergence?dates?of?Lymantria?dispar?derived?from?four?mitocho-coding?genes?and?assuming?substitution?rates?of?l.?I?x?10-8?per?site?per?year.?Lymantria?ulected?as?the?outgroup.?Samples?are?coded?in?different?colors?according?to?their?geographicior?probability?and?bootstrap?value?are?shown?above?the?branches.?Branch?lengths?are?propoto?divergence?times?in?millions?of?years?(Mya).??27??
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):2885722
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