發(fā)布時(shí)間：2020-09-24 07:15

　　 由大豆疫霉(Phytophthora sojae)引起的大豆疫病是大豆生產(chǎn)中的毀滅性病害。生產(chǎn)上用甲霜靈防治大豆疫病時(shí)出現(xiàn)了抗藥性,同種類型的高效殺菌劑苯霜靈田間應(yīng)用較少。另外,氟吡菌胺是目前開發(fā)的抑菌結(jié)構(gòu)新穎的苯甲酰胺類殺菌劑,國內(nèi)外均有對(duì)辣椒疫霉的相關(guān)研究,在大豆疫霉上未見報(bào)道。因此,本研究主要從大豆疫霉對(duì)兩種殺菌劑的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)、抗藥性生理生化機(jī)制、以及有效的植物提取物篩選等幾個(gè)方面來開展研究。研究的主要結(jié)果如下:1、通過有性生殖+紫外誘變獲得9株氟吡菌胺抗性菌株,突變頻率為2.25%,抗性水平在502.9~1063.3倍之間。通過有性生殖+藥劑選擇獲得6株苯霜靈抗性菌株,突變頻率為2%,抗性水平分別在52.0~97.2倍之間。在相關(guān)抗性突變體中,氟吡菌胺抗性菌株F6-1、F6-3、F6-4、F7-1、F7-2、F7-4可以穩(wěn)定遺傳,雖然其菌絲生長、產(chǎn)孢子囊能力、產(chǎn)卵孢子能力都低于親本,但其仍然有強(qiáng)的致病力和產(chǎn)孢能力;苯霜靈抗性菌株B6-4、B6-5、B6-7可以穩(wěn)定遺傳,且菌絲生長速率顯著高于親本,但其孢子囊產(chǎn)量、卵孢子產(chǎn)量以及致病力都顯著低于親本,但仍然有致病力和產(chǎn)孢能力。另外,交互抗性的結(jié)果表明,抗氟吡菌胺菌株與霜脲氰、甲霜靈、叮吡嗎啉、醚菌酯之間不存在交互抗性;抗苯霜靈菌株與氟吡菌、丁吡嗎啉、醚菌酯之間不存在交互抗性,但苯霜靈與霜脲氰存在正交互抗性。因此,大豆疫霉對(duì)氟吡菌胺和苯霜靈都具有一定的抗性風(fēng)險(xiǎn),所以生產(chǎn)上使用氟吡菌胺或是苯霜靈時(shí)應(yīng)注意與不存在交互抗性的藥劑交替使用或是混用。2、通過測(cè)定大豆疫霉抗氟吡菌胺和苯霜靈突變體以及親本菌株的生理生化性狀,結(jié)果表明,抗藥性突變體和親本菌株在含有較高濃度的葡萄糖和NaCl的培養(yǎng)基上菌絲生長受到抑制。在沒有殺菌劑處理的條件下,氟吡菌胺抗性菌株的滲透性低于親本菌株,而苯霜靈抗性菌株的滲透性則顯著高于親本菌株。隨著氟吡菌胺和苯霜靈處理時(shí)間的延長,抗藥性突變體和親本菌株的β-1,3葡聚糖酶活力均呈下降趨勢(shì)。在不同的處理時(shí)間段里發(fā)現(xiàn)苯霜靈抗性菌株的可溶性蛋白含量都顯著低于親本菌株。而氟吡菌胺抗性菌株的可溶性蛋白含量和親本沒有顯著的規(guī)律。3、采用Biolog表型芯片技術(shù),測(cè)定了大豆疫霉氟吡菌胺抗性菌株及其親本菌株對(duì)PM1和PM3微孔板的碳氮源物質(zhì)利用情況。結(jié)果表明:抗性菌株和親本菌株均能利用PM1中的95種碳源物質(zhì)和PM3中的95種氮源物質(zhì)。在PM1微孔板中抗性突變菌株F7-2對(duì)碳源物質(zhì)的利用率明顯高于親本菌株P(guān)7076。而在PM3微孔板中,F7-2對(duì)碳源物質(zhì)的利用率明顯低于親本菌株P(guān)7076。4、通過測(cè)定大豆疫霉親本菌株及抗性菌株對(duì)多種植物提取物的敏感性,結(jié)果發(fā)現(xiàn),和厚樸酚、5,5-二烯丙基-2,2’二苯基二醇、鹽酸小檗堿對(duì)大豆疫霉菌株的抑菌效果較好。綜上可為開發(fā)防治疫病有效植物源農(nóng)藥及對(duì)抗性菌株治理提供參考。
【學(xué)位單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S435.651
【部分圖文】：

圖 2-1 氟吡菌胺抗性菌株與不同殺菌劑的交互抗性Figure 2-1 Cross-resistance between fluopicolide and others fungicides2.4.2 抗苯霜靈突變體對(duì) 4 種殺菌劑的交互抗性測(cè)定大豆疫霉親本菌株和抗苯霜靈突變體對(duì)苯霜靈、霜脲氰、丁吡嗎啉、醚菌酯和氟吡菌胺的敏感性，用 SPSS 軟件分析 EC50值（圖 2-2），結(jié)果發(fā)現(xiàn)親本菌株和抗藥性突變體對(duì)苯霜靈的敏感性與其它四種殺菌劑的敏感性相關(guān)系數(shù)分別為 0.9120、0.4640、0.4890、-0.0573，F(xiàn) 檢驗(yàn)的顯著水平 P 值分別為 0.0040、0.2940、0.2660 和 0.1780。其中親本菌株和抗藥性突變體對(duì)苯霜靈的敏感性與對(duì)霜脲氰的敏感性之間的顯著性水平小于 0.05，說明在 P=0.05 水平上有顯著性差異，即苯霜靈與霜脲氰之間存在正交互抗性，大豆疫霉菌對(duì)苯霜靈產(chǎn)生抗藥性之后，對(duì)霜脲氰的敏感性也會(huì)跟著降低，而與丁吡嗎啉、醚菌酯和氟吡菌胺之間則不存在交互抗性。

圖 2-2 苯霜靈抗性菌株與不同殺菌劑的交互抗性Figure 2-2 Cross-resistance between benalaxyl and others fungicides2.5 抗藥突變體的菌絲生長速率由大豆疫霉親本菌株及抗藥性突變體菌絲生長 6 d 的情況可知，抗氟吡菌胺突變體 F6-1、F6-3、F6-4 菌絲生長速率顯著低于親本菌株 P6497，F(xiàn)7-1、F7-2、F7-4 菌絲速率生長顯著低于親本菌株 P7076，抗藥性突變體之間差異不顯著；抗苯霜靈突變體 B6-4、B6-5、B6-7 的菌絲生長速率顯著高于親本菌株 P6497，抗藥性突變體之間沒有顯著性差異，且生長至第 5 d 時(shí)抗苯霜靈突變體均長滿了整個(gè)平板(圖 2-3)。2.6 抗藥突變體的游動(dòng)孢子囊產(chǎn)量對(duì)抗藥性突變體的游動(dòng)孢子囊產(chǎn)量測(cè)定（圖 2-4），結(jié)果表明抗氟吡菌胺突變體 F6-1、F6-3、F6-4 的游動(dòng)孢子囊產(chǎn)量比親本菌株 P6497 分別減少了 37.93%、18.97%、29.31%，F(xiàn)7-1、F7-2、F7-4 的游動(dòng)孢子囊產(chǎn)量比親本菌株 P7076 分別減

第二章 大豆疫霉抗氟吡菌胺和抗苯霜靈突變體的獲得圖 2-3 大豆疫霉不同抗藥突變體菌落擴(kuò)展直徑Figure 2-3 Mycelial growth colony diameter of different resistant mutants

【參考文獻(xiàn)】

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1 陶能國;段小芳;凡鳳;黃師榮;;檸檬醛和辛醛混合物對(duì)指狀青霉的抑制作用[J];現(xiàn)代食品科技;2015年06期

2 周明;陳征義;申書婷;;肉桂醛的研究進(jìn)展[J];經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào);2015年01期

3 楊曉賀;張瑜;顧鑫;趙海紅;姚亮亮;劉偉;申宏波;丁俊杰;;大豆疫霉根腐病的綜合防治[J];大豆科學(xué);2014年04期

4 翟明濤;王開運(yùn);許輝;唐劍鋒;劉杰;;抗氟吡菌胺辣椒疫霉菌株的誘導(dǎo)及其生物學(xué)特性的研究[J];植物病理學(xué)報(bào);2014年01期

5 崔林開;李井干;陸靜;陰偉曉;王源超;;大豆疫霉菌對(duì)甲霜靈抗性風(fēng)險(xiǎn)的研究[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年01期

6 任海龍;馬啟彬;楊存義;宋恩亮;王瑞鵬;馬天翔;唐玉娟;年海;;華南地區(qū)大豆育種材料抗疫霉根腐病鑒定[J];大豆科學(xué);2012年03期

7 王京法;李健;曹建康;姜微波;;丁香油、百里酚復(fù)合殼聚糖處理對(duì)桃采后褐腐病菌的抑制作用[J];食品工業(yè)科技;2011年05期

8 代瑞平;劉海;;大豆疫霉根腐病研究進(jìn)展[J];大豆科技;2011年01期

9 趙衛(wèi)松;韓秀英;齊永志;王文橋;馬志強(qiáng);張金林;張小風(fēng);;辣椒疫霉對(duì)雙炔酰菌胺的敏感性測(cè)定及其抗藥突變體生物學(xué)性狀研究[J];農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào);2011年01期

10 余霞;楊丹玲;王俊峰;陳進(jìn)會(huì);;大豆疫霉病研究進(jìn)展[J];植物檢疫;2009年05期

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1 蔡萌;畢揚(yáng);劉西莉;;大豆疫霉對(duì)苯酰菌胺的敏感基線及其抗性機(jī)制初探[A];中國植物病理學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

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1 侯軍;番茄灰霉病菌對(duì)丙烷脒的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

2 夏曉明;禾谷絲核菌（Rhizoctonia Cerealis）對(duì)戊唑醇的抗性機(jī)制研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

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1 蓋迪;大豆疫病防治藥劑的篩選與復(fù)配研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 王秋月;辣椒疫霉對(duì)氟吡菌胺的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)研究[D];西南大學(xué);2016年

3 國莉玲;大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）抗甲霜靈菌株生物學(xué)特性及AFLP分析[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2014年

4 曹舜;大豆疫霉對(duì)甲霜靈抗性監(jiān)測(cè)及有效藥劑篩選[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 趙衛(wèi)松;辣椒疫霉對(duì)雙炔酰菌胺抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及抗藥性生理生化機(jī)制研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 馬建英;灰霉病菌對(duì)啶菌VA唑的敏感性及抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

7 董立明;大豆疫霉菌毒力及遺傳多樣性分析[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 王化波;中國大豆疫霉菌遺傳多樣性和大豆種質(zhì)抗病性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2001年

本文編號(hào)：2825486