發(fā)布時(shí)間：2020-08-25 02:49

【摘要】：我國桑樹種質(zhì)資源豐富,隨著不斷地收集和保存,在各地區(qū)建立了種質(zhì)資源圃。資源圃提供豐富的育種材料,為了更好的開發(fā)利用種質(zhì)資源,桑樹種質(zhì)資源的測(cè)定評(píng)價(jià)是必不可少的環(huán)節(jié)。本文對(duì)廣西桑樹種質(zhì)資源進(jìn)行倍性測(cè)定,明確所保存的種質(zhì)資源的倍性情況。同時(shí)利用化學(xué)方法對(duì)桑種子和桑幼苗進(jìn)行倍性誘導(dǎo),從中選育多倍體植株,對(duì)誘導(dǎo)后桑幼苗生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀察,初步了解桑幼苗倍性誘導(dǎo)的規(guī)律,為桑樹多倍體育種提供一定的理論依據(jù)。本文主要利用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定桑樹倍性。在研究中選擇桑樹的不同葉位、同一張幼葉的不同部分、脫苞期的葉芽、種子發(fā)芽后的胚根進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),發(fā)現(xiàn)不同取材部位影響流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)倍性效果:幼葉第1葉位葉第2葉位葉;幼葉葉基幼葉葉尾,葉芽是理想的倍性檢測(cè)材料,但葉芽采樣不易。根據(jù)綜合因素考慮,確定選擇幼葉作為桑樹倍性檢測(cè)材料。主要的研究結(jié)果如下:在檢測(cè)的527份桑樹種質(zhì)資源中,測(cè)定出二倍體268份,三倍體154份,四倍體88份,混倍體17份。17份混倍體中混有二倍體細(xì)胞和三倍體細(xì)胞的有9份,混有二倍體細(xì)胞和四倍體細(xì)胞的有8份。在已測(cè)定的桑樹種質(zhì)資源中分別選取二倍體、三倍體、四倍體桑樹各5株,在不同時(shí)間段分別進(jìn)行葉綠素SPAD(Soil and Plant Analyzer Development,SPAD)值、可溶性糖含量、總蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:葉綠素SPAD值和總蛋白質(zhì)濃度與月份呈現(xiàn)的規(guī)律為8月下旬9月下旬10月下旬11月下旬,可溶性糖含量呈現(xiàn)的基本趨勢(shì)為9月下旬≈10月下旬≤11月下旬8月下旬。檢測(cè)兩組不同的二倍體桑樹與四倍體桑樹雜交后代F1植株的倍性情況,每個(gè)雜交組合檢測(cè)100株。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:桑樹雜交組合A的F1植株中三倍體占96%,二倍體占4%,桑樹雜交組合B的F1植株中三倍體占82%,二倍體占18%。利用種子浸泡法和幼苗滴藥法對(duì)桂桑優(yōu)62(二倍體)、桂桑6號(hào)(三倍體)進(jìn)行誘導(dǎo)處理,誘導(dǎo)后的植株經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行倍性測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:經(jīng)種子浸泡法誘導(dǎo)的桂桑優(yōu)62的誘變率為3.3%,桂桑6號(hào)的誘變率為2.7%。經(jīng)幼苗滴藥法進(jìn)行誘導(dǎo)的桂桑優(yōu)62的誘變率為11.3%,桂桑6號(hào)的誘變率為8.2%。實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)種子浸泡法誘導(dǎo)后的幼苗的生長(zhǎng)情況以及幼苗解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)幼苗在前期生長(zhǎng)過程中呈現(xiàn)兩種不同狀態(tài),一種為下胚軸先不伸出地面就開始進(jìn)行植株生長(zhǎng),另一種為胚軸先伸出地面后再進(jìn)行植株生長(zhǎng)。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S888.3
【圖文】：

２．２．１對(duì)照品２邋Ｘ１０９早上８：００—９：００采樣沙２ｘ倫１０９，將采回的新鮮頂芽完全浸沒在固定一一解離液逡逑中３－５ｍｉｎ，當(dāng)材料開始變成黃褐色時(shí)迅速與固定一一解離液脫離，用清水漂洗３次，第逡逑３次在清水中放置１０－１５邋ｍｉｎ進(jìn)行低滲處理。夾取少許低滲后的材料置于干凈濾紙上吸逡逑去多余的水分，然后至于載玻片上，滴加改良苯酚品紅染液染色１－２邋ｍｉｎ，蓋上蓋玻片，逡逑排出氣泡，將載玻片置于平整桌面上用尖端帶橡膠的木棒垂直均勻地敲擊蓋玻片，制片逡逑完成后用１００倍普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察，拍照，記錄。逡逑２．２．２不同取材部位的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)效果的比較逡逑（１）材料的選擇逡逑取材時(shí)間為２０１７年冬季１２月中旬至２０１８年１月上旬，取材主要分為４部分，第逡逑一部分為不同葉位的選擇，即尚未完全展開的幼葉、第１葉位，第２葉位；第二部分為逡逑同一幼葉的不同部位，分為葉基和葉尾；第三部分為脫苞期的葉芽，第四部分為種子發(fā)逡逑芽后的胚根，具體形態(tài)示意圖如圖２－１所示。逡逑

在９６孔板中依次加入０、１、２、４、８、１２、１６、２０邋ｐＬ的２邋ｍｇ／ｍＬ邋ＢＳＡ標(biāo)準(zhǔn)液，逡逑力口１卟８５補(bǔ)足至２０＃，再加入２００吣８０八工作液，６０°０放置３0１＾１１，將９６孔板置于逡逑５６２邋ｕｒｎ波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖２－３所示。逡逑３．５逡逑３邐ｙ＝邋１．４９６６１Ｘ邋＋０．２６３９０４逡逑Ｒ２邋＝邋０．９９２逡逑２．５逡逑§邋２逡逑０邋？逡逑０邐０．５邐１邐１．５邐２邐２．５逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖２－３蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑１５逡逑

邐０．２５逡逑糖含量（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖２－２可溶性糖標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｓｏｌｕｂｌｅ邋ｓｕｇａｒ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑２．２．５蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制逡逑在９６孔板中依次加入０、１、２、４、８、１２、１６、２０邋ｐＬ的２邋ｍｇ／ｍＬ邋ＢＳＡ標(biāo)準(zhǔn)液，逡逑力口１卟８５補(bǔ)足至２０＃，再加入２００吣８０八工作液，６０°０放置３0１＾１１，將９６孔板置于逡逑５６２邋ｕｒｎ波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖２－３所示。逡逑３．５逡逑３邐ｙ＝邋１．４９６６１Ｘ邋＋０．２６３９０４逡逑Ｒ２邋＝邋０．９９２逡逑２．５逡逑§邋２逡逑０邋？逡逑０邐０．５邐１邐１．５邐２邐２．５逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖２－３蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑１５逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2803162