【摘要】：我國桑樹種質(zhì)資源豐富,隨著不斷地收集和保存,在各地區(qū)建立了種質(zhì)資源圃。資源圃提供豐富的育種材料,為了更好的開發(fā)利用種質(zhì)資源,桑樹種質(zhì)資源的測定評價是必不可少的環(huán)節(jié)。本文對廣西桑樹種質(zhì)資源進行倍性測定,明確所保存的種質(zhì)資源的倍性情況。同時利用化學(xué)方法對桑種子和桑幼苗進行倍性誘導(dǎo),從中選育多倍體植株,對誘導(dǎo)后桑幼苗生長情況進行觀察,初步了解桑幼苗倍性誘導(dǎo)的規(guī)律,為桑樹多倍體育種提供一定的理論依據(jù)。本文主要利用流式細胞術(shù)測定桑樹倍性。在研究中選擇桑樹的不同葉位、同一張幼葉的不同部分、脫苞期的葉芽、種子發(fā)芽后的胚根進行流式細胞術(shù)檢測,發(fā)現(xiàn)不同取材部位影響流式細胞術(shù)檢測效果。實驗結(jié)果表明流式細胞術(shù)檢測倍性效果:幼葉第1葉位葉第2葉位葉;幼葉葉基幼葉葉尾,葉芽是理想的倍性檢測材料,但葉芽采樣不易。根據(jù)綜合因素考慮,確定選擇幼葉作為桑樹倍性檢測材料。主要的研究結(jié)果如下:在檢測的527份桑樹種質(zhì)資源中,測定出二倍體268份,三倍體154份,四倍體88份,混倍體17份。17份混倍體中混有二倍體細胞和三倍體細胞的有9份,混有二倍體細胞和四倍體細胞的有8份。在已測定的桑樹種質(zhì)資源中分別選取二倍體、三倍體、四倍體桑樹各5株,在不同時間段分別進行葉綠素SPAD(Soil and Plant Analyzer Development,SPAD)值、可溶性糖含量、總蛋白質(zhì)濃度的測定。實驗結(jié)果表明:葉綠素SPAD值和總蛋白質(zhì)濃度與月份呈現(xiàn)的規(guī)律為8月下旬9月下旬10月下旬11月下旬,可溶性糖含量呈現(xiàn)的基本趨勢為9月下旬≈10月下旬≤11月下旬8月下旬。檢測兩組不同的二倍體桑樹與四倍體桑樹雜交后代F1植株的倍性情況,每個雜交組合檢測100株。實驗結(jié)果顯示:桑樹雜交組合A的F1植株中三倍體占96%,二倍體占4%,桑樹雜交組合B的F1植株中三倍體占82%,二倍體占18%。利用種子浸泡法和幼苗滴藥法對桂桑優(yōu)62(二倍體)、桂桑6號(三倍體)進行誘導(dǎo)處理,誘導(dǎo)后的植株經(jīng)流式細胞術(shù)進行倍性測定。實驗結(jié)果顯示:經(jīng)種子浸泡法誘導(dǎo)的桂桑優(yōu)62的誘變率為3.3%,桂桑6號的誘變率為2.7%。經(jīng)幼苗滴藥法進行誘導(dǎo)的桂桑優(yōu)62的誘變率為11.3%,桂桑6號的誘變率為8.2%。實驗過程中對種子浸泡法誘導(dǎo)后的幼苗的生長情況以及幼苗解剖結(jié)構(gòu)進行觀察,發(fā)現(xiàn)幼苗在前期生長過程中呈現(xiàn)兩種不同狀態(tài),一種為下胚軸先不伸出地面就開始進行植株生長,另一種為胚軸先伸出地面后再進行植株生長。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S888.3
【圖文】：

２．２．１對照品２邋Ｘ１０９早上８：００—９：００采樣沙２ｘ倫１０９，將采回的新鮮頂芽完全浸沒在固定一一解離液逡逑中３－５ｍｉｎ，當(dāng)材料開始變成黃褐色時迅速與固定一一解離液脫離，用清水漂洗３次，第逡逑３次在清水中放置１０－１５邋ｍｉｎ進行低滲處理。夾取少許低滲后的材料置于干凈濾紙上吸逡逑去多余的水分，然后至于載玻片上，滴加改良苯酚品紅染液染色１－２邋ｍｉｎ，蓋上蓋玻片，逡逑排出氣泡，將載玻片置于平整桌面上用尖端帶橡膠的木棒垂直均勻地敲擊蓋玻片，制片逡逑完成后用１００倍普通光學(xué)顯微鏡進行觀察，拍照，記錄。逡逑２．２．２不同取材部位的流式細胞術(shù)檢測效果的比較逡逑（１）材料的選擇逡逑取材時間為２０１７年冬季１２月中旬至２０１８年１月上旬，取材主要分為４部分，第逡逑一部分為不同葉位的選擇，即尚未完全展開的幼葉、第１葉位，第２葉位；第二部分為逡逑同一幼葉的不同部位，分為葉基和葉尾；第三部分為脫苞期的葉芽，第四部分為種子發(fā)逡逑芽后的胚根，具體形態(tài)示意圖如圖２－１所示。逡逑

在９６孔板中依次加入０、１、２、４、８、１２、１６、２０邋ｐＬ的２邋ｍｇ／ｍＬ邋ＢＳＡ標(biāo)準(zhǔn)液，逡逑力口１卟８５補足至２０＃，再加入２００吣８０八工作液，６０°０放置３0１＾１１，將９６孔板置于逡逑５６２邋ｕｒｎ波長下檢測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖２－３所示。逡逑３．５逡逑３邐ｙ＝邋１．４９６６１Ｘ邋＋０．２６３９０４逡逑Ｒ２邋＝邋０．９９２逡逑２．５逡逑§邋２逡逑０邋？逡逑０邐０．５邐１邐１．５邐２邐２．５逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖２－３蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑１５逡逑

邐０．２５逡逑糖含量（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖２－２可溶性糖標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｓｏｌｕｂｌｅ邋ｓｕｇａｒ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑２．２．５蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制逡逑在９６孔板中依次加入０、１、２、４、８、１２、１６、２０邋ｐＬ的２邋ｍｇ／ｍＬ邋ＢＳＡ標(biāo)準(zhǔn)液，逡逑力口１卟８５補足至２０＃，再加入２００吣８０八工作液，６０°０放置３0１＾１１，將９６孔板置于逡逑５６２邋ｕｒｎ波長下檢測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖２－３所示。逡逑３．５逡逑３邐ｙ＝邋１．４９６６１Ｘ邋＋０．２６３９０４逡逑Ｒ２邋＝邋０．９９２逡逑２．５逡逑§邋２逡逑０邋？逡逑０邐０．５邐１邐１．５邐２邐２．５逡逑濃度（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖２－３蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑１５逡逑

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邱長玉;朱方容;林強;朱光書;曾燕蓉;崔秋英;張朝華;;桑樹葉片SPAD值及其與養(yǎng)蠶成績的相關(guān)性[J];南方農(nóng)業(yè)學(xué)報;2015年12期

2 王振江;羅國慶;戴凡煒;肖更生;唐翠明;;91份廣東桑四倍體種質(zhì)資源的農(nóng)藝性狀遺傳多樣性分析[J];蠶業(yè)科學(xué);2015年06期

3 吳青青;賴彪;朱文超;鐘沛霖;;流式細胞術(shù)檢測草莓倍性的方法優(yōu)化[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2015年20期

4 杜賢明;鄧真華;彭曉虹;葉武光;匡英秋;;江西省桑種質(zhì)資源栽培保存與研究現(xiàn)狀[J];蠶桑茶葉通訊;2015年02期

5 張正國;陳祥平;范小敏;楊今后;馮永德;柯皓天;呂銀;;桑樹四倍體品種團桑11號的選育[J];蠶業(yè)科學(xué);2015年01期

6 暢晉鋼;;山西省桑樹種質(zhì)資源分布及其性狀[J];中國蠶業(yè);2015年01期

7 趙黎明;解保勝;那永光;顧春梅;李明;鄭殿峰;;簡述SPAD-502在水稻及其它作物上應(yīng)用的研究進展[J];北方水稻;2015年01期

8 張麗珍;楊冬業(yè);劉杰;曾惠玲;;超富集植物商陸多倍體誘導(dǎo)研究[J];北方園藝;2014年16期

9 洪陳潔;林晗;吳承禎;;植物多倍體特征與誘導(dǎo)及其應(yīng)用[J];武夷學(xué)院學(xué)報;2014年02期

10 韓莎;李四軍;許曉東;蘇超;焦鋒;;利用流式細胞儀快速鑒定桑樹細胞的染色體倍數(shù)性[J];蠶業(yè)科學(xué);2013年06期

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1 王照紅;梁明芝;杜建勛;陳傳杰;趙東曉;孫日彥;;山東桑樹種質(zhì)資源收集、鑒定及創(chuàng)新利用研究[A];第十屆家（柞）蠶遺傳育種及良種繁育學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

2 林強;朱方容;邱長玉;陳小青;朱光書;李乙;;廣西桑樹四倍體種質(zhì)資源的研究進展[A];中南五省區(qū)蠶桑育種協(xié)作研討會論文集[C];2009年

3 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所課題組;;新桑品種川826育成[A];全國桑樹種質(zhì)資源及育種和蠶桑綜合利用學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

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1 王茜齡;桑樹多倍體育種材料誘變創(chuàng)制及優(yōu)系選育研究[D];西南大學(xué);2009年

2 張敏;柑橘果實扇形嵌合體的分離及兩組嫁接嵌合體的遺傳研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

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1 喬璐;桑葉蛋白的提取與應(yīng)用研究[D];浙江師范大學(xué);2014年

2 李為;不同倍性薄皮甜瓜的生物學(xué)特性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

3 吳林;體細胞化學(xué)誘導(dǎo)金銀花四倍體及抗鹽突變體研究[D];西南大學(xué);2012年

4 王俊敏;水稻空間誘變機理及其在新品種選育中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2012年

5 宋尚文;鹽脅迫下6個桑樹品種反應(yīng)特性研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 孫馬;中國野生葡萄染色體倍性的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

7 梁明芝;桑樹人工誘導(dǎo)混倍體品種‘魯誘1號’選育[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

8 徐立;人工三倍體桑樹新品種遺傳背景的AFLP分析[D];西南農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

本文編號：2803162