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破壞素的分離提取及其與農(nóng)藥混配對蘋果黃蚜的毒力

發(fā)布時間:2020-08-14 23:09
【摘要】:山西是蘋果生產(chǎn)大省,每年蘋果黃蚜的為害給我省造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。當(dāng)前防治蘋果黃蚜的方法主要還是化學(xué)農(nóng)藥,但是由于化學(xué)農(nóng)藥的不合理使用,導(dǎo)致蘋果黃蚜對許多農(nóng)藥產(chǎn)生了抗性,農(nóng)藥殘留超標(biāo),果品品質(zhì)也逐年降低,對環(huán)境也造成了污染,因此尋找一種環(huán)境友好型藥劑已經(jīng)迫在眉睫。破壞素(Destruxins)是由蟲生真菌綠僵菌分泌,是一種對昆蟲類具有廣譜的殺蟲特性的生物毒素。具有高效低毒,對環(huán)境無污染,不易產(chǎn)生抗性等特點。但其成本較高,很難大面積推廣使用。本文通過研究破壞素的分離提取并篩選破壞素與常規(guī)化學(xué)農(nóng)藥的最佳復(fù)配比例,實現(xiàn)化學(xué)農(nóng)藥的減量化使用。本文就破壞素和常規(guī)化學(xué)農(nóng)藥以及其混配藥劑對蘋果黃蚜的毒力進(jìn)行了測定,并開發(fā)了復(fù)配制劑,主要研究結(jié)果如下:1、首先從蠐螬(金龜子幼蟲)中分離出綠僵菌菌株,并對該菌株進(jìn)行純化。通過發(fā)酵培養(yǎng),采取有機(jī)液相萃取毒素,再利用半制備高效液相色譜分離毒素。經(jīng)分析發(fā)酵液中含有四種毒素混合物(破壞素A、B、D、E),色譜分離得到穩(wěn)定性較高的破壞素A,其純度為91%,破壞素A的產(chǎn)量為0.07 g/L發(fā)酵液。2、采用浸葉法測定破壞素與農(nóng)藥對蘋果黃蚜的毒力。結(jié)果表明破壞素、高效氯氰菊酯、阿維菌素、吡蟲啉、啶蟲脒和烯啶蟲胺的致死中濃度(LC_(50))分別為0.016 mg/L、0.221 mg/L、0.221 mg/L、2.242 mg/L、8.247 mg/L和9.793 mg/L,表明破壞素對蘋果黃蚜具有較高的毒性。3、將破壞素與防治蘋果黃蚜的常規(guī)農(nóng)藥進(jìn)行混配,測定混配藥劑對蘋果黃蚜的毒力。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在五種混配方式中,破壞素與阿維菌素混配對蘋果黃蚜的毒力最好,兩者混配后的LC_(50)為0.148 mg/L。當(dāng)破壞素和阿維菌素以9:1的比例混配時,共毒系數(shù)為176.36,毒力效果最佳。根據(jù)實驗結(jié)果,結(jié)合經(jīng)濟(jì)成本等問題,選擇兩者以4:6的比例進(jìn)行混配并且研發(fā)了幾種混配制劑。隨著害蟲抗性等問題的產(chǎn)生,農(nóng)藥混配的應(yīng)用越來越廣泛。為了能夠更加有效地防治蘋果黃蚜,降低農(nóng)藥殘留,解決害蟲的抗藥性問題,本研究中首次利用破壞素與農(nóng)藥混配防治蘋果黃蚜,研究結(jié)果對于降低農(nóng)藥殘留,提高果蔬品質(zhì),保護(hù)生態(tài)壞境具有重要的意義,對于無公害或綠色食品的生產(chǎn)具有重要意義;實現(xiàn)果樹農(nóng)藥的減量化使用,全面積極地響應(yīng)國家十三五“藥肥雙減”的號召,同時對于提高我省果品市場競爭力,推動地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展起重要的作用。為害蟲綠色防控提供基礎(chǔ),為我國農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展保駕護(hù)航。
【學(xué)位授予單位】:山西大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:TQ450.2
【圖文】:

綠僵菌,菌落直徑


破壞素的分離提取及其與農(nóng)藥混配對蘋果黃蚜的毒力特性檢測破壞素的提取量吸取 1 mL 濃縮得到的混合物,用 0.25 μm 的微量濾膜過濾得到過濾液放入品的小瓶子備用;然后可以利用 HPLC 對樣品進(jìn)行分析。結(jié)果與分析 菌株的分離與純化綠僵菌的培養(yǎng)最適條件為 26 ℃,本研究中,從染菌金龜子上分離純化的綠菌株隨時間的生長狀態(tài)如圖 2.1 所示。生長一周時,菌落直徑大小為 0.5 mm數(shù)是以白色絮狀為主;兩周后菌落直徑大小約 1.0 mm,會產(chǎn)生孢子,顏色色或深綠色;到第三周,綠僵菌會長滿整個平板。A BC

流程圖,提取純化,流程圖


圖 2.2 破壞素的提取純化流程圖Figure 2.2 Destruxins of the extraction and purification process圖 2.3 HPLC 分析結(jié)果Figure 2.3 HPLC analysis results

分析結(jié)果圖,綠僵菌,半制備,真空濃縮


圖 2.2 破壞素的提取純化流程圖Figure 2.2 Destruxins of the extraction and purification proces綠僵菌的分離優(yōu)化 綠僵菌的培養(yǎng) 發(fā)半制備分離真空濃縮萃

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2793663

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