【摘要】：云南省常年氣候溫和,享有“桑蠶養(yǎng)殖天堂”之譽,但隨著季節(jié)的變化,桑葉質(zhì)量銳減:秋蠶期,桑里白粉病發(fā)病率達(dá)50%以上,晚秋蠶期更是高達(dá)100%。桑葉質(zhì)量降低,導(dǎo)致蠶存活率由80% 90%下降到50%,甚至更低,蠶繭量下降,改善蠶營養(yǎng)不良的狀況迫在眉睫。在前期的實驗中,進(jìn)行了FANa添食病桑葉飼養(yǎng)家蠶試驗,FANa對病蠶體中9種細(xì)菌的抑菌試驗、黃腐酸鈉(FANa)對于家蠶的抗饑餓耐高溫存活試驗,在此基礎(chǔ)上,推測褐煤黃腐酸鈉可能會有改善桑蠶因桑葉質(zhì)量差而導(dǎo)致的營養(yǎng)不良,提高產(chǎn)繭量的作用。本論文需要進(jìn)一步確證其效果,并研究其機制。為確認(rèn)以上結(jié)果,并研究其作用機制,本文首先分析了云南省曲靖市陸良縣舟東村6-7月和10-11月(白粉病桑葉)兩個批次的桑葉加上家蠶飼料,總計三個樣本,分別測量桑葉的水分、蛋白質(zhì)、多糖和脂肪含量,來分析找到在夏蠶和晚秋不同時期桑葉的營養(yǎng)含量變化。結(jié)果表明水分含量和蛋白質(zhì)含量沒有明顯的區(qū)別,在脂肪和多糖含量對比中,6月份桑葉質(zhì)量比11月份桑葉分別提高28.2%和82.6%,為后續(xù)的實驗打下了個堅定的基礎(chǔ),為減桑實驗?zāi)Ｐ吞峁┝思夹g(shù)支撐。緊接著我們建立了桑蠶營養(yǎng)不良模型,對黃腐酸鈉是否增強家蠶營養(yǎng)吸收進(jìn)行研究,結(jié)果表明添食FANa與模型組對比降低了死亡率,并且在減桑模型中添食FANa可以顯著提高家蠶萬頭產(chǎn)繭量2-3kg(*P0.05),死亡率與對照組相比降低了2.5%-5%。初步說明云南褐煤黃腐酸鈉可以通過調(diào)節(jié)家蠶基礎(chǔ)新陳代謝,增強抗?fàn)I養(yǎng)不良能力。從家蠶的整體表觀來看,可以確證黃腐酸鈉可以改善家蠶營養(yǎng)不良狀況。我們進(jìn)一步采用代謝組學(xué)思路和技術(shù),利用GC-MS技術(shù)對黃腐酸鈉改善家蠶營養(yǎng)不良作用進(jìn)行研究,通過構(gòu)建“標(biāo)志物小分子-生物效應(yīng)”的相關(guān)關(guān)系,研究黃腐酸鈉對家蠶體內(nèi)代謝組學(xué)影響,找到關(guān)鍵代謝通路,揭示黃腐酸對蠶營養(yǎng)不良改善作用的藥理機制。分析正常組(a組)、FANa組(b組)、減桑20%+FANa組(c組)和減桑20%組(d組)的蠶血淋巴的差異代謝物,尋找可能的分子機制,采用GC-MS檢測,XCMS-online對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,利用SIMPCA.14對數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA和OPLS-DA分析,對a、b、c、d四組實現(xiàn)了完全分組,且四組具有顯著性差異(P0.05),說明減�？梢杂绊懠倚Q的基礎(chǔ)代謝,黃腐酸鈉改善了家蠶的營養(yǎng)代謝通路,采用S-plot挑選,VIP1的代謝物,得到了a、b、c、d四組之間差異明顯的59個代謝物,在NIST14數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行對比鑒定得到了14個化合物,分別為:Methyltris(trimethylsiloxy)silane,Dodecamethyl pentasiloxane,Decamethyl cyclopentasiloxane,Octamethyl trisiloxane,Tetradecamethyl hexasiloxane,Dodecamethyl cyclohexasiloxane,Octamethyl cyclotetrasiloxane,3-Acetoxy-3-hydroxypropionic acid,1-(3,6,6-Trimethyl-1,6,7,7a-tetrah ydrocyclopenta[c]pyran-1-yl)ethenone Methyl 20-methyl-heneicosanoate Octadecanoic acid,11-methyl-hyl ester,Dodecamethyl pentasiloxane,9,12-Octadecadienoic acid(Z,Z)-,methyl ester,Tetradecamethyl cycloheptasiloxane和Decamethyl tetrasiloxane通過MBRole網(wǎng)站進(jìn)行KEGG代謝通路分析,最終得到了Biosynthesis of type II polyketide products(II型聚酮化合物的生物合成)、Lysine biosynthesis(賴氨酸生物合成)和Limonene and pinene degradation(檸檬烯和松烯降解)三個代謝通路。這些通路對家蠶吐絲和生長密切相關(guān),通路的調(diào)控與減桑實驗減少營養(yǎng)成分與病桑葉脂質(zhì)、多糖含量減少的結(jié)果一致。綜上所述,黃腐酸鈉對家蠶營養(yǎng)不良有明顯的改善作用,其調(diào)控的機制可能為通過調(diào)節(jié)II型聚酮化合物的生物合成、賴氨酸生物合成和檸檬烯和松烯降解通路,影響絲蛋白的合成,減少因病桑葉多糖、脂質(zhì)含量減少而帶來的不良影響。除此之外,本論文還對不同產(chǎn)地的黃腐酸鈉進(jìn)行了促血管新生及促進(jìn)小麥種子萌發(fā)的研究來對其生物質(zhì)量進(jìn)行了初步評價。
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S884
【圖文】：

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文24圖2.1.1不同產(chǎn)地黃腐酸鈉影響血管增生面積比較Figure2.1.1Comparisonoftheeffectsofsodiumfulvateontheareaofvascularproliferationindifferenthabitats圖2.1.2不同產(chǎn)地黃腐酸鈉積分光密度（IOD）比較Figure2.1.2Comparisonofintegratedopticaldensity(IOD)ofsodiumfulvatefromdifferentregions積分光密度是表示整個視野內(nèi)所有選定對象的反應(yīng)強度的總和。積分光密度的值高,表示總的性反應(yīng)強度大，也是我們檢驗黃腐酸鈉對于血管增生作用的一個重要指標(biāo)。通過IPP軟件處理計算IOD值，空白對照組的IOD值是615704，對比峨山的IOD值1140565和太原的IOD值2435920，可以表明，黃腐酸鈉組的IOD值要高于空白對照組，其中太原、雙龍和石坪三個產(chǎn)地有顯著性差異（*表示

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文24圖2.1.1不同產(chǎn)地黃腐酸鈉影響血管增生面積比較Figure2.1.1Comparisonoftheeffectsofsodiumfulvateontheareaofvascularproliferationindifferenthabitats圖2.1.2不同產(chǎn)地黃腐酸鈉積分光密度（IOD）比較Figure2.1.2Comparisonofintegratedopticaldensity(IOD)ofsodiumfulvatefromdifferentregions積分光密度是表示整個視野內(nèi)所有選定對象的反應(yīng)強度的總和。積分光密度的值高,表示總的性反應(yīng)強度大，也是我們檢驗黃腐酸鈉對于血管增生作用的一個重要指標(biāo)。通過IPP軟件處理計算IOD值，空白對照組的IOD值是615704，對比峨山的IOD值1140565和太原的IOD值2435920，可以表明，黃腐酸鈉組的IOD值要高于空白對照組，其中太原、雙龍和石坪三個產(chǎn)地有顯著性差異（*表示

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文28圖2.2.1不同產(chǎn)地發(fā)芽個數(shù)比較Figure2.2.1Comparisonofgerminationnumbersindifferentproducingareas觀察不同產(chǎn)地黃腐酸鈉對發(fā)芽率的影響（Fig2.2.2），空白組和13個產(chǎn)地的實驗組沒有明顯的差別，空白組的平均發(fā)芽率是88.9，與實驗組幾乎無異，結(jié)合Fig2.2.1和2.2.2，可以說明，黃腐酸鈉對于發(fā)芽率和發(fā)芽數(shù)沒有明顯的差別，作用不顯著。側(cè)面反應(yīng)了選的供試小麥種子是合格的。圖2.2.2不同產(chǎn)地發(fā)芽率比較Fig2.2.2Comparisonofgerminationratesindifferentproducingareas從Fig2.2.3可以得出，在不同產(chǎn)地黃腐酸鈉對于苗長得到影響上，與空白對照組相比，黃腐酸鈉提高了苗的長度，空白對照組苗的平均長度是8.45cm，寶清和文山兩地的平均苗長分別是10.39cm和10.18cm，分別顯著的增加了23%和20.5%（*P＜0.05），其余11個產(chǎn)地的黃腐酸鈉也都不同程度的提高了苗的長度，但是不同產(chǎn)地之間對于苗長的作用沒有明顯的區(qū)別。

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7 主講人 張\

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