【摘要】：棉花枯萎病和黃萎病是棉花生產(chǎn)中兩種主要病害,其病原分別為尖孢鐮刀菌萎焉專化型(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum(Atk.)Snyder et Hansen)和大麗輪枝菌(Verticillium dahliae Kleb)及黑白輪枝菌(Verticillium albo-atrum ReinkeBerth)。生物防治具有綠色環(huán)保、控制效果穩(wěn)定、持效期長等優(yōu)點,在作物綜合防治過程中具有重要作用。為得到對棉花枯、黃萎病具有明顯拮抗作用的生防菌株。本研究從省內(nèi)主要棉花產(chǎn)區(qū)采集棉花的根際土,篩選、鑒定對棉花枯、黃萎病具有生防作用的菌株,初步探索其抑菌機理,具體研究結(jié)果如下。1.從山東東營、聊城、濟寧、德州、濟南等地采集土樣47份,將病原菌與生防菌在平板內(nèi)進行對峙,篩選出6株抗性較好的菌株。選擇其中一株對棉花枯萎病和黃萎病均具有最佳抑制作用的菌株(JNJX-2),進行生理生化測定和分子生物學鑒定,最后將其定為多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)。明確了菌株JNJX-2的生長曲線,以及最適生長溫度。胞外蛋白酶的鑒定顯示,其可以產(chǎn)生幾丁質(zhì)水解酶、蛋白水解酶、果膠水解酶、纖維素水解酶。2.采取4種不同的接種方法,其中菌液灌根法的致病效果最佳。室內(nèi)的盆栽防效試驗證明,生防菌JNJX-2的菌懸液對棉花的枯黃萎病具有較好的防治效果。3.測定JNJX-2的抑菌譜,結(jié)果表明其對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、離蠕孢菌(Bipolaris sorokiniana)均有較好的抑菌效果。4.通過硫酸銨沉淀以及萃取旋蒸的方式提取JNJX-2的抑菌物質(zhì),測試發(fā)現(xiàn)粗提物的性質(zhì)穩(wěn)定,對溫度、紫外線、蛋白酶不敏感。5.對枯黃萎病菌及JNJX-2處理下的棉花幼苗體內(nèi)保護性酶活的測定結(jié)果顯示,菌株JNJX-2的使用,可以提高多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、過氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性。菌株JNJX-2的菌懸液還具有一定的促生作用。
【學位授予單位】：山東師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S435.62;S476.1
【圖文】：

山東師范大學碩士學位論文這類抗生素大小一般在 1 kD～2 kD 左右，形態(tài)多種多樣，結(jié)構(gòu)復雜多變，常見的有狀、線裝，以及線環(huán)狀。多粘菌素（polymyxins）的結(jié)構(gòu)如圖 1-1 所示。從結(jié)構(gòu)對其劃分多粘菌素可以分成 8 種，都含有兩個基團，以及一個由多肽構(gòu)成的尾端。革蘭氏陰性細的細胞壁對多粘菌素十分敏感，使細胞膜的選擇透過性消失，細胞會因為內(nèi)容物的流失死亡[49]。由于其毒副作用很小，現(xiàn)在被廣泛添加到牲畜的飼料中，用于家禽的病害預防治療[50]。多粘菌素不僅對常見植物病原真菌有效，而且對一些病原細菌也能產(chǎn)生很好的防效果。多粘菌素對熱具有良好的穩(wěn)定性，對酸、有機溶劑以及金屬螯合劑均不敏感，對堿敏感。

JNJX-1 JNJX-2 JNJX-3圖 2-1 生防菌對尖孢鐮刀菌的抑制作用Fig 2-1 Inhibitory effect of biocontrol bacteria on F. oxysporum表 2-4 生防菌對峙尖孢鐮刀菌的抑菌圈半徑與菌落半徑比ble 2-4 The ratio between the inhibition zone produced by Biocontrol bacteria faced with F. oxysporum the radius of Biocontrol bacteria菌株 Strain 抑菌圈半徑 R(cm） 菌落半徑 r(cm) R/rDYGR-1 1.51±0.08 0.22±0.21 6.86DZLL-1 2.34±0.23 0.54±0.25 4.33DZLL-2 1.05±0.31 0.68±0.10 1.54JNJX-1 1.37±0.17 0.27±0.34 5.07JNJX-2 1.59±0.05 0.19±0.17 8.37

JNJX-1 JNJX-2 JNJX-3圖 2-2 生防菌對于大麗輪枝菌的抑制作用Fig 2-2 Inhibitory effect of biocontrol bacteria on V. dahliensis Kleb表 2-5 生防菌對峙大麗輪枝菌的抑菌圈半徑與菌落半徑比le 2-5 The ratio between the inhibition zone produced by Biocontrol bacteria faced with V.dahliensis Kand the radius of Biocontrol bacteria菌株 Strain 抑菌圈半徑 R(cm） 菌落半徑 r(cm) R/rDYGR-1 2.33±0.18 0.36±0.11 6.47DZLL-1 2.54±0.13 0.20±0.10 12.70DZLL-2 1.57±0.01 0.24±0.07 6.54JNJX-1 2.58±0.23 0.31±0.20 8.32JNJX-2 2.85±0.31 0.20±0.12 14.25

【參考文獻】

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本文編號：2784347