【摘要】：根腫病,多表現(xiàn)于十字花科植物根部,是由蕓薹根腫菌(Plasmodiophora brassicae Woronin)引起的世界性土傳病害。目前已蔓延到我國油菜生產(chǎn)的多個主產(chǎn)區(qū),成為影響我國油菜產(chǎn)量與質(zhì)量的主要病害之一。選育和利用抗病品種是目前公認的最為安全有效的方法。但由于甘藍型油菜抗性資源匱乏,因此挖掘抗病資源,拓寬油菜抗性遺傳基礎(chǔ)對于保障我國油菜生產(chǎn)的安全具有重要意義。種間雜交是拓寬十字花科作物遺傳基礎(chǔ)的重要手段。目前,國內(nèi)外在蘿卜與甘藍型油菜直接有性雜交的研究報道并不多,以抗根腫病的蘿卜作為父本,得到雜交后代的報道相對更少。本研究篩選出9種抗枝江菌株的蘿卜(Raphanus sativus L.,2n=18,RR)品種,以其作為父本與感病的甘藍型油菜“411”(Brassica napus L.,2n=38,AACC)雜交來轉(zhuǎn)移根腫病抗性。主要研究結(jié)果如下:1、鑒定了20份蘿卜品種對國內(nèi)9個地區(qū)的根腫菌的抗性,其中京研葉用對各地區(qū)的根腫菌均免疫;紅臉蛋蘿卜、和田三季對9個菌源均表現(xiàn)為高抗;臺灣品種牛埔gY、吉美紅皮、春露蘿卜僅對PbES表現(xiàn)感病;新美心櫻桃和臺灣品種紅姬櫻桃對PbES和PbHS表現(xiàn)感病;紅心紅皮對PbES、PbHS和PbPX表現(xiàn)感病;其余11個蘿卜品種對9個地區(qū)的根腫菌均無抗性。2、以篩選到的9個抗根腫病蘿卜為父本與感病油菜雜交。9個雜交組合中,兩個雜交組合產(chǎn)生F_1植株。通過流式細胞儀檢測、蘿卜特異性標記檢測和染色體數(shù)目觀察,三種方法的檢測結(jié)果一致證實僅“411×京研葉用”這一組合中存在兩株真雜種,在子房培養(yǎng)和田間自然條件下分別得到了1株。3、對真雜種的細胞學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),真雜種雄蕊敗育,無花粉。經(jīng)秋水仙素加倍后,花粉育性達35%,并且雌蕊壓片觀察發(fā)現(xiàn)含有56條染色體,表明成功得到了六倍體植株,即S_0代。4、以S_0植株為母本與甘藍型油菜回交,共得到178株幼苗。經(jīng)抗病性鑒定,發(fā)現(xiàn)有171株表現(xiàn)為抗病,7株為三級感病;大部分抗病植株含有47條染色體,但發(fā)現(xiàn)有一開黃花的抗病植株含有43條染色體。5、對真雜種的F_1代和BC_1代植株進行表型觀察分析,結(jié)果表明:真雜種的表型介于父母本之間,營養(yǎng)生長較生殖生長旺盛得多,葉型類似油菜,花的形態(tài)要小于母本,花色為白色。成功加倍的植株花型大而飽滿,葉片邊緣有毛刺�；亟唤枪L度與油菜莢果相似,果身與果喙比例與蘿卜莢果相似,為1:1。BC_1代出現(xiàn)了明顯的形態(tài)分離:生長早期,部分植株有主莖,類似于甘藍型油菜,部分無主莖,枝葉分散,類似于蘿卜。葉形差異主要表現(xiàn)在葉緣,從鋸齒形到橢圓形均有。大部分花的顏色為白色,有一單株花色恢復(fù)到黃色。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S435.654
【圖文】：

國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言學(xué)、細胞學(xué)及分子檢測技術(shù)，將油菜近緣種蘿卜中的抗根腫病基因?qū)氲接筒酥�，以期獲得具免疫或高抗根腫病的中間材料，進而拓寬甘藍型油菜的根腫病抗性遺傳基礎(chǔ)，為應(yīng)對油菜根腫抗性基因單一帶來的抗性易喪失問題提供更多可供選擇利用的種質(zhì)資源。.3.3 研究流程（1）通過抗病性鑒定，篩選出抗性強的蘿卜品種，為油菜抗根腫病育種提供抗源材料。（2）利用有性雜交與子房培養(yǎng)相結(jié)合的方法獲得屬間雜種，結(jié)合形態(tài)學(xué)，細胞學(xué)，分子生學(xué)手段檢測雜交種的真實性。（3）對 F1代真雜種加倍處理得到 S0，并與甘藍型油菜回交。（4）對 BC1代進行抗性鑒定，篩選抗病植株，作為繼續(xù)培育油菜抗病品種的中間材料。具研究流程如圖 1-1

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第三章 甘藍型油菜與抗病蘿卜的遠緣雜交真正的 F1雜交種（ACR）檢測到峰值的位置應(yīng)該接近兩個親本的平均值。親本油菜品系（AACC）和蘿卜品系（RR）的 DNA 熒光強度峰值分別出現(xiàn)在 100.80 和 52.74（圖 3-1A，B），兩者的平均值為 76.77。在檢測的六株 F1代植株中，僅有兩株的檢測峰值符合要求，均來自雜交組合“411×京研葉用”，即 F1-1 和 F1-4，峰值分別出現(xiàn)在為 84.81 和 86.37（圖 3-1C，D），表明它們最有可能是真正的 F1雜交種。親本檢測圖中在位置約 200 和 100 處也有一個小峰，而 F1-1和 F1- 4 在 160 處有一個小峰。這表明測試的植物除了 G1 期的細胞（DNA=2C）外，還有 S 期或G2 期的一些分裂細胞（DNA=4C）。（2）分子標記檢測鑒定使用九對蘿卜特異性引物進行 PCR 擴增檢測。真正的 F1雜種應(yīng)該具有與其父本蘿卜相同的條帶，雜種中不存在這樣的條帶表明為假雜交。其檢測結(jié)果如圖 3-2

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本文編號：2733178