【摘要】：麻紋蝽平腹小蜂Anastatus fulloi隸屬于膜翅目旋小蜂科(Hymenoptera:Eupelmidae),是果園害蟲荔枝蝽Tessaratoma papillosa(半翅目荔蝽科,Hemiptera:Tessaratomidae)重要的天敵寄生蜂。我國(guó)自上世紀(jì)60年代起就開始研究人工繁育和釋放平腹小蜂的技術(shù)。通過人工繁育釋放平腹小蜂,在荔枝和龍眼果園取得了很好的防治效果,其中放蜂果園荔蝽卵的寄生率可達(dá)85~90%,基本控制住了荔枝蝽的為害,為綠色和無(wú)公害荔枝、龍眼的生產(chǎn)提供了必要保障。寄生蜂體內(nèi)存在著大量的共生菌,包括Wolbachia、Rickettsia、Cardinium、Spiroplasma等,這些共生菌不僅調(diào)控宿主昆蟲的營(yíng)養(yǎng)代謝和生殖代謝,還能協(xié)助寄生蜂抵御生物、非生物脅迫,提高寄生蜂對(duì)化學(xué)農(nóng)藥的抗性及對(duì)寄生害蟲的適應(yīng)性等。而目前尚未見有針對(duì)麻紋蝽平腹小蜂共生菌的研究,研究麻紋蝽平腹小蜂體內(nèi)共生菌的多樣性、種類、分布等,可以促進(jìn)對(duì)平腹小蜂的寄生、生殖等特性更深入的了解,更好的推動(dòng)利用利用平腹小蜂防治農(nóng)林害蟲。本論文以麻紋蝽平腹小蜂為研究對(duì)象,首先通過內(nèi)部解剖,明確其生殖系統(tǒng)的內(nèi)部構(gòu)造;再通過高通量測(cè)序和16S rDNA克隆擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)其體內(nèi)共生菌的多樣性,明確共生菌的種類及相對(duì)豐度;最后通過熒光原位雜交(FISH)技術(shù)確定次生共生菌Rickettsia在麻紋蝽平腹小蜂體內(nèi)的分布位置,進(jìn)而推測(cè)和探討其功能。本論文主要研究結(jié)果如下:1.在體式顯微鏡下分別對(duì)麻紋蝽平腹小蜂的雌、雄成蟲進(jìn)行解剖,發(fā)現(xiàn)雌性生殖系統(tǒng)由中輸卵管、附腺、受精囊和1對(duì)卵巢、1對(duì)側(cè)輸卵管等組成;毒器官由1個(gè)無(wú)色透明并充滿油狀物質(zhì)的毒囊、1條白色卷曲的毒腺以及1個(gè)呈囊狀富含油性物質(zhì)的杜氏腺組成。雄性生殖系統(tǒng)由射精管和1對(duì)睪丸、1對(duì)附腺、1對(duì)輸精管等組成。2.基于細(xì)菌的通用引物16S rDNA測(cè)序分析麻紋蝽平腹小蜂廣東實(shí)驗(yàn)室種群和福清野外種群體內(nèi)共生菌的多樣性,發(fā)現(xiàn)在野外種群檢測(cè)到6大類共生菌,分別為沃爾巴克氏體Wolbachia、立克次氏體Rickettsia、不動(dòng)桿菌屬Acinetobacter、醋酸菌科Acetobacteraceae、螺原體Spiroplasma以及葡萄糖酸桿菌屬Gluconobacter;而實(shí)驗(yàn)室種群只檢測(cè)到醋酸菌科Acetobacteraceae和螺原體Spiroplasma。3.利用高通量測(cè)序技術(shù)完成了福清野外種群體內(nèi)共生菌的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)在綱級(jí)階元優(yōu)勢(shì)菌為疣微菌綱Verrucomicrobiae和螺旋體綱Spirochaetes;在目級(jí)分類階元其優(yōu)勢(shì)菌為疣微菌目Verrucomicrobiales、螺旋體目Spirochaetales和腸桿菌目Enterobacteriales;在科級(jí)分類階元其優(yōu)勢(shì)菌為螺旋體科Spirochaetaceae、普雷沃氏菌科Prevotellaceae、腸桿菌科Enterobacteriaceae和毛螺菌科Lachnospiraceae;具體到屬級(jí)分類單元,其優(yōu)勢(shì)菌為密螺旋體屬Treponema、擬桿菌屬Bacteroides和埃希氏桿菌屬Escherichia。4.利用熒光原位雜交技術(shù)(FISH)對(duì)野外種群的麻紋蝽平腹小蜂生殖系統(tǒng)內(nèi)的立克次氏體Rickettsia進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)立克次氏體Rickettsia在麻紋蝽平腹小蜂體內(nèi)存在于菌胞外部,即在雌蟲腹部已成熟的卵內(nèi)和未成熟的卵母細(xì)胞內(nèi),并集中分布在卵泡細(xì)胞周圍,同樣在卵柄和卵梗位置也檢測(cè)到立克次氏體;并且在小蜂的雄性個(gè)體的精巢附腺中也能檢測(cè)到立克次氏體的熒光信號(hào)。綜上所述,本論文對(duì)麻紋蝽平腹小蜂的生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)有了較為清楚的認(rèn)識(shí),并且利用16S rDNA克隆測(cè)序和高通量技術(shù)測(cè)定小蜂體內(nèi)共生菌的種類豐度,然后利用熒光原位雜交技術(shù)在麻紋蝽平腹小蜂雌成蟲卵巢內(nèi)的已成熟的卵、卵柄、卵梗位置以及未成熟的卵母細(xì)胞和卵巢附腺中檢測(cè)到熒光信號(hào),證明該菌在小蜂體內(nèi)是經(jīng)卵垂直傳播,并且在雄成蟲精巢附腺中也發(fā)現(xiàn)立克次氏體的存在。所得結(jié)論為提高寄生蜂繁育效率和揭示次生內(nèi)共生菌在宿主種群間的傳播方式提供依據(jù)。
【圖文】：

3 結(jié)果與分析3.1 麻紋蝽平腹小蜂內(nèi)部器官結(jié)構(gòu)解剖3.1.1 麻紋蝽平腹小蜂雌性生殖系統(tǒng)的基本構(gòu)造對(duì)麻紋蝽平腹小蜂雌性生殖系統(tǒng)的內(nèi)部解剖結(jié)果顯示，雌蜂的生殖系統(tǒng)由中輸卵管、附腺、受精囊和 1 對(duì)卵巢、1 對(duì)側(cè)輸卵管等組成（圖 3-1A）。雌蜂的一對(duì)卵巢呈乳白色，左右對(duì)稱，且每側(cè)卵巢由 3 個(gè)卵巢管組成，卵巢管的基部管狀，由基部到端部逐漸變細(xì)，兩側(cè)卵巢管端部延伸成的端絲集結(jié)在一起形成中懸?guī)�，懸附于脂肪體上。卵母細(xì)胞在卵巢管內(nèi)發(fā)育至成熟，且每側(cè)卵巢管內(nèi)都含有發(fā)育成熟的卵，呈乳白色的長(zhǎng)卵形（圖 3-1B）。側(cè)輸卵管分布在左右卵巢的下方，呈略透明的乳白色，側(cè)輸卵管的基部膨大形成輸卵管萼，兩個(gè)側(cè)輸卵管交匯形成中輸卵管。

小蜂的毒器官與雌蜂的生殖道相連，它由毒囊和毒腺兩部分組成，杜氏腺附著于毒囊末端，，但不屬于毒器官（圖3-2A）。毒腺呈乳白色的粗絲狀，游離在腹腔中的一端封閉，另一端與水滴狀的A B
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S476.3

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本文編號(hào)：2707616