發(fā)布時間：2020-06-11 02:49

【摘要】：真菌毒素(Mycotoxin)是真菌產(chǎn)生的有毒次級代謝產(chǎn)物。如同黃曲霉毒素,伏馬毒素B1對食品的污染嚴重威脅到人類的健康,長期過量曝露于含有毒素的食品會引起人類的中毒或各種疾病,嚴重者甚至死亡。有實驗結(jié)果表明伏馬毒素B1與人類食管癌的高發(fā)成正相關(guān);伏馬毒素B1導(dǎo)致兒童神經(jīng)管缺陷的疾病也有報道。因此,對自然界存在的能夠產(chǎn)生伏馬毒素B1的鐮刀菌屬(Fusarium spp.)真菌污染進行有效抑制以減少真菌毒素的產(chǎn)生成為迫切需要解決的問題。實驗前期從蚯蚓體表篩選出一株能夠降解幾丁質(zhì)的菌株,以16SrDNA基因序列分析為基礎(chǔ),結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察和部分生理生化特性測定(Biolog),該菌株被確定為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)。通過實驗得出:篩選出的粘質(zhì)沙雷氏菌對產(chǎn)毒鐮刀菌孢子萌發(fā)、菌絲生長明顯的抑制作用,粘質(zhì)沙雷氏菌的發(fā)酵濃度對伏馬毒素B1合成相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄、表達有抑制作用從而抑制毒素的產(chǎn)生。通過PCR擴增,在粘質(zhì)沙雷氏菌擴增到ChiA、ChiB基因。通過基因組測序,發(fā)現(xiàn)粘質(zhì)沙雷氏菌含有經(jīng)基因組測序發(fā)現(xiàn)粘質(zhì)沙雷氏菌中有合成羧酸酯酶(Carboxyleasterase)和轉(zhuǎn)氨酶(Aminotransferase)的基因序列。通過RNAseq,發(fā)現(xiàn)粘質(zhì)沙雷氏菌對伏馬毒素合成主要相關(guān)基因的表達有明顯的抑制作用。研究內(nèi)容:證明粘質(zhì)沙雷氏菌對產(chǎn)毒鐮刀孢子萌發(fā)的抑制和菌絲細胞壁的降解,聚焦于粘質(zhì)沙雷氏菌對毒素合成相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄、表達的影響等分子層面,最后確定粘質(zhì)沙雷氏菌的活性物質(zhì),闡明其抑菌抑毒的機理。本研究可以豐富抗菌資源庫,為鐮刀菌的生物防治和有效控制伏馬毒素污染提供理論基礎(chǔ)。
【圖文】：

脂類物質(zhì)作為細胞膜的重要構(gòu)成成分和細胞功能調(diào)節(jié)劑，在細胞的生長和分化中起到逡逑重要的作用。由于伏馬毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與人或動物機體內(nèi)的神經(jīng)鞘氨醇有著高度的相似逡逑性（見圖１－２），因此在神經(jīng)鞘脂類的代謝過程中，伏馬毒素Ｂ１競爭性地結(jié)合神經(jīng)鞘氨逡逑醇Ｎ－２�；D(zhuǎn)移酶，從而抑制了神經(jīng)鞘氨醇的生物合成，阻礙了鞘脂類代謝（Ｗａｎｇ邋ｅｔ逡逑ａｌ．？邋１９９１；邋Ａｂａｄｏ邋－邋Ｂｅｃｏｇｎｅｅ邋ｅｔ邋ａｌ．？邋１９９８；邋Ｙｏｏ邋ｅｔ邋ａｌ．；邋１９９２，邋Ｒｉｌｅｙ邋ｅｔ邋ａｌ．，邋１９９３），見圖邋１－３。逡逑神經(jīng)鞘脂類生物合成的破壞將給人類以及動物的健康造成嚴重的危害。逡逑Ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ邋ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ邐Ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ邋ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ逡逑邐逡逑／邐Ｈ邋Ｈ邋Ｆａｔｔｙ邋ａｃｙｌ－ＣｏＡ邐／邋ｃｏ邋ｃ0邐ＦＢ］逡逑ｆ邐Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ邐ｆ邐Ｖ－／逡逑ｆ邋ｈｏ邋ｏ邐／邐ｏｃ邐伏邋３毒ＫＢ１逡逑Ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ邋＾邋Ｊ邐＼邋Ｊ邐Ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ邋＼邐Ｊ逡逑ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ邋｝邋＾邐Ｙ邐ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ邋ｊ邐Ｊ逡逑－Ｓ：鞘氨ａ￥ｆ＾Ｐｈｉｎｇａｎｉｎｅ｜ｆ邋１邐）邋ｊ邐ｊ邐Ｊ逡逑

因族類基因。在合成伏馬毒素的基因調(diào)控途徑上，在的下游，還具有１０個相關(guān)逡逑ＦＵＭ基因家族類基因參與調(diào)節(jié)伏馬毒素合成酶的活性。從而調(diào)控伏馬毒素產(chǎn)量（Ｈｅｉｎｌ逡逑ｅｔａｌ．邋２０１０）（見圖１－４，表１－２）。然而，其余相關(guān)ＦＵＭ類基因的敲除突變體在伏馬毒素逡逑合成量上影響較小或沒有影響，說明該基因族在調(diào)控鐮刀菌伏馬毒素生物合成上具有逡逑一定的功能冗余。此外，在ＦＵＭ基因家族以外，一些其他與伏馬毒素產(chǎn)量相關(guān)的基因逡逑也正在日益發(fā)掘。例如，ＡＲＥＡ、ＣＰＰ１、ＦＣＣ１、ＦＳＴ１、ＦｖＶＥｌ、ＧＢＰ１、ＧＢＢ１邋等多逡逑個基因均被報道在伏馬毒素合成和產(chǎn)量上具有重要作用（Ｋｉｍ邋＆邋Ｗｏｌｏｓｈｕｋ，邋２００８；逡逑Ｂｌｕｈｍ邋＆邋Ｗｏｌｏｓｈｕｋ，邋２００６；邋Ｓｈｉｍ邋＆邋Ｗｏｌｏｓｈｕｋ，邋２００１邋；邋Ｂｌｕｈｍ邋ｅｔ邋ａｌ．？邋２００８；邋Ｍｙｕｎｇ邋ｅｔ邋ａｌ．５邋２００９；逡逑Ｓａｇａｒａｍ邋ｅｔ邋ａｌ．，邋２００６；邋Ｓａｇａｒａｍ邋＆邋Ｓｈｉｍ，邋２００７；邋Ｄｅｓｊａｒｄｉｎｓ，，邋１９９６）。表邋１－３邋列出邋了在串珠鐮刀逡逑４逡逑
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士后
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S476

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本文編號：2707264