【摘要】：土壤微生物與植物的生長密切相關(guān),微生物在植物病害防病抗病等方面發(fā)揮了關(guān)鍵性作用。菌株BIB-9是實驗室保存的一株生防菌,具有較高的產(chǎn)芽孢率,而且對四種病原真菌(層出鐮刀菌Fusarium proliferatum、腐皮鐮刀菌Fusarium solani、尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum和串珠鐮刀菌Fusarium moniliforme Sheld)具有廣譜抗性,具有作為生防制劑的潛力,因此,本文對該菌進行形態(tài)學(xué)觀察,生理生化及分子鑒定,探究了菌株BIB-9的抑菌性能、優(yōu)化了產(chǎn)芽孢發(fā)酵條件,并通過番茄盆栽實驗檢測了促生與生防潛力,為該菌株的生產(chǎn)應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。菌株BIB-9的培養(yǎng)基優(yōu)化,以添加3%麩皮培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,通過單因素試驗,確定BIB-9的最優(yōu)碳源為玉米粉,最優(yōu)氮源為大豆粉,最優(yōu)無機鹽為氯化鈣;結(jié)合響應(yīng)面試驗確定最佳培養(yǎng)基配方,菌株BIB-9產(chǎn)芽孢的最佳培養(yǎng)基組分為27.8g/L大豆粉,玉米粉30g/L,CaCl_2 2.01g/L,溫度38.34℃,搖床轉(zhuǎn)速220rpm,接種量3%,裝液量為80mL/250mL,初始pH為7.5,發(fā)酵周期為36h后靜置12h,獲得的菌株BIB-9的發(fā)酵液產(chǎn)芽孢能力最強,芽孢濃度為4.22×10~9cfu/mL,相較于優(yōu)化前芽孢濃度提高了75.8%。通過盆栽實驗研究菌株BIB-9對番茄的生長的影響。將菌株BIB-9制成菌劑與有機肥配施,結(jié)果表明:與對照組(CK)相比,液體菌劑處理(T1)和固體菌劑處理(T2)可以顯著增加番茄植株的株高、地徑、鮮重和干重,T1與CK相比分別提高了103.34%、69.48%、247.4%和173.47%,T2與CK相比分別提高了61.92%、52.42%、118.85%和123.32%;可以顯著提高葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量,T1與CK相比分別提高了47.31%、81.82%和32.5%,T2與CK相比分別提高了34.4%、66.67%和22.5%;可以顯著提高番茄根系的超氧化物歧化酶、過氧化物酶和過氧化氫酶的活性,T1與CK相比分別提高了41.19%、260%和61.55%,T2與CK相比分別提高了26.15%、160%和90.93%;可以明顯降低丙二醛的含量,與CK相比,T1和T2分別降低了54.41%和54.49%;可以顯著提高土壤中蔗糖酶、過氧化氫酶和脲酶的活性面,T1與CK相比分別提高了35.12%、19.44%和62.50%;T2與CK相比分別提高了8.25%、8.33%和50%。與發(fā)酵基質(zhì)處理相比,T1和T2有顯著的差異,證明菌株BIB-9具有良好的生防潛力。
【圖文】：

菌株 BIB-9 對尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、層出鐮刀菌和腐皮鐮刀菌 4種病原真菌的生長均有良好的抑制作用，抑菌率分別為 56.67%、52.78%、59.17%和52.50%。說明菌株 BIB-9 是一株具有廣譜抗性的拮抗菌，與實驗室保存的其他 14株生防菌相比，菌株 BIB-9 的抑菌效果最好（表 3），說明該菌株在植物病害的防控上具有極高的潛在應(yīng)用價值�？拐婢镔|(zhì)發(fā)揮作用一般通過 3種形式：破壞真菌細(xì)胞的外層保護作用，水解細(xì)胞壁使其通透性增加，破壞真菌細(xì)胞膜，抑制 DNA 合成引起真菌細(xì)胞死亡（羅琳等，2017）。拮抗菌與病原菌的拮抗培養(yǎng)中，兩菌的菌落存在一定間隙，而病原菌靠近拮抗菌的菌落邊緣部分出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象。鏡檢結(jié)果顯示，正常生長的植物病原菌菌絲粗細(xì)均勻、光滑、粗壯，生長端舒展（圖 3，a）。受到菌株 BIB-9 抑制的病原菌出現(xiàn)了細(xì)胞壁溶解（圖 3，b），菌絲打結(jié)、發(fā)生扭曲、變形（圖 3，c）；菌體萎縮、畸變（圖3，d），菌絲生長端分枝增多、分枝間隔變短（圖 3，e），生長端菌絲斷裂，在斷裂處出現(xiàn)了明顯的球狀膨大現(xiàn)象（圖 3，f）現(xiàn)象。

抗菌的菌落邊緣部分出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象。鏡檢結(jié)果顯示，正常生長的植物病原菌菌絲粗細(xì)均勻、光滑、粗壯，生長端舒展（圖 3，a）。受到菌株 BIB-9 抑制的病原菌出現(xiàn)了細(xì)胞壁溶解（圖 3，b），菌絲打結(jié)、發(fā)生扭曲、變形（圖 3，c）；菌體萎縮、畸變（圖3，d），，菌絲生長端分枝增多、分枝間隔變短（圖 3，e），生長端菌絲斷裂，在斷裂處出現(xiàn)了明顯的球狀膨大現(xiàn)象（圖 3，f）現(xiàn)象。圖 1菌株 BIB-9 對尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、層出鐮刀菌和腐皮鐮刀菌的抑制效果（第四天）Fig.1 Inhibition effect of strain BIB-9 on Fusarium oxysporum, Fusarium moniliforme Sheld, Fusarium proliferatum andFusarium solani (4d)
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S476

【參考文獻】

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本文編號：2706090