【摘要】：黃瓜花葉病毒(Cucumber Mosaic Virus)是雀麥花葉病毒科(Bromoviridae)黃瓜花葉病毒屬(Cucumovirus)典型成員。CMV寄主范圍廣泛,能侵染85科365屬1000多種植物。是世界上最流行的植物病毒,也是目前研究最多的最具經(jīng)濟(jì)重要性的植物病毒之一。近年來隨著我國種植結(jié)構(gòu)調(diào)整,返季節(jié)蔬菜、林果類種植面積擴(kuò)大,CMV越冬基數(shù)大,并且越來越靠近煙區(qū),黃瓜花葉病發(fā)生有逐年加重的趨勢。目前對于該病害的防治措施主要是培育抗病品種和化學(xué)防治,但是效果并不理想,而且人們愈加重視農(nóng)藥的殘留問題,所以生物防治技術(shù)已經(jīng)成為黃瓜花葉病毒病防治上的研究熱點。前期本實驗室從秦嶺原始森林土壤中篩選得到一株對多種植物病原菌有明顯誘導(dǎo)抗性的枯草芽孢桿菌株VH-3。結(jié)合先前實驗室成員對解淀粉芽孢桿菌超敏蛋白的研究,本實驗通過細(xì)胞過敏壞死亡反應(yīng)發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌VH-3菌株中存在可誘導(dǎo)植株產(chǎn)生抗病性的超敏蛋白,經(jīng)過菌株活化、液體發(fā)酵、離心過濾分離、硫酸銨分級沉淀等方法對蛋白進(jìn)行粗提取,以及SDS-PAGE蛋白電泳和生物活性測定發(fā)現(xiàn)一種分子量在40KDa左右的超敏蛋白,將其命名為超敏蛋白SBT1。為明確枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中超敏蛋白SBT1對CMV的防治效果。本研究以心葉煙為材料,采用半葉枯斑法,測定100、300、500及700μg/mL不同濃度超敏蛋白對CMV的誘導(dǎo)抗性效果,試驗結(jié)果表明不同濃度超敏蛋白都具有誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗CMV能力,與空白對照相比枯斑數(shù)明顯減少且隨著濃度增大效果越好。但500μg/mL與700μg/mL效果無顯著差異,考慮到經(jīng)濟(jì)效益選擇濃度為500μg/mL的超敏蛋白進(jìn)行下一步試驗。超敏蛋白對黃瓜花葉病毒的體外鈍化試驗,結(jié)果表明超敏蛋白不具有對黃瓜花葉病毒的體外鈍化作用,說明超敏蛋白本身并不直接作用于病毒,而是通過作用于植物誘導(dǎo)其產(chǎn)生抗病性。選取誘導(dǎo)抗性效果相對較好的500μg/m L超敏蛋白測定其對CMV的預(yù)防及治療效果,結(jié)果表明與對照組相比500μg/m L超敏蛋白均具有較好的預(yù)防及治療效果,越早噴施超敏蛋白預(yù)防效果越好,接種CMV前48h噴施效果可達(dá)67.75%,處理越早治療效果也越好,接種CMV后24h治療效果可達(dá)60.53%。測定超敏蛋白對煙草抗病相關(guān)防御酶POD、SOD、PAL活性影響,結(jié)果表明經(jīng)超敏蛋白處理后煙葉中的POD、SOD、PAL活性較對照組有較大程度提高,整體趨勢呈現(xiàn)先上升后下降,說明超敏蛋白能夠增加煙草抗病防御酶活性,初步揭示了其誘導(dǎo)抗性機(jī)理。田間試驗表明超敏蛋白能夠增加煙草株高、莖圍、最大葉面積等農(nóng)藝性狀。表明超敏蛋白不僅能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生對CMV抗性,而且對煙草具有促進(jìn)生長作用,具備廣闊的開發(fā)及市場前景。
【圖文】：

圖 3-1 硫酸銨鹽析蛋白樣品Fig.3-1 Ammonium sulfate salting out protein solution蛋白誘導(dǎo)煙草過敏性壞死結(jié)果組分鹽析蛋白誘導(dǎo)煙草過敏性壞死試驗結(jié)果表明：30%和 50%蛋白組斑，50%蛋白組分枯斑癥狀最典型，，說明其中含有超敏蛋白，進(jìn)行下胺凝膠電泳檢測。30%40%60%50%

圖 3-1 硫酸銨鹽析蛋白樣品Fig.3-1 Ammonium sulfate salting out protein solution2 鹽析蛋白誘導(dǎo)煙草過敏性壞死結(jié)果不同組分鹽析蛋白誘導(dǎo)煙草過敏性壞死試驗結(jié)果表明：30%和 50%性枯斑，50%蛋白組分枯斑癥狀最典型，說明其中含有超敏蛋白，烯酰胺凝膠電泳檢測。30% 40%50%60%
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S432.41

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2705642