【摘要】：花青素屬類黃酮物質,在自然界分布廣泛,是植物的主要水溶性色素之一�；ㄇ嗨刈鳛橐环N天然食用色素,安全、無毒,而且具有一定營養(yǎng)和藥理作用,在食品、化妝、醫(yī)藥方面有著巨大應用潛力。桑樹作為一種重要的經濟作物,已經有幾千年的種植歷史,不僅可以作為家蠶的飼料,還具有重要的藥用價值,桑椹含有豐富的花青素,對人體具有多種生理保健功能。本課題組前期對桑樹黃酮類化合物的含量、成分分離純化以及調控其生物合成的部分基因進行了研究,在此基礎上,本實驗克隆了桑樹查爾酮異構酶基因(MmCHI)、花青素合酶基因(MmANS)、二氫黃酮醇4-還原酶基因(MmDFR),分析了這三個基因及本課題前期研究獲得的桑樹肉桂酸-4-羥化酶基因(MmC4H)、桑樹查爾酮合酶基因(MmCHS)、桑樹黃酮醇合成酶(MmFLS)、桑樹黃烷酮-3-羥化酶(MmF3H)、在不同桑品種的成熟桑椹、以及桑椹發(fā)育不同階段的表達特征。該研究對于深入了解桑椹呈色的分子機理,相關基因在轉基因中的利用以及表達調控桑椹顏色等具有重要的理論指導意義。主要的研究成果如下:1、根據GenBank中包括桑樹在內的其他木本植物ANS、DFR和CHI的序列信息,設計引物,并采用PCR方法對魯桑品種育71-1的同源基因進行了克隆,獲得了育71-1品種CHI、ANS和DFR基因的ORF區(qū)全長序列,分別命名為MmCHI(GeneBank:MK287781)、MmANS(GeneBank:MK287780)和MmDFR(GeneBank:MK287779)。MmCHI基因ORF區(qū)序列長度為519bp,編碼172個氨基酸,預測蛋白分子質量為19.7 kD,等電點為5.5;MmANS基因ORF區(qū)序列長度為1 077 bp,編碼358個氨基酸,預測蛋白分子質量為42.23 kD,等電點5.25;MmDFR基因的ORF區(qū)序列長度為1 011 bp,編碼336個氨基酸,預測蛋白分子質量為39.51 kD,等電點為5.34。對這三個基因氨基酸序列進行同源比對與進化樹分析,發(fā)現MmCHI、MmANS和MmDFR有很高的保守性,與川桑與薔薇科植物相似度非常高。2、為探討桑椹花青素含量與相關基因表達之間的聯系,利用熒光定量PCR技術和溶劑提取法分別對花青素合成途徑中CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H等7個相關基因在桂花蜜、白玉王、中椹1號、中椹2號、紅果2號、粵椹大10、勐簡4號等7份桑種質成熟桑椹中的表達水平以及總花青素含量進行分析。結果表明,花青素合成途徑中相關基因對于桑樹的花青素合成和果實顏色的形成存在相關聯系,基因表達與花青素含量有比較顯著的正相關關系。3、利用熒光定量PCR技術對花青素合成途徑中7個相關基因在2種果色桑品種果實發(fā)育的8個時期的表達進行了分析。研究結果表明桑椹花青素含量隨著果實成熟而增加。花青素合成途徑中相關基因的表達水平與桑椹花青素含量呈正相關,與桑椹顏色的呈現有著緊密關系。
【圖文】：

植物生小分花在植類，和生色[1構上1.1中得（和差異物與環(huán)境(生生存能力，且分子有機化花青素也是植植物中的遍從目前來生理生化環(huán)10]。上來看，花）。由于環(huán)得到了鑒定（peonidin）和矮牽牛素異，這類花青生物和非生且是周圍的化合物，包括植被體內一遍布很廣泛來說，，在自然環(huán)境的差異，花青素都有一環(huán)上不同位定，但是其、天竺葵素（petunidin青素的衍生生物)在長期的環(huán)境協調過括生物堿、一種重要的次，是花和水然界中已經植物的花和一個基本的置羥基化和中常見的只素（geranium）[12]，它們生物占目前自期進過程黃次生水果經發(fā)和果的 C和甲只有m）們的自然

CeebasedonamCHIs的系統(tǒng)
【學位授予單位】：江蘇科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S888.2

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本文編號：2700819