【摘要】：小麥葉銹病(Puccinia triticina)是小麥生產(chǎn)上的重要病害之一,該病害在我國主要麥區(qū)均有分布,近年來有逐漸加重趨勢。本文通過田間和室內(nèi)盆栽篩選,獲得了對小麥葉銹病具有誘導(dǎo)抗性的菌株,對其分類地位、防控效果和誘抗機理等方面進行了系統(tǒng)研究,初步研究了部分菌株的誘導(dǎo)抗性作用機制,研究進展如下:1.誘導(dǎo)小麥抗葉銹病生防菌株的篩選:將本研究室保存的4600株菌株發(fā)酵液對小麥種子進行包衣處理,通過田間試驗進行初步篩選、盆栽試驗復(fù)篩和田間防效驗證試驗。結(jié)果表明,得到的4株高效菌株Sneb1462、Sneb1586、Snef384和Snef570均有誘導(dǎo)小麥抗葉銹菌的侵染的良好防效,并且還具有對小麥植株生長的促進作用。2.誘導(dǎo)小麥抗葉銹病生防菌株的鑒定:通過形態(tài)學(xué)觀察、生理生化反應(yīng)測定和分子生物學(xué)序列比對分析方法對篩選出的生防菌進行鑒定。結(jié)果表明,細菌Sneb1462為類芽孢桿菌屬(Paenibacillus),多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa);細菌Sneb1586為芽孢桿菌屬(Bacillus),蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)。2株真菌均為木霉屬(Trichoderma)菌株,真菌Sneb384為深綠木霉(Trichoderma atroviride),真菌Sneb570為綠色木霉(Trichoderma viride)。3.細菌Sneb1462誘導(dǎo)小麥抗葉銹病的活性氧變化研究:利用多粘類芽孢桿菌Sneb1462發(fā)酵液包衣處理小麥種子,待麥苗長至一葉一心期接種小麥葉銹菌,對接種后不同時間點小麥葉片中活性氧含量進行測定。結(jié)果表明,多粘類芽孢桿菌Sneb1462誘導(dǎo)+接葉銹菌處理前48 h內(nèi)O2-和H2O2的含量明顯升高,在其12 h和24 h峰值時分別是空白對照處理的1.49和1.62倍,說明多粘類芽孢桿菌Sneb1462在葉銹病侵染初期能夠誘導(dǎo)小麥ROS的產(chǎn)生和積累,參與小麥獲得系統(tǒng)抗性防御反應(yīng)。4.細菌Sneb1462誘導(dǎo)小麥抗葉銹病相關(guān)防衛(wèi)基因的表達分析:利用實時熒光定量PCR技術(shù)分析了對接種葉銹菌后不同時間點小麥葉片中相關(guān)防衛(wèi)基因表達情況。結(jié)果顯示,多粘類芽孢桿菌Sneb1462誘導(dǎo)+接葉銹菌處理后早期,Ta POD和Ta SOD防御酶基因顯著表達,峰值時是空白對照的3.11倍和7.50倍。Ta PR-1、Ta PR-2和Ta PR-5病程相關(guān)蛋白基因在12 h時表達顯著上調(diào),分別是空白對照的2.83倍、7.50倍和9.89倍,說明多粘類芽孢桿菌Sneb1462在葉銹菌侵染初期參與誘導(dǎo)小麥相關(guān)防衛(wèi)基因的表達,增強植株的抗病性。
【圖文】：

第二章 小麥種子處理誘導(dǎo)小麥抗葉銹病菌生防菌的篩選間調(diào)查種 15 d 后，每個處理隨機取 5 株小麥植株，測定其病害嚴(yán)重度，麥株高和單穗重。病害嚴(yán)重度參照李振岐（2002）依據(jù)病葉上銹積與葉片總面積的百分比來確定病級，用分級法表示，設(shè) 1%、60%、80%和 100%八級，葉片未發(fā)病，記為“0”。調(diào)查時目測病嚴(yán)重度，計算公式如下：重度=∑（各嚴(yán)重度級別 各級病葉數(shù)）/調(diào)查葉片總數(shù)；（%）=（發(fā)病的葉片數(shù)/調(diào)查的葉片總數(shù)） 100。

第二章 小麥種子處理誘導(dǎo)小麥抗葉銹病菌生防菌的篩選結(jié)果與分析 誘導(dǎo)小麥抗葉銹病生防菌株的田間篩選通過生防菌田間初篩試驗，從 4600 株菌株中篩選出 5 株細菌菌株 Sneb11285、Sneb1289、Sneb1462、Sneb1586 和 3 株真菌菌株 Snef384、Snef570、S夠增強小麥抗葉銹病侵染。由試驗結(jié)果可知（圖 2-2），細菌 Sneb1285 和真菌 S后，，小麥葉銹病的嚴(yán)重度并無顯著差異；而 4 株細菌 Sneb1197、Sneb1289、Sneb1586 和 2 株真菌 Snef384、Snef570 處理后，小麥葉銹病的嚴(yán)重度顯著降低。 4 株細菌及 2 株真菌菌株進行室內(nèi)盆栽試驗。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S435.121.43;S476.1

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本文編號：2692297