【摘要】：咪唑乙煙酸(Imazethapyr)是我國(guó)農(nóng)田中常用的除草劑之一,因咪唑乙煙酸除草效果好,價(jià)格低廉,被廣泛應(yīng)用與推廣,特別是黑龍江省大豆田中使用量較大,但咪唑乙煙酸的長(zhǎng)殘性使其長(zhǎng)期殘留在土壤中,給農(nóng)作物輪作帶來(lái)了一定的困難,也給環(huán)境帶來(lái)了巨大壓力,因此找到咪唑乙煙酸降解機(jī)制,對(duì)解決咪唑乙煙酸的污染問(wèn)題至關(guān)重要。為研究短密木霉(Trichodermta brevicompactum)發(fā)酵液對(duì)咪唑坐乙煙酸的降解能力,用富集培養(yǎng)基培養(yǎng)短密木霉,分別取3、5、7、9和11d的發(fā)酵液,同時(shí)用無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基和含咪唑乙煙酸的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基分別培養(yǎng)短密木霉。將不同發(fā)酵液分別進(jìn)行離心處理獲得發(fā)酵液上清,用0.22 μm和0.45 μm微孔混合濾膜抽濾獲得發(fā)酵液抽濾液。不同發(fā)酵液的降解率結(jié)果為:發(fā)酵液上清0.22 μm混合濾膜抽濾液,發(fā)酵液上清0.45 μm混合濾膜抽濾液,0.45 μm混合濾膜抽濾液和0.22 μm混合濾膜抽濾液無(wú)明顯區(qū)別;富集培養(yǎng)基發(fā)酵液中,第7 d降解率相對(duì)較高。為探究短密木霉降解咪唑乙煙酸的蛋白質(zhì)表達(dá)變化和相關(guān)代謝途徑并鑒定咪唑乙煙酸降解基因,進(jìn)行了蛋白質(zhì)組測(cè)序,完成了蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)聯(lián)合分析。利用同重同位素相對(duì)與絕對(duì)定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRA Q)技術(shù)分析咪唑乙煙酸對(duì)短密木霉蛋白組的影響。蛋白質(zhì)組共鑒定到4003個(gè)蛋白質(zhì),差異表達(dá)蛋白有353個(gè),184個(gè)蛋白上調(diào),169個(gè)蛋白下調(diào);在差異蛋白顯著富集的GO條目中,生物過(guò)程有195個(gè)差異表達(dá)的蛋白,富集在351條通路中,細(xì)胞組分中有129個(gè)差異表達(dá)蛋白,富集在62條通路中,分子功能中有220個(gè)差異表達(dá)的蛋白,富集在157條通路中;KEGG富集通路分析結(jié)果顯示,有258個(gè)差異蛋白富集在105條通路中。通過(guò)蛋白質(zhì)組分析,可有效找到短密木霉降解咪唑乙煙酸的相關(guān)蛋白,進(jìn)而了解其代謝途徑,為降解咪唑乙煙酸提供蛋白質(zhì)水平和代謝水平的分子理論基礎(chǔ)。完成了蛋白質(zhì)組與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。定量蛋白質(zhì)和基因的表達(dá)關(guān)聯(lián)系數(shù)為-0.0472,顯著差異蛋白質(zhì)和顯著差異基因表達(dá)關(guān)聯(lián)系數(shù)為-0.1420,表達(dá)變化趨勢(shì)相同蛋白質(zhì)和基因表達(dá)關(guān)聯(lián)系數(shù)為-0.7413,表達(dá)變化趨勢(shì)相反蛋白質(zhì)和基因表達(dá)關(guān)聯(lián)系數(shù)為-0.7916;關(guān)聯(lián)到24個(gè)差異表達(dá)基因與蛋白豐度相應(yīng)變化,其中表達(dá)趨勢(shì)相同有12個(gè)基因,同時(shí)上調(diào)7個(gè),同時(shí)下調(diào)5個(gè);同時(shí)上調(diào)的7個(gè)基因NCBInr數(shù)據(jù)庫(kù)中功能已知的基因有2個(gè),分別為TBU1425A和TBU3981A。經(jīng)Q-pcr驗(yàn)證,表達(dá)變化趨勢(shì)與蛋白質(zhì)組和轉(zhuǎn)錄組一致,將TBU1425A和TBU3981A基因作為降解咪唑乙煙酸的候選基因。
【圖文】：

的雜草防治，多用于我國(guó)大豆產(chǎn)區(qū)防治雜草［１］。特別是在黑龍江省農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，咪唑乙逡逑煙酸作出了巨大的貢獻(xiàn)。逡逑咪唑乙煙酸化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖１－１，化學(xué)名稱為（ＲＳ）邋－５－乙基－２－邋（４－異丙基－４－甲基－５－逡逑１Ｈ－２－咪挫啉－２－基）煙酸［２］，英文通用名ｉｍａｚａｐｙｒ，商品名有ａｒｓｅｎａｌ、ａｓｓａｕｌ、滅草煙和逡逑阿時(shí)拉等，具有殺草種類多、活性高、選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。咪唑乙煙酸可以抑制乙酰乳酸逡逑合成酶（ＡｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅＳｙｎｔｈａｓｅ，邋ＡＬＳ），阻礙蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而抑制植物的生長(zhǎng)而死亡。逡逑在豆科植物在體內(nèi)，咪唑乙煙酸吸收后很快被分解，對(duì)大豆生長(zhǎng)發(fā)育沒(méi)有影響，因此成逡逑為大豆田中優(yōu)良而常用的除草劑［３，４］。但因其殘留期較長(zhǎng)，易對(duì)后茬作物產(chǎn)生藥害，并逡逑且咪唑乙煙酸使用量仍在逐年增加，對(duì)未來(lái)我國(guó)的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展也將產(chǎn)生重大威脅，，同逡逑時(shí)也將會(huì)帶來(lái)食品安全問(wèn)題，因此解決咪唑乙煙酸的污染問(wèn)題迫在眉睫。逡逑＿邋八邋ＣＯＯＨ逡逑圖１－１咪唑乙煙酸（咪草煙）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅｌ－１邋Ｃｈｅｍｉｃａｌ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋ｉｍａｚａｐｙｒ逡逑１．１．１邐＿乙煙賊留的危害逡逑１９９０年我國(guó)開(kāi)始批量進(jìn)口咪唑乙煙酸并在黑龍江省應(yīng)用

逡逑效液相圖，由圖２－１可知：咪唑乙煙酸的保留時(shí)間為６．２６９邋ｍｉｎ。逡逑１－８０：邐Ｉ邐｜逡逑｜逡逑１．６０－邐ｇ邐．逡逑１．４０．．逡逑１．２０邋ｊ逡逑１．００邋！逡逑？邋１逡逑０．８０邋ｊ逡逑０．６０－Ｊ逡逑①．邐ｉ逡逑０邋２０邋Ｊ邐Ｚ邋？邋ｓ邋！邐ｓ邋§逡逑ｊ邐ＳＩ邐＾邋ｉ邋＼逡逑ｎ邋ｎｎ邋１邐￡邐邐Ｉ邋．…Ｘ邐００、００邐逡逑Ｕ．ＵＵ邋■邐ｉｊ邐Ｔ：．邐￣邐？；邐Ｈｒ邋＼５邋Ｔ．逡逑１．００邐２．００邐３．００邐４．００邐５．００邐６．００邐７．００邐８．００邐９．００邐１０．００逡逑分鐘逡逑圖２－１咪唑乙煙酸水溶液液相色譜圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２－１邋Ｌｉｑｕｉｄ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋ａｑｕｅｏｕｓ邋ｓｏｌｕｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｉｍａｚａｐｙｒ逡逑２．２．２邋＿乙煙酸標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑咪唑乙煙酸標(biāo)準(zhǔn)品用超純水溶解，濃度為１００－１０００邋ｍｇ／ｋｇ，與色譜峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)逡逑曲線：ｙ＝８５０４ｘ＋２０３９３
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S481.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2668499