【摘要】：內(nèi)生真菌、植食性昆蟲與寄主植物,三者之間的互作關(guān)系復(fù)雜多變,在生物種群控制、生物進化和植物生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用。為了解蘿卜植株(Raphanus sativus L.)-米曲霉(Aspergillus oryae)-小菜蛾(PlutellaxylostellaL.)三者之間的互作關(guān)系,本文利用種子浸泡A.oryzae孢子懸浮液的方法在蘿卜植株體內(nèi)建立A.oryzae內(nèi)生真菌,分析A.oryzae內(nèi)生真菌對蘿卜生長的影響,以及含有內(nèi)生真菌的蘿卜植株對小菜蛾適合度的效應(yīng),以期更好地評價和驗證蘿卜-米曲霉-小菜蛾三者之間的三級互作關(guān)系。主要研究結(jié)果如下:1.A.oryzae在蘿卜植株體內(nèi)的定殖通過種子浸泡法將A.oryz e接種到蘿卜植株體內(nèi),每隔一周檢測一次直至蘿卜植株內(nèi)無A.oryza 的存在。研究結(jié)果表明:A.oryzae在蘿卜葉片內(nèi)的定殖率顯著高于莖和根中;第二周在莖中檢測不到A.oryzae 第五周在根中未檢測到A.oryzae 第七周A.oryzae在葉中消失,說明A.oryza 在蘿卜植株體內(nèi)并沒有持續(xù)定殖與擴繁的能力。2.A.oryzae內(nèi)生真菌對蘿卜植株生長的影響種子浸泡A.oryza 孢子懸浮液12小時后,種植在無菌土壤中,檢測種子的發(fā)芽狀況,每隔一周測量蘿卜植株的生長參數(shù)(葉長、葉寬、莖高、根長、株高與株干重)直至蘿卜植株內(nèi)無A.oryzae的定殖。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):種子在A.oryza 處理后,幼苗的發(fā)芽率、葉長、葉寬、莖高和根長均無顯著性差異,但第一、三、四、五周的株高和干株重有顯著性提高,表明A.oryza 對蘿卜植株生長具有促進作用。3.A.oryza 內(nèi)生真菌對小菜蛾適合度的影響利用定殖A.oryzae的蘿卜幼苗飼喂小菜蛾,評估A.oryza 對小菜蛾適合度的影響。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn):小菜蛾取食含有A.oryza 的蘿卜幼苗后,其取食量、蟲重、化蛹率、蛹重、羽化率、幼蟲死亡率都呈現(xiàn)出不同程度的下降趨勢,其中小菜蛾的取食量、蟲重、蛹重、幼蟲死亡率顯著下降,但是對小菜蛾的生長歷期、單雌產(chǎn)卵量、孵化率無影響,綜合上述結(jié)果表明A.oryzae共生蘿卜植株后會對小菜蛾的生長發(fā)育產(chǎn)生不利的影響。4.A.oryza 內(nèi)生真菌對小菜蛾基因表達的影響將小菜蛾分別飼養(yǎng)在含有A.oryza 內(nèi)生菌與不含A.oryza 內(nèi)生菌的蘿卜幼苗上,對兩組小菜蛾幼蟲進行轉(zhuǎn)錄組測序,分析基因表達的變化。實驗發(fā)現(xiàn):取食定殖A.oryza 蘿卜植株的小菜蛾,在碳水化合物代謝通路中,有關(guān)糖酵解、三羧酸循環(huán)中催化酶的表達顯著下調(diào);在蛋白質(zhì)代謝通路中關(guān)于胰蛋白酶基因的表達均顯著下調(diào),但是對解毒有關(guān)的基因表達影響不大。上述結(jié)果表明取食A.oryzae共生的蘿卜植株能夠有效的抑制蛋白質(zhì)和碳水化合物的水解能力。本研究發(fā)現(xiàn)通過種子浸泡法可以將A.oryza 有效地接種到蘿卜植株體內(nèi)并對其生長產(chǎn)生積極促進作用,同時能夠抑制小菜蛾的取食和生長發(fā)育。該研究表明通過將A.oryza 內(nèi)共生蘿卜植株,對于防治小菜蛾具有積極的意義和一定的應(yīng)用潛力。
【圖文】：

培養(yǎng)３－５天后，，Ａ邋懸浮液浸泡的種子（ＡＳＴ）培養(yǎng)出Ａ邋Ｍｚａｅ邋（圖逡逑２－１邋Ａ），而無菌水浸泡的種子（ＣＳＴ）表面消毒后接種到ＰＤＡ上培養(yǎng)出龍以ｅｒ？攸／逡逑（圖２－１邋Ｃ）；在對Ａ邋浸泡和無菌水浸泡的種子進行表面消毒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)沒逡逑有從種子表面培養(yǎng)出真菌（圖２－１邋Ｂ，Ｄ），說明Ｊ．ｏ／ｙｚａｅ通過種子浸泡法成功侵入逡逑蘿卜種子內(nèi)部，NB邐可能是蘿卜種子內(nèi)生真菌。逡逑Ｂ邋ＭＷ！逡逑ｃＷ＾逡逑Ｄ邋＆Ｔ邋Ｔ逡逑ｔｅｌ邋１」逡逑圖２－１蘿卜種子內(nèi)生菌的培養(yǎng)逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋Ｒａｄｉｓｈ邋Ｓｅｅｄ邋ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ１邋ｃｕｌｔｕｒｅ逡逑Ａ）

Ａ邐Ｂ逡逑圖２－３邋Ａ邐菌落以及抱子和菌絲的形態(tài)逡逑Ｆｉｇ．邋２－３邋Ａ．邋ａｌｔｅｒｎｃｉｔｃｉ邋ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ邋ａｎｄ邋ｓｐｏｒｅ邋ｍｙｃｅｌｉａｌ邋ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ逡逑Ａ）
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S476;S436.3

【參考文獻】

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本文編號：2661693