【摘要】：中國(guó)是獼猴桃的故鄉(xiāng),也是世界上獼猴桃種植面積最大的國(guó)家。截止2016年,中國(guó)的獼猴桃種植面積達(dá)150多萬畝,占到世界總種植面積的70%以上,產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的60%以上。隨著獼猴桃種植年限的增加,獼猴桃根腐病發(fā)生更為普遍,成為影響獼猴桃果實(shí)產(chǎn)量與品質(zhì)的主要病害之一,是困擾果農(nóng)的一大難題。目前治療根腐病常用化學(xué)農(nóng)藥,但長(zhǎng)期施用化學(xué)農(nóng)藥,嚴(yán)重污染水體、大氣和土壤,并通過食物鏈進(jìn)入人體,危害人體健康。目前流行用生物方法防治植物病蟲害,進(jìn)而促進(jìn)農(nóng)業(yè)綠色可持續(xù)發(fā)展。本研究從徐香獼猴桃根腐病植株病根分離純化病原真菌,并通過回接試驗(yàn)及分子鑒定確定病原真菌種類;針對(duì)該病原真菌篩選出一株能夠明顯抑制其生長(zhǎng)的生防菌株,分子鑒定確定其為枯草芽孢桿菌C3,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究;在試驗(yàn)室水平下探究了C3抑制病原菌生長(zhǎng)的機(jī)制;通過盆栽及大田試驗(yàn),進(jìn)一步驗(yàn)證了C3對(duì)徐香獼猴桃根腐病的治療效果。主要研究結(jié)果如下:1.通過回接試驗(yàn)及ITS序列鑒定,陜西眉縣地區(qū)徐香獼猴桃根腐病致病菌為茄腐皮廉孢霉Fusarium solani。2.從正常獼猴桃果樹根際土壤分離到的C3經(jīng)16s rRNA鑒定,其為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis;菌株C3最適生長(zhǎng)溫度為30℃,最適pH為5.0,赤砂糖是其較為適宜的碳源;酵母膏為其較適氮源;菌株C3可以產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶、纖維素酶、磷酸酶、淀粉酶、蛋白酶及植酸酶。3.生防菌C3防治徐香獼猴桃根腐病主要機(jī)制為:分泌抑菌蛋白(60%硫酸銨沉降蛋白質(zhì)對(duì)致病菌有明顯的抑制作用,且其主要成分為幾丁質(zhì)酶)、促進(jìn)獼猴桃幼苗生長(zhǎng)(通過分泌生長(zhǎng)素和赤霉素促進(jìn)獼猴桃幼苗根系生長(zhǎng));誘導(dǎo)幼苗抗性酶活性升高(苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、抗壞血酸過氧化物酶和超氧化物歧化酶)。4.生防菌C3能夠改良患有獼猴桃根腐病的病樹根際土壤,在該土壤中生長(zhǎng)的獼猴桃幼苗(整株鮮重為1.140g/株)與健康土壤組(整株鮮重為1.11g/株)無顯著差異;不添加C3的病樹根圈土壤中栽植的幼苗,整株鮮重為0.780g/株。5.生防菌C3菌劑能在大田條件下改善患病果樹根圈土壤-生物微生態(tài)系統(tǒng),增加微生物多樣性,提高土壤酶活性及肥力,誘導(dǎo)獼猴桃果樹葉片中抗性酶活性升高,最終表現(xiàn)為獼猴桃果實(shí)品質(zhì)的提升。
【圖文】：

10 生防細(xì)菌 C3 防治獼猴桃根腐病的效果及機(jī)制研究測(cè)序（3730xl，ABI）。測(cè)序結(jié)果與 GenBank 中的序列進(jìn)行比對(duì)。2.2 結(jié)果與分析2.2.1 致病菌的分離純化與回接結(jié)果圖 2-1 為采集回來的獼猴桃根腐病病根。組織分離法分離的到了 11 種真菌，將其孢子液回接到獼猴桃枝條，葉片和根部，發(fā)現(xiàn)一株菌株與對(duì)照組有明顯差別（圖 2-2 為該菌株棉蘭染色后大型分生孢子的形態(tài)）。接種該菌株的葉片在 3d 后出現(xiàn)脫水萎蔫（圖2-3A，a），對(duì)照組沒有癥狀；接種 6d 后，枝條干枯，由切面可以看出（圖 2-3B，b），中柱組織結(jié)構(gòu)被破壞，發(fā)黑，對(duì)照組沒有此變化；接種 10d 后，獼猴桃苗根部木質(zhì)部褐色，與對(duì)照差別明顯（圖 2-2C，，c）。

10 生防細(xì)菌 C3 防治獼猴桃根腐病的效果及機(jī)制研究測(cè)序（3730xl，ABI）。測(cè)序結(jié)果與 GenBank 中的序列進(jìn)行比對(duì)。2.2 結(jié)果與分析2.2.1 致病菌的分離純化與回接結(jié)果圖 2-1 為采集回來的獼猴桃根腐病病根。組織分離法分離的到了 11 種真菌，將其孢子液回接到獼猴桃枝條，葉片和根部，發(fā)現(xiàn)一株菌株與對(duì)照組有明顯差別（圖 2-2 為該菌株棉蘭染色后大型分生孢子的形態(tài)）。接種該菌株的葉片在 3d 后出現(xiàn)脫水萎蔫（圖2-3A，a），對(duì)照組沒有癥狀；接種 6d 后，枝條干枯，由切面可以看出（圖 2-3B，b），中柱組織結(jié)構(gòu)被破壞，發(fā)黑，對(duì)照組沒有此變化；接種 10d 后，獼猴桃苗根部木質(zhì)部褐色，與對(duì)照差別明顯（圖 2-2C，c）。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S436.634.1;S476

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2629525