【摘要】：人參是五加科多年生草本植物,十分具有藥用價(jià)值。由于人參在種植過(guò)程容易遭受病原菌的侵染,因此人參根際土壤中病原菌的分離鑒定和抗病菌的篩選十分重要。本文從發(fā)病的人參植株中分離篩選出腐皮鐮刀菌和人參銹腐菌。通過(guò)對(duì)患病人參根際土壤和健康人參根際土壤的細(xì)菌、真菌群落結(jié)構(gòu)和多樣性指數(shù)分析和土壤理化測(cè)試,分析了引起人參病害的可能性因素。從人參根際土壤和野生水稻根際土壤中,分離鑒定出對(duì)人參根腐病和人參銹腐病有穩(wěn)定拮抗作用的生防菌株,并對(duì)生防菌株做了分離鑒定,并將生防菌株回接到人參莖塊上做驗(yàn)證,主要研究結(jié)果如下:從患病人參植株中篩選出了病原菌,經(jīng)ITS序列分析法鑒定為腐皮鐮刀菌和人參銹腐菌。通過(guò)對(duì)患病人參根際土壤和健康人參根際土壤的土壤理化測(cè)試,推測(cè)人參根際土壤有效鉀含量、pH值對(duì)人參生長(zhǎng)有顯著影響;有效磷含量、有機(jī)質(zhì)含量、全磷含量、全氮含量、有效氮含量、電導(dǎo)率值可能對(duì)人參生長(zhǎng)有影響;通過(guò)對(duì)患病人參根際土壤和健康人參根際土壤的的群落結(jié)構(gòu)和多樣性指數(shù)分析得出結(jié)論:患病人參根際土壤與健康人參根際土壤細(xì)菌和真菌的豐富度和Shannon多樣性指數(shù)具有顯著性差異。從人參根際土壤中篩選得到一株對(duì)人參根腐病有拮抗效果的生防菌株C10,抑菌率達(dá)83.95%,經(jīng)16S rDNA序列分析法鑒定為解淀粉芽孢桿菌,從野生稻根際土壤中分離篩得到2株對(duì)人參銹腐病有拮抗效果的生防菌株G6、A2,其中A2抑菌效果達(dá)81.54%。經(jīng)16S rDNA序列分析法鑒定G6為鏈霉菌、A2為米修鏈霉菌。在生防菌回接到人參莖塊的驗(yàn)證中,結(jié)果發(fā)現(xiàn)拮抗菌A2、G6對(duì)人參莖塊沒(méi)有明顯的破壞現(xiàn)象且都能抑制銹腐菌的生長(zhǎng),而且在一定程度上減緩了人參莖塊的腐爛,拮抗菌C10對(duì)人參莖塊沒(méi)有明顯的破壞現(xiàn)象且能抑制根腐菌的生長(zhǎng),而且在一定程度上減緩了人參莖塊的腐爛,說(shuō)明了拮抗菌A2、G6、C10具有一定的生防效果。
【圖文】：

物送到生工生物工程（上海）股份有限公司進(jìn)行測(cè)序，，通過(guò) Blast中序列進(jìn)行同源性比對(duì)，用 Mega 5.1 軟件中 Neihbor-Joinhing樹。病病原菌的篩選與鑒定腐病病原菌的篩選。腐病病原菌的鑒定。與分析腐病病原菌菌株的鑒定 銹腐病病原菌菌形態(tài)及培養(yǎng)特征菌在 PDA 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快，最適生長(zhǎng)溫度 26℃，最適 pH 為中性株氣生菌絲生長(zhǎng)茂盛，初白色，后至棕褐色，菌絲生長(zhǎng)較慢，培徑 6.2 cm,菌絲寬 4.1 cm，分生孢子梗無(wú)色，多直有分枝，多為圓。

圖 2.3 人參根腐菌菌落及孢子形態(tài)觀察Fig.2.3 Observation on Colony and Spore Morphology of Ginseng Root Rot Fungi.2 根腐病病原菌菌株的 ITS 基因序列 PCR 擴(kuò)增和電泳檢測(cè)，獲得一條約 750 bp 大小條帶。將所得 PCR 產(chǎn)物送公司測(cè)序，獲得以下序列:GGGTTTCCGAGTTAACACTCATCAACCCTGTGACATACCTAAAACGTTGCTTCGGCGGGAACACCTGTAACAACGGGCCGCCCCCGCCAGAGGACCCCTAACTCTGTTTTTATAATGTTTTTCTGAAAGCAAATAAATTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACAACCCTCAGGCCCCCGGGCCTGGCGTTGGGCAGAAGCCCCCTGTGGGCACACGCCGTCCCTCAAATACAGTGGCGGTCCCGCCGCAGCTTCGTAGTAGCTAACACCTCGCAACTGGAGAGCGGCGCGGCCATGCCGTAAAACACCCAACTTCTGGACCTCGAATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAA
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S435.675

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本文編號(hào)：2624224