本文關(guān)鍵詞：低頻低強(qiáng)度超聲對(duì)恥垢分枝桿菌細(xì)胞壁通透性影響及協(xié)同藥物增效的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的:探討不同輻照劑量的低頻低強(qiáng)度超聲(Low-frequency and Low-intensity Ultrasound,LFLIU)對(duì)恥垢分枝桿菌細(xì)胞壁通透性的影響及LFLIU協(xié)同藥物左氧氟沙星的增效作用。方法:實(shí)驗(yàn)選用頻率為42 k Hz,輻照聲強(qiáng)連續(xù)可調(diào)的(范圍為0.13-0.34 W/cm2),換能器直徑為45 mm的低頻低強(qiáng)度超聲設(shè)備。選用超聲設(shè)備的0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個(gè)聲強(qiáng)分別輻照恥垢分枝桿菌5min、20 min后用流式細(xì)胞儀測(cè)菌液的存活率,檢測(cè)該設(shè)備的超聲強(qiáng)度對(duì)恥垢分枝桿菌活力的影響。之后選用0 W/cm2、0.14 W/cm2、0.19W/cm2、0.33 W/cm2聲強(qiáng)分別輻照經(jīng)熒光染料雙醋酸酯(Fluorescein Diacetate,FDA)、碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)標(biāo)記過(guò)的恥垢分枝桿菌5 min;選用0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個(gè)聲強(qiáng)分別對(duì)經(jīng)熒光染料標(biāo)記過(guò)的恥垢分枝桿菌輻照0 min、5 min、15 min、20 min后,通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)超聲輻照前后菌體內(nèi)熒光染料FDA、PI熒光強(qiáng)度的變化;透射電鏡和掃描電鏡分別對(duì)比觀察菌體內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)和菌體表面形態(tài)在超聲輻照前后的變化。進(jìn)而選用0.14 W/cm2聲強(qiáng)輻照5 min的超聲強(qiáng)度協(xié)同藥物濃度為左氧氟沙星對(duì)恥垢分枝桿菌的最低抑菌濃度0.125μg/m L的藥物作用于恥垢分枝桿菌,檢測(cè)其死亡率與單獨(dú)LFLIU組、單獨(dú)左氧氟沙星組的差別。并使用被動(dòng)空化檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)所用超聲設(shè)備在工作聲強(qiáng)0.14 W/cm2,及實(shí)驗(yàn)條件下的空化作用進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:1.經(jīng)0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個(gè)聲強(qiáng)分別輻照恥垢分枝桿菌5 min、20 min后,實(shí)驗(yàn)組菌液的存活率與對(duì)照組的存活率無(wú)明顯差異(P0.05),即該設(shè)備在輻照劑量范圍內(nèi)不會(huì)殺滅恥垢分枝桿菌;2.經(jīng)0 W/cm2、0.14 W/cm2、0.19 W/cm2、0.33 W/cm2聲強(qiáng)超聲分別輻照5 min后,恥垢分枝桿菌體內(nèi)FDA的熒光強(qiáng)度分別為2299.95±143.07、1384.33±85.23、1051.00±106.0、970.33±58.39,即隨著超聲輻照聲強(qiáng)的增大,菌體內(nèi)FDA的熒光強(qiáng)度逐漸減弱(P0.01);經(jīng)0 W/cm2、0.14W/cm2、0.19 W/cm2、0.33 W/cm2聲強(qiáng)超聲分別輻照5 min后,恥垢分枝桿菌體內(nèi)PI的熒光強(qiáng)度分別為31.33±1.15、40.33±1.5、49.33±2.5、63.00±1.00,菌體內(nèi)PI熒光強(qiáng)度隨輻照聲強(qiáng)的增大而逐漸增強(qiáng)(P0.05);3.經(jīng)0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個(gè)聲強(qiáng)分別輻照經(jīng)熒光染料標(biāo)記過(guò)的恥垢分枝桿菌0 min、5 min、15 min、20 min后,在兩種聲強(qiáng)輻照過(guò)程中菌體內(nèi)FDA的熒光強(qiáng)度均隨輻照時(shí)間的延長(zhǎng)而減弱(P0.01),PI的熒光強(qiáng)度均隨輻照時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增強(qiáng)(P0.05)。4.透射電鏡觀察到經(jīng)超聲輻照過(guò)的恥垢分枝桿菌細(xì)胞壁有破裂,且破裂的程度隨輻照劑量的增大而增強(qiáng),菌體內(nèi)脂滴隨輻照強(qiáng)度增強(qiáng)而增多,掃描電鏡觀察到超聲輻照后的菌體外表面有凹陷,且菌體外觀形態(tài)由標(biāo)準(zhǔn)的橢球形變?yōu)橐欢舜执笠欢苏〉牟灰?guī)則形狀;5.LFLIU協(xié)同左氧氟沙星作用于恥垢分枝桿菌24 h后,其死亡率(86.77±0.72%)高于單獨(dú)LFLIU組(45.60±3.80%)和單獨(dú)左氧氟沙星組(79.98±1.97%)(P0.05);6.被動(dòng)空化檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)出所用超聲設(shè)備在0.14 W/cm2輻照過(guò)程中有明顯的次諧波產(chǎn)生,表明產(chǎn)生了空化作用。結(jié)論:一定劑量的LFLIU超聲可增加恥垢分枝桿菌細(xì)胞壁的通透性,且LFLIU協(xié)同藥物左氧氟沙星有殺菌增效作用。
【關(guān)鍵詞】：低頻低強(qiáng)度超聲 藥物 恥垢分枝桿菌 通透性 協(xié)同增效
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R454.3;R52
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-15
• 第一部分：低頻低強(qiáng)度超聲對(duì)恥垢分枝桿菌細(xì)胞壁通透性的影響15-26
• 1 材料和方法15-19
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-23
• 3 討論23-24
• 4 小結(jié)24-26
• 第二部分：低頻低強(qiáng)度超聲協(xié)同左氧氟沙星對(duì)恥垢分枝桿菌的增效作用研究26-31
• 1 材料和方法26-27
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-29
• 3 討論29-30
• 4 小結(jié)30-31
• 第三部分：低頻低強(qiáng)度超聲儀空化效應(yīng)檢測(cè)31-35
• 1 材料和方法31-33
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33
• 3 討論33-34
• 4 小結(jié)34-35
• 全文總結(jié)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 文獻(xiàn)綜述41-50
• 參考文獻(xiàn)47-50
• 致謝50-51
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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本文編號(hào)：915920