低頻低強度超聲對恥垢分枝桿菌細胞壁通透性影響及協(xié)同藥物增效的實驗研究
發(fā)布時間:2017-09-25 06:28
本文關(guān)鍵詞:低頻低強度超聲對恥垢分枝桿菌細胞壁通透性影響及協(xié)同藥物增效的實驗研究
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【摘要】:目的:探討不同輻照劑量的低頻低強度超聲(Low-frequency and Low-intensity Ultrasound,LFLIU)對恥垢分枝桿菌細胞壁通透性的影響及LFLIU協(xié)同藥物左氧氟沙星的增效作用。方法:實驗選用頻率為42 k Hz,輻照聲強連續(xù)可調(diào)的(范圍為0.13-0.34 W/cm2),換能器直徑為45 mm的低頻低強度超聲設(shè)備。選用超聲設(shè)備的0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個聲強分別輻照恥垢分枝桿菌5min、20 min后用流式細胞儀測菌液的存活率,檢測該設(shè)備的超聲強度對恥垢分枝桿菌活力的影響。之后選用0 W/cm2、0.14 W/cm2、0.19W/cm2、0.33 W/cm2聲強分別輻照經(jīng)熒光染料雙醋酸酯(Fluorescein Diacetate,FDA)、碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)標記過的恥垢分枝桿菌5 min;選用0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個聲強分別對經(jīng)熒光染料標記過的恥垢分枝桿菌輻照0 min、5 min、15 min、20 min后,通過流式細胞儀檢測超聲輻照前后菌體內(nèi)熒光染料FDA、PI熒光強度的變化;透射電鏡和掃描電鏡分別對比觀察菌體內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)和菌體表面形態(tài)在超聲輻照前后的變化。進而選用0.14 W/cm2聲強輻照5 min的超聲強度協(xié)同藥物濃度為左氧氟沙星對恥垢分枝桿菌的最低抑菌濃度0.125μg/m L的藥物作用于恥垢分枝桿菌,檢測其死亡率與單獨LFLIU組、單獨左氧氟沙星組的差別。并使用被動空化檢測系統(tǒng)對所用超聲設(shè)備在工作聲強0.14 W/cm2,及實驗條件下的空化作用進行檢測。結(jié)果:1.經(jīng)0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個聲強分別輻照恥垢分枝桿菌5 min、20 min后,實驗組菌液的存活率與對照組的存活率無明顯差異(P0.05),即該設(shè)備在輻照劑量范圍內(nèi)不會殺滅恥垢分枝桿菌;2.經(jīng)0 W/cm2、0.14 W/cm2、0.19 W/cm2、0.33 W/cm2聲強超聲分別輻照5 min后,恥垢分枝桿菌體內(nèi)FDA的熒光強度分別為2299.95±143.07、1384.33±85.23、1051.00±106.0、970.33±58.39,即隨著超聲輻照聲強的增大,菌體內(nèi)FDA的熒光強度逐漸減弱(P0.01);經(jīng)0 W/cm2、0.14W/cm2、0.19 W/cm2、0.33 W/cm2聲強超聲分別輻照5 min后,恥垢分枝桿菌體內(nèi)PI的熒光強度分別為31.33±1.15、40.33±1.5、49.33±2.5、63.00±1.00,菌體內(nèi)PI熒光強度隨輻照聲強的增大而逐漸增強(P0.05);3.經(jīng)0.14 W/cm2、0.33 W/cm2兩個聲強分別輻照經(jīng)熒光染料標記過的恥垢分枝桿菌0 min、5 min、15 min、20 min后,在兩種聲強輻照過程中菌體內(nèi)FDA的熒光強度均隨輻照時間的延長而減弱(P0.01),PI的熒光強度均隨輻照時間的延長而逐漸增強(P0.05)。4.透射電鏡觀察到經(jīng)超聲輻照過的恥垢分枝桿菌細胞壁有破裂,且破裂的程度隨輻照劑量的增大而增強,菌體內(nèi)脂滴隨輻照強度增強而增多,掃描電鏡觀察到超聲輻照后的菌體外表面有凹陷,且菌體外觀形態(tài)由標準的橢球形變?yōu)橐欢舜执笠欢苏〉牟灰?guī)則形狀;5.LFLIU協(xié)同左氧氟沙星作用于恥垢分枝桿菌24 h后,其死亡率(86.77±0.72%)高于單獨LFLIU組(45.60±3.80%)和單獨左氧氟沙星組(79.98±1.97%)(P0.05);6.被動空化檢測系統(tǒng)檢測出所用超聲設(shè)備在0.14 W/cm2輻照過程中有明顯的次諧波產(chǎn)生,表明產(chǎn)生了空化作用。結(jié)論:一定劑量的LFLIU超聲可增加恥垢分枝桿菌細胞壁的通透性,且LFLIU協(xié)同藥物左氧氟沙星有殺菌增效作用。
【關(guān)鍵詞】:低頻低強度超聲 藥物 恥垢分枝桿菌 通透性 協(xié)同增效
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R454.3;R52
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照5-6
- 中文摘要6-9
- 英文摘要9-12
- 前言12-15
- 第一部分:低頻低強度超聲對恥垢分枝桿菌細胞壁通透性的影響15-26
- 1 材料和方法15-19
- 2 實驗結(jié)果19-23
- 3 討論23-24
- 4 小結(jié)24-26
- 第二部分:低頻低強度超聲協(xié)同左氧氟沙星對恥垢分枝桿菌的增效作用研究26-31
- 1 材料和方法26-27
- 2 實驗結(jié)果27-29
- 3 討論29-30
- 4 小結(jié)30-31
- 第三部分:低頻低強度超聲儀空化效應(yīng)檢測31-35
- 1 材料和方法31-33
- 2 實驗結(jié)果33
- 3 討論33-34
- 4 小結(jié)34-35
- 全文總結(jié)35-36
- 參考文獻36-41
- 文獻綜述41-50
- 參考文獻47-50
- 致謝50-51
- 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文51
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條
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,本文編號:915920
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