本文關鍵詞：EV71感染手足口病患兒IL-21的表達及其免疫炎性反應的相關性研究

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【摘要】：目的:研究EV71感染手足口病患兒IL-21表達水平的變化,及其與炎性指標、細胞因子的相關性,為探討手足口病發(fā)病機制及機體抗病毒的免疫炎癥應答提供一定理論基礎,進一步為手足口病的臨床診斷、治療及預后判斷提供實驗室依據(jù)。方法:1、根據(jù)《(2010年版)手足口病診療指南》的診斷和分組標準,以109例EV71感染手足口病患兒及27例正常對照組兒童為研究對象,根據(jù)病情嚴重程度,將手足口病患兒分為普通組、重癥組及危重組。采集各組患兒外周血標本,分別裝于肝素抗凝管、EDTA-K2抗凝管及普通生化管,并收集性別、年齡及CRP、SAA、NEUT、LYMPH、PLT等臨床資料和實驗室檢查指標。2、流式細胞術檢測肝素抗凝血CD4+-IL-21+T細胞的百分率;熒光定量PCR檢測EDTA-K2抗凝血IL-21 m RNA的表達;ELISA檢測血清IL-21、IFN-γ的水平。3、運用化學發(fā)光免疫分析儀檢測血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10等細胞因子的水平。4、分析IL-21水平變化與炎性指標及細胞因子的相關性,探討IL-21在EV71感染手足口病患兒免疫炎性反應中的作用。結果:1、EV71感染手足口病患兒,除重癥組IL-21 m RNA表達水平與普通組比較無明顯差異外(P0.05),其余各組血清IL-21和全血CD4+-IL-21+T百分率及IL-21 m RNA表達水平均顯著高于對照組兒童(P0.01),且隨疾病的加重而升高。2、EV71感染手足口病患兒炎性指標CRP、SAA、NEUT、LYMPH、PLT、NLR、PLR與對照組比較呈升高趨勢,其中重癥組和危重組的CRP含量均顯著高于對照組和普通組(P0.01);三組患兒SAA、LYMPH、PLT水平均高于對照組(P0.05);危重組患兒NEUT、NLR、PLR顯著高于其他三組(P0.001),其余各組間比較無顯著差異(P0.05)。3、EV71感染手足口病患兒血清細胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的水平變化也隨疾病的加重而升高,各組患兒的IFN-γ、TNF-α、IL-10水平均顯著高于對照組(P0.01);與對照組兒童血清IL-6、IL-8水平相比,除普通組無明顯差異外(P0.05),重癥組和危重組均顯著升高(P0.001)。4、EV71感染手足口病患兒IL-21水平與各炎性指標和細胞因子的相關性分析,發(fā)現(xiàn)IL-21的水平變化與炎性因子CRP(r=0.32,P0.001)、PLT(r=0.25,P0.05)、IFN-γ(r=0.54,P0.001)、TNF-α(r=0.36,P0.001)、IL-6(r=0.30,P0.01)、IL-8(r=0.33,P0.001)水平呈正相關,而與抗炎因子IL-10(r=-0.23,P0.05)水平變化呈負相關。與SAA、NEUT、LYMPH、NLR、PLR等炎性指標的變化無明顯相關性(P0.05)。結論:本研究表明IL-21可能作為一種新型炎性細胞因子,參與EV71感染激發(fā)的全身免疫炎癥反應,與手足口病患兒病情發(fā)生發(fā)展密切相關。
【關鍵詞】：EV71 手足口病 白介素21 細胞因子 相關性
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R725.1;R446.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料和方法12-23
• 2.1 主要材料12-15
• 2.1.1 儀器設備及耗材12-13
• 2.1.2 主要試劑13-14
• 2.1.3 主要自配試劑14-15
• 2.2 方法15-23
• 2.2.1 研究對象及標本采集15
• 2.2.2 流式細胞術檢測淋巴細胞IL-21的表達15-16
• 2.2.3 全血標本總RNA的提取16-17
• 2.2.4 mRNA逆轉錄為cDNA17-18
• 2.2.5 熒光定量PCR檢測IL-21 mRNA的表達18-19
• 2.2.6 ELISA法檢測血清IL-21和IFN-γ 水平19-21
• 2.2.7 炎性指標CRP、SAA、NEUT、LYMPH、PLT的檢測21
• 2.2.8 細胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10的檢測21-22
• 2.2.9 統(tǒng)計學處理22-23
• 第3章 結果23-32
• 3.1 病例基本資料23
• 3.2 流式細胞術檢測淋巴細胞IL-21的表達23-24
• 3.3 熒光定量PCR檢測IL-21mRNA的表達24-26
• 3.4 ELISA檢測血清IL-21的水平26-27
• 3.5 EV71感染患兒炎性指標的變化27-29
• 3.6 EV71感染患兒細胞因子的變化29-30
• 3.7 IL-21與炎性指標及細胞因子的相關性30-32
• 第4章 討論32-35
• 第5章 結論與展望35-36
• 5.1 結論35
• 5.2 展望35-36
• 致謝36-37
• 參考文獻37-41
• 攻讀學位期間的研究成果41-42
• 綜述 IL-21在病毒感染性疾病中的免疫調節(jié)效應的研究進展42-50
• 參考文獻48-50

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