本文關(guān)鍵詞：廣泛耐藥鮑曼不動桿菌ST238克隆株毒力及適應(yīng)性研究

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【摘要】：研究背景:近年來,鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii,AB)由于迅速發(fā)展的耐藥能力已成為世界廣泛關(guān)注的醫(yī)院感染病原菌。臨床上多重耐藥及泛耐藥菌株的出現(xiàn)使其治療面臨無藥可選的境地。在過去的10年間,我院細(xì)菌監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示,AB的臨床分離率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢。至2009年AB占我院當(dāng)年細(xì)菌感染的17.9%,成為非發(fā)酵菌第一位致病菌。2010年AB超過大腸埃希菌,成為導(dǎo)致院內(nèi)感染的第一位病原菌,其在革蘭陰性菌中比例高達(dá)24.6%。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)我院存在廣泛耐藥鮑曼不動桿菌(Extensively drug-resistant Acinetobacter baumannii,XDRAB)A、B、C三個(gè)克隆的流行。多位點(diǎn)測序(Multilocus sequencing typing,MLST)分析發(fā)現(xiàn),B克隆與C克隆均為ST238型,而A克隆與其相比僅有一個(gè)管家基因(gpi)的差異,也屬于ST238型。ST238克隆株與全球流行的CC92群有較高同源性,但與中國報(bào)道的主要克隆株ST22、ST381、ST208和ST92不同。各個(gè)國家和地區(qū)均未見有關(guān)ST238克隆株暴發(fā)流行的報(bào)道,僅巴西曾在PubMLST注冊過一例ST238克隆株,但沒有相關(guān)文獻(xiàn)。我院流行的ST238克隆株僅對多粘菌素和替加環(huán)素敏感,國內(nèi)外尚無有關(guān)ST238克隆株毒力和適應(yīng)性的研究報(bào)道。既往研究認(rèn)為抗菌藥物的選擇壓力及克隆傳播可能是st238克隆株在我院長期存在的主要原因,但近年來我院加強(qiáng)對抗菌藥物使用的管理,各類抗生素的使用量(尤其是碳青霉烯類)較2009年均有明顯下降,然而我院xdrab的分離率仍然呈現(xiàn)逐年上升趨勢,其中以st238克隆株為主。因此,研究xdrabst238克隆株的毒力及環(huán)境適應(yīng)性,對發(fā)現(xiàn)其持續(xù)流行原因以及了解其流行性與致病性的相關(guān)性具有重要意義。研究該細(xì)菌的毒力及生存適應(yīng)性也可以為控制其醫(yī)院感染提供指導(dǎo)。研究該細(xì)菌的致病性有助于建立快速準(zhǔn)確的診斷方法,以此來區(qū)分其定植和感染。在抗菌藥物可能失效的情況下,研究其致病性對設(shè)計(jì)新的抗菌藥物的治療靶點(diǎn)也有參考作用。目的:通過檢測廣泛耐藥鮑曼不動桿菌流行克隆st238的毒力和環(huán)境適應(yīng)性,探討該克隆株在本地區(qū)持續(xù)流行的原因。方法:第一部分:比較st238克隆株與鮑曼不動桿菌atcc19606的體外生長曲線及競爭指數(shù)(competitionindex,ci)。第二部分:試管法測定菌株內(nèi)明膠酶活性;微量法進(jìn)行d-甘露糖抵抗紅細(xì)胞凝集試驗(yàn);運(yùn)動平板法測定蹭行運(yùn)動能力;結(jié)晶紫染色法定量分析生物被膜形成能力。第三部分:小鼠腹膜炎模型檢測菌株的體內(nèi)致病能力。結(jié)果:第一部分:st238克隆株與標(biāo)準(zhǔn)株間體外生長能力無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。培養(yǎng)24h時(shí),st238克隆株與atcc19606的體外競爭能力無明顯差異(ci=0.29,p0.05)。第二部分:僅有1株st238克隆株檢測到明膠酶活性,明膠酶活性在ST238克隆株與敏感株間無分布差異(?2=0.216,P0.05)。D-甘露糖可使ST238克隆株和敏感株的O型及AB型紅細(xì)胞凝集陽性率升高,但血凝結(jié)果與菌株來源之間無顯著性差異(?2=0.659,P0.05),提示AB的菌毛多屬于甘露糖抵抗型。98株臨床分離的ST238克隆株蹭行運(yùn)動能力均為陰性,而在21株隨機(jī)選取的敏感株中有33.3%的菌株蹭行運(yùn)動監(jiān)測為陽性,提示敏感株的運(yùn)動能力強(qiáng)于ST238克隆株(?2=74.044,P0.001)。敏感組生物被膜形成能力強(qiáng)于ST238克隆組(P0.05)。第三部分:ST238克隆株與標(biāo)準(zhǔn)株的LD50分別為6.9和6.7 log CFUs/mL。接種9.3 log CFUs/mL菌液的小鼠平均死亡時(shí)間無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:ST238克隆株獲得廣泛耐藥性后,其環(huán)境適應(yīng)性無明顯下降,同時(shí)該克隆株的毒力也無明顯改變。這種特點(diǎn)與一般耐藥細(xì)菌不同,該流行克隆具有廣泛耐藥的特征,同時(shí)也具有較強(qiáng)的毒力和環(huán)境適應(yīng)性。這種生物學(xué)特性可能是該克隆株在本地區(qū)長期流行的原因之一。
【關(guān)鍵詞】：廣泛耐藥鮑曼不動桿菌 ST238克隆株 適應(yīng)性 毒力
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 鮑曼不動桿菌ST238克隆體外生長能力分析13-19
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-15
• 3 結(jié)果15-17
• 4 討論17-19
• 第二部分 體外毒力試驗(yàn)19-27
• 1 實(shí)驗(yàn)材料19-20
• 2 實(shí)驗(yàn)方法20-23
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-24
• 4 討論24-27
• 第三部分 體內(nèi)動物試驗(yàn)27-34
• 1 實(shí)驗(yàn)材料27-28
• 2 實(shí)驗(yàn)方法28-30
• 3 結(jié)果30-32
• 4 討論32-34
• 全文總結(jié)34-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 文獻(xiàn)綜述39-51
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文52

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本文編號：764621