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間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用初步研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-23 15:12

  本文關(guān)鍵詞:間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:第一章骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定目的:通過全骨髓貼壁培養(yǎng)法分離、培養(yǎng)、純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,培養(yǎng)出足量的P3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及其培養(yǎng)上清液來滿足實(shí)驗(yàn)需要。初步了解在3種儲(chǔ)存溫度下間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)變化。方法:脫頸處死60-80g清潔級(jí)SD大鼠,分離其雙側(cè)股骨、脛骨。超凈臺(tái)中沖洗骨髓腔。骨髓沖洗液離心棄上清后,使用大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞完全培養(yǎng)基在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。倒置顯微鏡觀察其生長情況,傳代至P3代時(shí)用流式細(xì)胞儀鑒定。使用Countstar細(xì)胞計(jì)數(shù)儀觀察間充質(zhì)干細(xì)胞在37℃、25℃、4℃儲(chǔ)存情況下細(xì)胞數(shù)變化。結(jié)果:流式細(xì)胞儀證實(shí)為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,鏡下其生長狀況良好。間充質(zhì)干細(xì)胞在37℃、25℃、4℃儲(chǔ)存情況下短時(shí)間內(nèi)細(xì)胞數(shù)未見明顯下降。結(jié)論:全骨髓貼壁法可分離出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,其純度可滿足實(shí)驗(yàn)要求。第二章間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用目的:研究間充質(zhì)干細(xì)胞及其培養(yǎng)上清液對(duì)膿毒癥大鼠心肌的保護(hù)作用機(jī)制。方法:55只清潔級(jí)雄性SD大鼠,按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、膿毒癥組、間充質(zhì)干細(xì)胞組和間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液組。除假手術(shù)組外各組均采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)膿毒癥模型。術(shù)后假手術(shù)組和膿毒癥組尾靜脈注射0.5m10.9%生理鹽水,間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液組尾靜脈注射收集的P3代大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液0.5ml,間充質(zhì)干細(xì)胞組尾靜脈注射重懸十0.5m10.9%生理鹽水的2×106個(gè)P3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。各組均在手術(shù)24h后心臟采血,雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)’TNF-α,IL-10, Tn-T。心臟置于4%多聚甲醛液體中48-72h,常規(guī)石蠟包埋,HE染色。結(jié)果:TNF-α值:間充質(zhì)干細(xì)胞組、上清液組TNF-α水平較膿毒癥組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。IL-10值:間充質(zhì)干細(xì)胞組IL-10水、平較膿毒癥組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);膿毒癥組與上清液組及假手術(shù)組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Tn-T值:間充質(zhì)干細(xì)胞組、上清液組Tn-T水平較膿毒癥組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);間充質(zhì)干細(xì)胞組與上清液組及假于術(shù)組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:間充質(zhì)干細(xì)胞及其培養(yǎng)上清液對(duì)膿毒癥大鼠心肌損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)實(shí)現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】:間充質(zhì)干細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液 膿毒癥 炎癥介質(zhì)
【學(xué)位授予單位】:福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R459.7
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • Abstract7-9
  • 前言9-11
  • 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定11-19
  • 1. 材料與儀器11
  • 2. 方法11-13
  • 3. 結(jié)果13-18
  • 4. 結(jié)論18-19
  • 間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用19-28
  • 1. 引言19
  • 2. 材料與儀器19-20
  • 3. 方法20-22
  • 4. 結(jié)果22-26
  • 5. 討論26-27
  • 6. 結(jié)論27-28
  • 參考文獻(xiàn)28-31
  • 致謝31-32
  • 附錄32-35
  • 文獻(xiàn)綜述35-45
  • 參考文獻(xiàn)41-45
  • 作者簡歷45

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