HMGB1在失血性休克腸淋巴液致小鼠肺損傷中的作用
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【摘要】:目的:高遷移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)在多種致病因素引起急性肺損傷(acute lung injury,ALI)的發(fā)展過(guò)程中具有重要作用;失血性休克后腸淋巴液(post-hemorahgic shock mesenteric lymph,PHSML)回流是失血性休克引起ALI的一個(gè)重要發(fā)病機(jī)制,阻斷PHSML回流可減輕ALI,相關(guān)機(jī)制需要進(jìn)一步研究。本研究建立失血性休克小鼠模型,觀察PHSML引流對(duì)失血性休克小鼠肺HMGB1、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation end products,RAGE)mRNA表達(dá)與蛋白含量的影響;比較PHSML與正常腸淋巴液(normal mesenteric lymph,NML)中HMGB1與RAGE的蛋白含量;將引流至體外的PHSML靜脈輸入正常小鼠,觀察對(duì)肺組織HMGB1與RAGE含量的影響;明確HMGB1、RAGE在PHSML引起ALI中的作用。方法:健康、雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)均分為:假手術(shù)組、休克組、休克+引流組(n=6)。休克組、休克+引流組小鼠按我室常規(guī)方法復(fù)制失血性休克模型,維持低血壓40±2 mm Hg 90 min后,經(jīng)股動(dòng)脈行液體復(fù)蘇(放出的全血加等量林格氏液),30 min完成;觀察至輸液結(jié)束后3h。休克+引流組在輸液結(jié)束后,按常規(guī)方法引流腸淋巴液至3h。假手術(shù)組行相同的手術(shù)操作,但不放血、不輸液。各組小鼠在輸液結(jié)束后3h或相當(dāng)時(shí)間點(diǎn),留取固定位置的肺組織;部分組織用于提取RNA,應(yīng)用q RT-PCR方法檢測(cè)HMGB1、RAGE mRNA表達(dá);部分組織用于制備組織勻漿,應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)肺組織HMGB1、RAGE含量。取18只健康、雄性C57BL/6J小鼠,常規(guī)方法麻醉后,引流NML,持續(xù)1h;取6只小鼠,建立失血性休克模型,留取液體復(fù)蘇后0~3 h的PHSML。應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)淋巴液中HMGB1、RAGE含量。將NML、PHSML分別輸入正常雄性C57BL/6J小鼠以及HMGB1抑制劑甘草酸(glycyrrhizin,GL)預(yù)處理的小鼠,均n=6;3h后留取肺組織,ELISA方法檢測(cè)肺組織HMGB1、RAGE含量。結(jié)果:休克組小鼠肺組織HMGB1、RAGE mRNA表達(dá)及其含量均顯著高于假手術(shù)組(P0.05);休克+腸淋巴液引流組小鼠肺組織HMGB1、RAGE mRNA表達(dá)及其含量均顯著低于休克組(P0.05)。休克腸淋巴液中HMGB1、RAGE水平與正常腸淋巴液均未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PHSML靜脈輸入增高正常小鼠肺組織HMGB1水平(P0.05),該作用被GL處理消除(P0.05);各組小鼠肺組織RAGE水平的變化與HMGB1一致,但未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:HMGB1在PHSML休克引起肺損傷的過(guò)程中具有一定的作用,且與RAGE相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:失血性休克 急性肺損傷 腸淋巴液 引流術(shù) 高遷移率族蛋白1 晚期糖基化終末產(chǎn)物受體 小鼠
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R459.7;R563
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-8
- 英文縮寫8-10
- 前言10-13
- 材料與方法13-18
- 結(jié)果18-19
- 附圖19-23
- 附表23-25
- 討論25-27
- 結(jié)論27-28
- 參考文獻(xiàn)28-34
- 綜述 HMGB1在急性肺損傷發(fā)病機(jī)制中的作用34-45
- 參考文獻(xiàn)40-45
- 致謝45-46
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷46-47
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):456308
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