本文關(guān)鍵詞：低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌的協(xié)同增效作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目前臨床上診斷和治療生物膜造成的感染是一個很棘手的問題。在歐洲臨床微生物學(xué)和傳染病學(xué)會2014年年會上發(fā)布了生物膜感染診斷和治療指南,提出超聲聯(lián)合抗生素是一種可能有效治療生物膜感染的方法,亟待進(jìn)行深入研究。為此,本文研究了低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌生物膜及其懸浮菌的生物學(xué)效應(yīng)和作用機(jī)制。目的探討低頻低強度超聲(Low-frequency and Low-intensity Ultrasound, LFLIU)聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌生物膜活性、形態(tài)學(xué)以及對生物膜抗生素滲透性的影響。探討低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌懸浮菌活性、形態(tài)學(xué)的影響。方法1.低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素類藥物對ESBLs大腸桿菌生物膜的生物學(xué)效應(yīng)的研究將72小時培養(yǎng)出來的生物膜分組,分為對照組(C)、妥布霉素組(T組)、慶大霉素組(Q組)、低頻低強度超聲組(U組)、低頻低強度超聲聯(lián)合妥布霉素組(U+T組)、低頻低強度超聲聯(lián)合慶大霉素組(U+Q),每組3個樣本(n=3),藥物濃度均為200 μg/mL。將超聲探頭末端涂抹偶合劑,緊貼于6孔板下端輻照,超聲頻率為42 kHz,強度為0.66 W/cm2,輻照時間為30 min,采取連續(xù)超聲進(jìn)行輻照。測量實驗前后各組的活性,用掃描電鏡、激光共聚焦顯微鏡觀察生物膜大體形態(tài)改變,建立“三明治”模型,檢測各組生物膜對環(huán)丙沙星滲透性的大小。2.低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素類藥物對ESBLs大腸桿菌懸浮菌的生物學(xué)效應(yīng)研究將處于對數(shù)期的懸浮菌分組,同前,每組3個樣本(n=3),其中藥物濃度為20 μg/mL。在37℃恒溫水浴中,用42 kHz,強度為0.66W/cm2,輻照時間為0.5 h、1 h、1.5 h,采用連續(xù)超聲進(jìn)行輻照。實驗前后測量每組細(xì)菌活性、通透性的改變,用透射電鏡觀察細(xì)菌大體形態(tài)。結(jié)果1.生物膜經(jīng)實驗處理后,活性出現(xiàn)了明顯的下降,其中超聲聯(lián)合慶大霉素組與超聲聯(lián)合妥布霉素組分別從(9.200±0.022)log10CFU/cm2下降到了(5.240±0.007)log10CFU/cm2、(3.500±0.020)log10CFU/cm2。掃描電鏡觀察到了生物膜大體形態(tài)改變,并且生物膜內(nèi)大腸桿菌有損傷。激光共聚焦結(jié)果分析顯示,生物膜外層細(xì)菌活性改變最大,中間層細(xì)菌活性改變最小。低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素能明顯增強生物膜對環(huán)丙沙星的滲透性。2.細(xì)菌生存率隨低頻低強度超聲輻照時間延長出現(xiàn)顯著下降,其中超聲聯(lián)合妥布霉素組生存率下降達(dá)(97.73±0.12)%。超聲輻照細(xì)菌后,透射電鏡顯示低頻低強度超聲能夠影響菌體結(jié)構(gòu),從而改變細(xì)菌外膜的通透性。PI熒光強度檢測表明細(xì)菌死亡率與細(xì)菌外膜通透性率成正相關(guān)。結(jié)論1.低頻低強度超聲可以清除ESBLs大腸桿菌生物膜,并且對生物膜內(nèi)細(xì)菌造成損傷,同時可以提高生物膜對抗生素的滲透性。低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素除了產(chǎn)生以上效應(yīng)外,根據(jù)對不同藥物的敏感性,還可以產(chǎn)生不同的聯(lián)合殺菌效應(yīng)。這個發(fā)現(xiàn)對體外清除ESBLs大腸桿菌生物膜提供了一種可能的有效方法。2.低頻低強度超聲能夠改變ESBLs大腸桿菌細(xì)胞外膜的通透性。低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌的殺菌作用增效顯著。這為體外應(yīng)用低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素治療ESBLs大腸桿菌生物膜感染提供了安全依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：低頻低強度超聲 ESBLs大腸桿菌 抗生素 協(xié)同殺菌 生物膜
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-16
• 第一部分 低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌生物膜的生物學(xué)效應(yīng)的研究16-23
• 1 資料與方法17-19
• 2 實驗結(jié)果19-21
• 3 討論21-22
• 4 小結(jié)22-23
• 第二部分 低頻低強度超聲聯(lián)合抗生素對ESBLs大腸桿菌懸浮菌的協(xié)同增效作用研究23-29
• 1 材料與方法23-25
• 2 實驗結(jié)果25-26
• 3 討論26-27
• 4 小結(jié)27-29
• 全文總結(jié)29-30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 附圖34-43
• 文獻(xiàn)綜述43-49
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 致謝49-50
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章50

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1 陳柏?zé)?楊陽;王欣;饒偉;劉靜;;低頻低強度超聲混合碳納米管抑制小鼠EMT-6乳腺腫瘤生長研究[J];科技導(dǎo)報;2009年07期

2 馬燕;陳寶安;吳巍;姜藻;錢夢，

本文編號：444460