本文關(guān)鍵詞：LAMP技術(shù)快速診斷布魯氏菌病的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：旨在應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)對(duì)布魯氏菌進(jìn)行研究。針對(duì)布魯氏菌保守基因16S r DNA設(shè)計(jì)LAMP引物,通過濁度法對(duì)LAMP反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,應(yīng)用建立好的LAMP反應(yīng)條件進(jìn)行特異性及靈敏性試驗(yàn)。結(jié)果顯示:(1)優(yōu)化后的反應(yīng)條件是62℃恒溫60 min,內(nèi)引物1.50μmol/μL、外引物0.20μmol/μL、環(huán)引物1.0μmol/μL。(2)該LAMP方法與3株布魯氏菌均發(fā)生了擴(kuò)增反應(yīng),達(dá)到陽(yáng)性濁度值,而與小腸耶爾森(ATCC9510)、大腸桿菌(ATCC25922)、沙門氏菌(ATCC10708)和金黃色葡萄球菌(ACTT33591)等標(biāo)準(zhǔn)菌株沒有擴(kuò)增反應(yīng)。(3)濁度法和實(shí)時(shí)熒光法兩種方法的檢測(cè)最低限分別為4.36 fg/μL和436 fg/μL,其靈敏度均高于普通PCR的最低檢出值4.36 pg/μL。LAMP檢測(cè)技術(shù)用于布病臨床診斷具有快速、高效、便捷等特點(diǎn),對(duì)于基層布病的病原學(xué)診斷具有實(shí)用價(jià)值。
【作者單位】： 大連工業(yè)大學(xué);遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】： 布魯氏菌 S rDNA 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)
【基金】：國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局科研項(xiàng)目(2014IK248)
【分類號(hào)】：R516.7;R440
【正文快照】： 布魯氏菌病(Brucellosis)簡(jiǎn)稱布病,是由布魯氏菌侵入機(jī)體所引起的一種人畜共患傳染病,人患病途徑一般為接觸已經(jīng)感染的動(dòng)物或者食物,已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)乙類法定報(bào)告?zhèn)魅静1,2]。布魯氏菌屬于革蘭氏陰性兼性胞內(nèi)寄生菌,可以引起動(dòng)物流產(chǎn)、不孕和人的勞動(dòng)力喪失[3-5]。近年來(lái),布病在

【相似文獻(xiàn)】

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1 占利;葉菊蓮;羅蕓;程蘇云;梅玲玲;楊婷婷;;LAMP技術(shù)快速檢測(cè)產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌的LTⅠ毒素[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2009年11期

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王羽;LAMP技術(shù)檢測(cè)肉及肉制品中沙門氏菌的研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：406310