本文關(guān)鍵詞：LAMP技術(shù)快速診斷布魯氏菌病的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：旨在應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)對布魯氏菌進行研究。針對布魯氏菌保守基因16S r DNA設(shè)計LAMP引物,通過濁度法對LAMP反應(yīng)條件進行優(yōu)化,應(yīng)用建立好的LAMP反應(yīng)條件進行特異性及靈敏性試驗。結(jié)果顯示:(1)優(yōu)化后的反應(yīng)條件是62℃恒溫60 min,內(nèi)引物1.50μmol/μL、外引物0.20μmol/μL、環(huán)引物1.0μmol/μL。(2)該LAMP方法與3株布魯氏菌均發(fā)生了擴增反應(yīng),達到陽性濁度值,而與小腸耶爾森(ATCC9510)、大腸桿菌(ATCC25922)、沙門氏菌(ATCC10708)和金黃色葡萄球菌(ACTT33591)等標準菌株沒有擴增反應(yīng)。(3)濁度法和實時熒光法兩種方法的檢測最低限分別為4.36 fg/μL和436 fg/μL,其靈敏度均高于普通PCR的最低檢出值4.36 pg/μL。LAMP檢測技術(shù)用于布病臨床診斷具有快速、高效、便捷等特點,對于基層布病的病原學(xué)診斷具有實用價值。
【作者單位】： 大連工業(yè)大學(xué);遼寧出入境檢驗檢疫局;
【關(guān)鍵詞】： 布魯氏菌 S rDNA 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)(LAMP)
【基金】：國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局科研項目(2014IK248)
【分類號】：R516.7;R440
【正文快照】： 布魯氏菌病(Brucellosis)簡稱布病,是由布魯氏菌侵入機體所引起的一種人畜共患傳染病,人患病途徑一般為接觸已經(jīng)感染的動物或者食物,已經(jīng)成為國內(nèi)乙類法定報告?zhèn)魅静1,2]。布魯氏菌屬于革蘭氏陰性兼性胞內(nèi)寄生菌,可以引起動物流產(chǎn)、不孕和人的勞動力喪失[3-5]。近年來,布病在

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1 占利;葉菊蓮;羅蕓;程蘇云;梅玲玲;楊婷婷;;LAMP技術(shù)快速檢測產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌的LTⅠ毒素[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2009年11期

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本文編號：406310