背景:結(jié)核病(Tuberculosis,TB)的流行性傳播嚴(yán)重危害了公共的衛(wèi)生安全,特別是在TB高發(fā)和衛(wèi)生資源貧乏的國(guó)家和地區(qū)。由于缺乏快速、準(zhǔn)確的TB檢測(cè)方法,不能及時(shí)對(duì)早期TB進(jìn)行診斷治療,這加劇了疫情的傳播,并可能引發(fā)多藥耐藥菌株,從而延緩了控制TB流行的步伐。因此,迫切需要研發(fā)高靈敏、快速的TB診斷方法。在我們的前期研究中,發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的人型結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分子靶標(biāo)——mts90,而目前關(guān)于mts90的檢測(cè)方法存在靈敏度不夠高,檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)和依賴昂貴的專(zhuān)門(mén)設(shè)備等問(wèn)題。因此,有必要建立一種能高靈敏、快速檢測(cè)mts90的方法。目的:建立一種MTB新靶標(biāo)mts90的高靈敏、快速檢測(cè)方法,該方法易于操作和不依賴昂貴儀器設(shè)備。并用該方法檢測(cè)疑似TB的臨床樣本,探討其對(duì)TB的診斷效能。方法:重組聚合酶擴(kuò)增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)是一種成本低、簡(jiǎn)單、快速的核酸擴(kuò)增技術(shù)。因此,本課題以RPA技術(shù)為基礎(chǔ)對(duì)mts90進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。我們采用不同的方法篩選RPA擴(kuò)增mts90靶標(biāo)的最優(yōu)...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1.1RPA擴(kuò)增和探針檢測(cè)mts90的原理圖

圖1.1RPA擴(kuò)增和探針檢測(cè)mts90的原理圖Figure1.1SchematicillustrationofRPAperformedontheamplificationanddetectionofmts90.2.2引物和檢測(cè)探針的篩選高靈敏、....

圖1.2通過(guò)電泳分析和熒光染料實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)篩選引物Figure1.2.Screeningforprimersbyelectrophoresisandfluorescentdye

圖1.2通過(guò)電泳分析和熒光染料實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)篩選引物Figure1.2.Screeningforprimersbyelectrophoresisandfluorescentdye圖1.3探針的二級(jí)結(jié)構(gòu)（A：P1，B：P2）

圖1.3探針的二級(jí)結(jié)構(gòu)（A：P1，B：P2）

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圖1.4用探針篩選引物和通過(guò)電泳分析比較不同方法篩選的引物對(duì)Figure1.4.Screeningofprimerpairswithprobeandverifytheprimerschosenfromdifferent

圖1.4用探針篩選引物和通過(guò)電泳分析比較不同方法篩選的引物對(duì)Figure1.4.ScreeningofprimerpairswithprobeandverifytheprimerschosenfromdifferentmethodsbyGel.....

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