化學(xué)發(fā)光成像由于暗場(chǎng)測(cè)量的優(yōu)勢(shì),使其公認(rèn)為靈敏度最高的非侵入式成像技術(shù)之一,在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和藥物研發(fā)等研究領(lǐng)域中顯現(xiàn)出極高的學(xué)術(shù)研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。當(dāng)前以活體動(dòng)物為對(duì)象的化學(xué)發(fā)光成像研究,全部集中在對(duì)體內(nèi)活性氧的直接檢測(cè)和與活性氧代謝調(diào)節(jié)相關(guān)的大分子檢測(cè),而直接針對(duì)蛋白、核酸等大分子,尤其是疾病標(biāo)志物的檢測(cè)尚無相關(guān)報(bào)道。一方面是醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究亟需高靈敏的活體研究方法;另一方面是化學(xué)發(fā)光成像受檢測(cè)對(duì)象所限,無法滿足以上需求。超越活性氧,實(shí)現(xiàn)對(duì)活體中蛋白標(biāo)志物的靶向性成像檢測(cè),意義重大,也極具挑戰(zhàn)性。本實(shí)驗(yàn)室在前期的化學(xué)發(fā)光成像研究工作中,研究制備了高效率的化學(xué)發(fā)光探針5,6-二甲酰肼熒光素。小動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,該探針能夠?qū)w內(nèi)辣根過氧化物酶(HRP)富集區(qū)域?qū)崿F(xiàn)成像定位和檢測(cè)。據(jù)此,我們?cè)O(shè)計(jì)了一種成像檢測(cè)蛋白標(biāo)志物的新思路,即利用目標(biāo)蛋白抗體實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白的靶向識(shí)別,通過成像檢測(cè)抗體標(biāo)記的HRP,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白標(biāo)志物的定位和水平檢測(cè)。如能實(shí)現(xiàn)以上思路,有望為活體病理、藥理以及疾病診斷提供一種全新的視角和創(chuàng)新技術(shù)平臺(tái)。根據(jù)上述研究思路,本論文首先從蛋白標(biāo)志物入手,實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤標(biāo)志物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)...

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１：?５，６－二甲酰胼熒光素細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果??

ＭＴＴ為染色劑，用酶標(biāo)儀測(cè)定５７０?ｎｍ波長(zhǎng)下各孔的吸光度值，以如下公??式：細(xì)胞活度（％）?＝?（Ａ＾－Ａｍ）?／?（Ａ＿－ＡＷ｜）?Ｘ１００，將吸光度值換算為細(xì)胞??活度，所得結(jié)果如圖２－１所示：??１２０－．??１１１１１１１??０．０?０．５?１．０?１．５?２．０?２．....

圖2-2VEf3F靶向化學(xué)發(fā)光成像結(jié)果

陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文??由圖中可以看出，細(xì)胞活度均大于８０％，且隨著５，６－二甲酰肼熒光素濃度的增??大，細(xì)胞活度并沒有明顯的下降趨勢(shì)，因此，可以認(rèn)為，５，６－二甲酰胼熒光素對(duì)細(xì)??胞無毒性，可用于活體內(nèi)生命過程的探究。??２．３．２興趣蛋白的活體成像研究??⑴ＶＥＧＦ的靶向....

圖2-3VEGF靶向成像信號(hào)與時(shí)間變化關(guān)系(取組內(nèi)均值作圖)

陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文??由圖中可以看出，細(xì)胞活度均大于８０％，且隨著５，６－二甲酰肼熒光素濃度的增??大，細(xì)胞活度并沒有明顯的下降趨勢(shì)，因此，可以認(rèn)為，５，６－二甲酰胼熒光素對(duì)細(xì)??胞無毒性，可用于活體內(nèi)生命過程的探究。??２．３．２興趣蛋白的活體成像研究??⑴ＶＥＧＦ的靶向....

圖２－４?ＡＦＰ靶向化學(xué)發(fā)光成像結(jié)果??２３??

第２章興趣蛋白的活體成像研究??由圖２－２的成像結(jié)果可知，在ＶＥＧＦ標(biāo)準(zhǔn)品注射之前，四肢的信號(hào)強(qiáng)度基本持??平；分別注射蛋白之后，僅有靶標(biāo)區(qū)域即ＶＥＧＦ所在區(qū)域出現(xiàn)明顯的發(fā)光信號(hào)，??而干擾蛋白ＡＦＰ標(biāo)準(zhǔn)品和ＢＳＡ所在區(qū)域發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度與未注射時(shí)基本相同，即發(fā)??光信號(hào)是由于抗ＶＥ....

本文編號(hào)：3917714