本文關(guān)鍵詞：TRPV1在LPS引起的大鼠發(fā)熱伴疼痛或痛覺過敏中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的采用LPS誘導(dǎo)大鼠發(fā)熱模型,結(jié)合側(cè)腦室給予瞬時(shí)感受器電位TRPV1受體阻斷劑辣椒平,觀察大鼠體溫及痛覺潛伏期的變化,以及POA和DRG部位TRPV1相對表達(dá)量的變化情況。初步研究TRPV1受體是否參與LPS引起的大鼠發(fā)熱伴疼痛或痛覺過敏的產(chǎn)生和可能的作用途徑。方法實(shí)驗(yàn)采用SPF級(jí)健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為4組,每組8只。(1)Control組:側(cè)腦室注射溶劑5μl,30min后腹腔注射生理鹽水1ml/kg;(2)LPS組:側(cè)腦室注射溶劑5μl,30min后腹腔注射LPS1ml/kg(20ug/ml);(3)辣椒平組(Capsazepine,CPZ):側(cè)腦室注射Capsazepine5μl(1g/L),30min后腹腔注射生理鹽水1ml/kg;(4)CPZ+LPS組:側(cè)腦室注射Capsazepine5μl,30min后腹腔注射LPS1ml/kg。利用數(shù)字測溫儀測量大鼠肛溫并用足底測痛儀測定大鼠痛覺潛伏期,測定基礎(chǔ)指標(biāo)后按照分組情況給予大鼠相應(yīng)溶劑或藥物,實(shí)驗(yàn)過程中每30min測量一次體溫和痛覺潛伏期至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。每組取4只大鼠,給藥后6h用10%水合氯醛麻醉處死,無菌操作下快速取出POA和L3-L5段DRG并行RT-q PCR分析大鼠TRPV1受體相對表達(dá)量。運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和Graph Pad Prism5軟件作圖,其中,所有數(shù)據(jù)采用mean±SEM表示,各組大鼠體溫和痛覺潛伏期變化采用重復(fù)測量方差分析方法,不同時(shí)間點(diǎn)各組大鼠體溫和痛覺潛伏期變化差異采用雙因素設(shè)計(jì)方差分析,RT-q PCR結(jié)果采用單因素設(shè)計(jì)方差分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果一、體溫和痛覺潛伏期變化結(jié)果(一)體溫變化1.Control組:整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,大鼠體溫?zé)o明顯變化,基本維持在37℃-38℃之間。2.LPS組:側(cè)腦室注射溶劑,腹腔注射LPS(20ug/kg)后0.5h,大鼠體溫開始上升,并且升溫過程呈現(xiàn)出明顯的雙相熱,其中,第一個(gè)發(fā)熱高峰出現(xiàn)在2h處,體溫為38.45±0.059℃;第二個(gè)發(fā)熱高峰出現(xiàn)在4.5h處,體溫為38.71±0.051℃,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束,體溫漸降至基礎(chǔ)體溫(37.29±0.11℃)左右。相比Control組,該組大鼠體溫明顯升高(P0.05)。3.CPZ組:大鼠體溫?zé)o明顯變化,基本維持在37℃-38℃之間。相比Control組,該組大鼠體溫?zé)o明顯變化。4.CPZ+LPS組:腹腔注射LPS后1.5h,該組大鼠體溫明顯上升,由注射前37.57±0.11℃最高升至39.66±0.1℃,持續(xù)時(shí)間較長,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束體溫仍高達(dá)39.5±0.18℃。相比Control組,該組大鼠體溫顯著上升(P0.05);與LPS組相比,大鼠發(fā)熱幅度更大,持續(xù)時(shí)間更久,且無雙峰出現(xiàn)。(二)痛覺潛伏期變化1.Control組:整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,該組大鼠痛覺潛伏期無明顯變化。2.LPS組:與Control組比較,LPS組大鼠痛覺潛伏期明顯縮短(P0.05)。3.CPZ組:該組大鼠于給藥前后痛覺潛伏期無明顯變化,與Control組相比,痛覺潛伏期無顯著改變。4.CPZ+LPS組:與Control組比較,大鼠給藥后痛覺潛伏期明顯延長(P0.05);與LPS組相比,痛覺潛伏期顯著延長(P0.01)。二、RT-q PCR結(jié)果(一)POA部位TRPV1m RNA的表達(dá)1.Control組:大鼠POA部位檢測到TRPV1m RNA的表達(dá)。2.LPS組:與Control組比較,其TRPV1m RNA相對表達(dá)量明顯增多(P0.05);與CPZ組比較,其TRPV1m RNA相對表達(dá)量明顯增多(P0.05);與CPZ+LPS組比較,其TRPV1m RNA相對表達(dá)量有增多趨勢但無顯著性意義。3.CPZ組:與Control組比較,TRPV1m RNA相對表達(dá)量無明顯變化。4.CPZ+LPS組:與Control組和CPZ組比較,其TRPV1m RNA相對表達(dá)量均有增多趨勢但差異無顯著性。(二)DRG部位TRPV1m RNA的表達(dá)1.Control組:在大鼠DRG部位檢測到TRPV1m RNA的表達(dá)。2.LPS組:與Control組和CPZ組相比,該組大鼠TRPV1m RNA相對表達(dá)量明顯增多(P0.05);與CPZ+LPS組相比,該組大鼠TRPV1m RNA相對表達(dá)量有增多趨勢但差異無顯著性。3.CPZ組:相比Control組,該組TRPV1m RNA相對表達(dá)量無明顯變化。4.CPZ+LPS組:相比Control組和CPZ組,該組大鼠TRPV1m RNA相對表達(dá)量均明顯增多(P0.05)。(三)TRPV1 m RNA在POA和DRG的表達(dá)比較RT-q PCR結(jié)果顯示,各組DRG部位TRPV1m RNA相對表達(dá)量明顯高于同組POA部位的相對表達(dá)量(P0.05),分別為55.1倍、44.2倍、51.1倍和53.3倍。結(jié)論1.在正常體溫狀態(tài)下TRPV1未參與大鼠體溫及痛覺過敏的調(diào)節(jié)。2.TRPV1受體在大鼠發(fā)熱時(shí)被激活,并對LPS誘導(dǎo)的發(fā)熱具有一定的抑制作用。3.中樞神經(jīng)系統(tǒng)(POA部位)具有TRPV1m RNA的表達(dá),但相對表達(dá)量低于DRG部位。4.TRPV1通道可能在中樞和外周水平均參與了發(fā)熱伴痛覺過敏的產(chǎn)生。
【關(guān)鍵詞】：TRPV1 發(fā)熱 辣椒平 痛覺過敏
【學(xué)位授予單位】：成都醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R402
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-15
• 1 材料與儀器15-18
• 1.1 主要儀器15
• 1.2 主要試劑15-16
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)溶液配制16-18
• 2 實(shí)驗(yàn)方法18-28
• 2.1 技術(shù)路線18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組18-19
• 2.3 側(cè)腦室置管19-20
• 2.4 體溫和痛覺潛伏期測量20-21
• 2.5 下丘腦和背根神經(jīng)節(jié)的取材21-22
• 2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR）22-26
• 2.7 統(tǒng)計(jì)方法26-28
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-37
• 3.1 側(cè)腦室定位準(zhǔn)確性驗(yàn)證28
• 3.2 側(cè)腦室注射辣椒平CPZ對LPS誘導(dǎo)的發(fā)熱大鼠體溫的影響28-31
• 3.3 側(cè)腦室注射辣椒平CPZ對LPS誘導(dǎo)的發(fā)熱大鼠痛覺潛伏期的影響31-33
• 3.4 RT-q PCR 檢測 TRPV1mRNA 水平表達(dá)結(jié)果33-37
• 4 討論37-41
• 5 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 文獻(xiàn)綜述46-66
• 參考文獻(xiàn)58-66
• 附錄66-67
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果67-68
• 致謝68

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 呼海燕;林友勝;;發(fā)熱的研究歷程和進(jìn)展[J];成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年01期

  本文關(guān)鍵詞：TRPV1在LPS引起的大鼠發(fā)熱伴疼痛或痛覺過敏中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：388383