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膿毒癥大鼠腦白質(zhì)損傷中髓鞘堿性蛋白表達變化的研究

發(fā)布時間:2023-05-07 00:16
  目的:研究膿毒癥大鼠腦白質(zhì)損傷后髓鞘堿性蛋白的表達變化,以及髓鞘損傷情況,為膿毒癥的研究提供新的思路。方法:將健康SPF級Wistar大鼠64只(18日齡),體重3040g,隨機分為對照組和LPS組兩組,LPS組腹腔注射5mg/kg的LPS制備大鼠膿毒癥動物模型;對照組腹腔給予等量的無菌生理鹽水。分別于給藥后2h、4h、6h、12h將所有存活動物按設(shè)定時間麻醉,心尖取血后開顱取腦。通過勞克堅勞藍(Luxol Fast Blue,LFB)染色情況觀察髓鞘損傷情況;應(yīng)用免疫組織化學染色方法觀察髓鞘堿性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)在腦白質(zhì)的定位,采用蛋白免疫印跡(Western blot)方法檢測不同時間點大鼠腦白質(zhì)髓鞘堿性蛋白表達情況,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清中MBP蛋白濃度變化。結(jié)果:與對照組相比,LPS組2h12h大鼠腦白質(zhì)MBP蛋白的表達含量均減少,Western blot檢測發(fā)現(xiàn)LPS感染后2h、4h、6h LPS組MBP蛋白表達與對照組相比均降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);LPS...

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗儀器
        2.1.3 主要藥品及試劑
        2.1.4 實驗試劑的配置
    2.2 實驗方法
        2.2.1 動物模型的建立
        2.2.2 標本的采集及處理
        2.2.3 石蠟標本制備
        2.2.4 蘇木素-伊紅染色(HE)
        2.2.5 免疫組織化學染色
        2.2.6 勞克堅勞藍染色(Luxol Fast Blue,LFB)
        2.2.7 蛋白提取和Western blot方法檢測大鼠腦白質(zhì)MBP蛋白濃度
        2.2.8 ELISA法檢測血清中MBP含量
    2.3 統(tǒng)計學方法
3 結(jié)果
    3.1 膿毒癥模型的建立
    3.2 HE染色觀察大鼠腦組織病理變化
    3.3 勞克堅勞藍染色(LFB)觀察大鼠腦組織髓鞘損傷情況
    3.4 免疫組織化學檢測觀察大鼠MBP蛋白在腦白質(zhì)的定位與表達
    3.5 Western blot檢測大鼠腦白質(zhì)MBP的蛋白表達水平
    3.6 ELISA檢測膿毒癥大鼠血清中MBP蛋白濃度的結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間取得的研究成果
個人簡歷



本文編號:3809875

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