多能干細(xì)胞(PSC)定向分化為造血干細(xì)胞(HSC)的研究為解決"血荒"、移植供者來源不足以及開拓血液制品來源提供了新途徑。iPSC技術(shù)的出現(xiàn)又避免了人ESC應(yīng)用涉及的法律、倫理道德等問題,更重要的是,病人特異的iPSC來源的HSC在移植后可避免免疫排斥反應(yīng),為實(shí)現(xiàn)個(gè)體化的再生醫(yī)學(xué)開辟了新方向。如何體外誘導(dǎo)人多能干細(xì)胞分化為可長期移植的造血干細(xì)胞和功能性的成熟血細(xì)胞是目前最大的挑戰(zhàn)。本研究從造血微環(huán)境中一重要成員骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞著手,尋找MSC促成骨分化的轉(zhuǎn)錄因子,并闡明ETV6在骨髓MSC分化和人多能干細(xì)胞造血分化中的作用,為促進(jìn)體外人多能干細(xì)胞向功能性造血干/祖細(xì)胞分化提供新的方案。第一章TEL/ETV6對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨成脂分化的調(diào)控作用研究成骨細(xì)胞對(duì)造血微環(huán)境以及造血干細(xì)胞的維持與穩(wěn)定至關(guān)重要,因此,通過調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化并作為基質(zhì)可能有助于體外人能干細(xì)胞分化來源的造血干/祖細(xì)胞成熟。本章節(jié)通過大量篩選促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄因子,發(fā)現(xiàn)了 ETV6、ETV2和LM02三個(gè)基因可以很大程度地促進(jìn)成骨分化,而ETV3、GATA1和HOXB4則有相反的作用。...

【文章頁數(shù)】：144 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
前言
摘要
Abstract
縮寫詞
第一章 TEL/ETV6對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨成脂分化的調(diào)控作用研究
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
        1.2.2 主要試劑和耗材
        1.2.3 主要溶液配制
        1.2.4 質(zhì)粒載體
        1.2.5 實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.3.1 成功克隆45個(gè)造血微環(huán)境調(diào)控相關(guān)重要轉(zhuǎn)錄因子
        1.3.2 轉(zhuǎn)錄因子在人骨髓MSC中過表達(dá)并向成骨成脂細(xì)胞分化
        1.3.3 ETV6,ETV2,LMO2和ETV3,GATA1,HOXB4對(duì)骨髓MSC的成骨成脂分化作用
        1.3.4 ETV6的Knockdown抑制了骨髓MSC的成骨成脂分化
        1.3.5 ETV6的過表達(dá)沒有改變骨髓MSC的特性
        1.3.6 ETV6過表達(dá)的骨髓MSC促進(jìn)造血干祖細(xì)胞的體外增值
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
第二章 TEL/ETV6在誘導(dǎo)性多能性干細(xì)胞向造血細(xì)胞分化中的作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
        2.2.2 主要試劑和耗材
        2.2.3 主要溶液配制
        2.2.4 細(xì)胞和質(zhì)粒
        2.2.5 主要實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞向造血細(xì)胞分化體系的建立
        2.3.2 利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除ETV6基因并建立ETV6^-/-hiPS細(xì)胞系
        2.3.3 ETV6^-/-hiPS細(xì)胞系的多能性鑒定
        2.3.4 ETV6敲除對(duì)iPS造血干/祖細(xì)胞及巨核細(xì)胞分化的影響
        2.3.5 ETV6過表達(dá)的MSC共培養(yǎng)促進(jìn)iPS體外造血分化
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 總結(jié)和展望
綜述
參考文獻(xiàn)
作者簡歷及在讀期間所取得的科研成果



本文編號(hào)：3784584