多能干細胞(PSC)定向分化為造血干細胞(HSC)的研究為解決"血荒"、移植供者來源不足以及開拓血液制品來源提供了新途徑。iPSC技術的出現(xiàn)又避免了人ESC應用涉及的法律、倫理道德等問題,更重要的是,病人特異的iPSC來源的HSC在移植后可避免免疫排斥反應,為實現(xiàn)個體化的再生醫(yī)學開辟了新方向。如何體外誘導人多能干細胞分化為可長期移植的造血干細胞和功能性的成熟血細胞是目前最大的挑戰(zhàn)。本研究從造血微環(huán)境中一重要成員骨髓間充質干細胞著手,尋找MSC促成骨分化的轉錄因子,并闡明ETV6在骨髓MSC分化和人多能干細胞造血分化中的作用,為促進體外人多能干細胞向功能性造血干/祖細胞分化提供新的方案。第一章TEL/ETV6對骨髓間充質干細胞成骨成脂分化的調控作用研究成骨細胞對造血微環(huán)境以及造血干細胞的維持與穩(wěn)定至關重要,因此,通過調控骨髓間充質干細胞成骨分化并作為基質可能有助于體外人能干細胞分化來源的造血干/祖細胞成熟。本章節(jié)通過大量篩選促進骨髓間充質干細胞成骨細胞分化的轉錄因子,發(fā)現(xiàn)了 ETV6、ETV2和LM02三個基因可以很大程度地促進成骨分化,而ETV3、GATA1和HOXB4則有相反的作用。...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
前言
摘要
Abstract
縮寫詞
第一章 TEL/ETV6對骨髓間充質干細胞成骨成脂分化的調控作用研究
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 主要實驗儀器和設備
        1.2.2 主要試劑和耗材
        1.2.3 主要溶液配制
        1.2.4 質粒載體
        1.2.5 實驗方法
    1.3 實驗結果
        1.3.1 成功克隆45個造血微環(huán)境調控相關重要轉錄因子
        1.3.2 轉錄因子在人骨髓MSC中過表達并向成骨成脂細胞分化
        1.3.3 ETV6,ETV2,LMO2和ETV3,GATA1,HOXB4對骨髓MSC的成骨成脂分化作用
        1.3.4 ETV6的Knockdown抑制了骨髓MSC的成骨成脂分化
        1.3.5 ETV6的過表達沒有改變骨髓MSC的特性
        1.3.6 ETV6過表達的骨髓MSC促進造血干祖細胞的體外增值
    1.4 討論
    1.5 小結
第二章 TEL/ETV6在誘導性多能性干細胞向造血細胞分化中的作用
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要實驗儀器和設備
        2.2.2 主要試劑和耗材
        2.2.3 主要溶液配制
        2.2.4 細胞和質粒
        2.2.5 主要實驗方法
    2.3 實驗結果
        2.3.1 人誘導性多能干細胞向造血細胞分化體系的建立
        2.3.2 利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除ETV6基因并建立ETV6^-/-hiPS細胞系
        2.3.3 ETV6^-/-hiPS細胞系的多能性鑒定
        2.3.4 ETV6敲除對iPS造血干/祖細胞及巨核細胞分化的影響
        2.3.5 ETV6過表達的MSC共培養(yǎng)促進iPS體外造血分化
    2.4 討論
    2.5 小結
第三章 總結和展望
綜述
參考文獻
作者簡歷及在讀期間所取得的科研成果



本文編號：3784584