目的:宮頸癌是嚴重威脅女性健康的常見惡性腫瘤,發(fā)病率居我國女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之首。目前宮頸癌介入化療方案存在部分患者療效不佳、毒副作用大及腫瘤耐藥等問題,本實驗擬通過體外細胞實驗及裸鼠移植瘤實驗探索重組人p53腺病毒聯(lián)合洛鉑誘導宮頸癌Hela細胞凋亡和生長抑制的作用及機制,從而為重組人p53腺病毒聯(lián)合洛鉑方案應(yīng)用于宮頸癌介入化療提供理論依據(jù)和指導,以期提高介入化療療效,減小毒副作用。同時,利用18F-FDG PET/MR一體機對宮頸癌使用重組人p53腺病毒聯(lián)合洛鉑為基礎(chǔ)的介入化療方案的療效進行影像學評估,初步探討PET/MR對其療效評價和預(yù)測的價值。研究方法:1、體外實驗:首先進行宮頸癌Hela細胞培養(yǎng)與傳代,實驗分為空白對照組、洛鉑組、重組人p53腺病毒組和洛鉑+重組人p53腺病毒組。倒置相差顯微鏡及Hoechst33342染色分析細胞凋亡、觀察細胞形態(tài)。MTT法檢測宮頸癌Hela細胞的活性。流式細胞儀結(jié)合AnnexinV-FITC/PI雙染檢測腫瘤細胞凋亡率。免疫印跡(Western blotting)檢測相關(guān)蛋白的表達。2、動物實驗:4-8周齡體重20²2...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要 Abstract 英文縮略語 第一部分 ：重組人p53腺病毒聯(lián)合洛鉑誘導宮頸癌Hela細胞凋亡的體外實驗研究
1 前言
2 材料和方法
    2.1 實驗材料
    
2.1.1 細胞株
    
2.1.2 分子生物學主要試劑
    
2.1.3 用于細胞培養(yǎng)的試劑
    
2.1.4 免疫印跡(Westernblotting)所用試劑
    
2.1.5 細胞活性檢測試劑盒
    
2.1.6 主要儀器
    2.2 實驗方法
    
2.2.1 宮頸癌Hela細胞培養(yǎng)與傳代
    
2.2.2 最佳感染指數(shù)測定
    
2.2.3 測定腺病毒表達載體沉默效率
    
2.2.4 倒置相差顯微鏡及Hoechst33342染色分析細胞凋亡、觀察細胞形態(tài)
    
2.2.5 MTT法檢測宮頸癌Hela細胞的活性
    
2.2.6 流式細胞術(shù)檢測腫瘤細胞凋亡率
    
2.2.7 Westernblot檢測相關(guān)蛋白的表達
    
2.2.8 統(tǒng)計學方法
3 實驗結(jié)果
    3.1 p53基因腺病毒聯(lián)合洛鉑誘導Hela細胞凋亡的形態(tài)學觀察
    3.2 重組人p53腺病毒聯(lián)合洛鉑誘導的Hela細胞活性抑制
    3.3 p53基因?qū)胩岣吡寺邈K誘導的Hela細胞凋亡率
    3.4 p53基因?qū)朐雒袈邈K誘導細胞內(nèi)促凋亡蛋白激酶切割激活
    3.5 p53基因?qū)胝T導細胞內(nèi)促凋亡蛋白表達增加
    3.6 重組人p53腺病毒導入增強了洛鉑誘導的Mcl-1蛋白切割和細胞凋亡
4 討論
5 結(jié)論 第二部分 ：重組人重組人p53腺病毒聯(lián)合洛鉑對宮頸癌裸鼠皮下移植瘤生長抑制作用的實驗研究
1 前言
2 材料和方法
    2.1 實驗材料
    
2.1.1 細胞株和實驗動物
    
2.1.2 主要試劑
    2.2 實驗方法
    
2.2.1 人宮頸癌Hela細胞的培養(yǎng)
    
2.2.2 實驗動物的飼養(yǎng)
    
2.2.3 宮頸癌Hela細胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立
    
2.2.4 注射重組人p53腺病毒和/或洛鉑后測量體積、瘤重
    
2.2.5 Westernblot檢測p53等蛋白的表達
    
2.2.6 統(tǒng)計學方法
3 實驗結(jié)果
    3.1 重組人p53腺病毒和/或洛鉑對宮頸癌裸鼠移植瘤生長的影響
    3.2 平均腫瘤重量以及凋亡事件檢測
4 討論
5 結(jié)論 第三部分 ：重組人p53腺病毒聯(lián)合宮頸癌介入化療的近期療效及PET/MR評價
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料
    
2.1.1 臨床病例資料
    
2.1.2 入組標準及排除標準
    
2.1.3 臨床表現(xiàn)及輔助檢查
    2.2 實驗方法
    
2.2.1 介入化療術(shù)方法及評價指標
    
2.2.2 PET/MR圖像采集
    
2.2.3 PET/MR圖像分析
    
2.2.4 療效評價
    
2.2.5 數(shù)據(jù)分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 入組患者基本臨床特征、療效及毒副反應(yīng)
    3.2 首次宮頸癌介入化療前后PET/MR參數(shù)變化及不同評價方式療效對比
    3.3 PET參數(shù)(SUL)與DW-MRI參數(shù)(mADC)之間相關(guān)性分析
    3.4 TD與SUL和mADC的之間相關(guān)性分析
    3.5 不同臨床療效亞組的mADC、SUL、TD差異對比
4 討論
5 結(jié)論 本研究創(chuàng)新性的自我評價 參考文獻 綜述
參考文獻 攻讀學位期間取得的研究成果 致謝 個人簡歷



本文編號：3750132