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基于適配體傳感器對(duì)凝血酶蛋白檢測的新方法研究

發(fā)布時(shí)間:2022-10-08 15:49
  蛋白質(zhì)作為重要的生物體組成物質(zhì)之一,它與生物體生命活動(dòng)的每一進(jìn)程都息息相關(guān)。其含量的變化對(duì)人體生物學(xué)功能的影響有著直接的關(guān)系,即使這種變化是極其微量的,也會(huì)引發(fā)生理病理反應(yīng),特別是對(duì)于一些與疾病相關(guān)的蛋白分子,這種變化帶來的影響不可忽略,基于此,對(duì)蛋白表達(dá)水平的測定顯得尤為重要,這對(duì)于某些疾病的預(yù)防、早期診斷以及治療具有重要現(xiàn)實(shí)意義。隨著蛋白檢測技術(shù)的不斷發(fā)展應(yīng)用,已經(jīng)不再局限于將抗體作為生物分子識(shí)別元件,因?yàn)檫m配體具有靶分子廣泛、高穩(wěn)定性、易修飾、易制備、無免疫原性等抗體無法比擬的優(yōu)點(diǎn),以適配體作為識(shí)別元件的傳感器展現(xiàn)了高靈敏、高特異性和操作簡便等特性,使得基于適配體傳感器的蛋白檢測方法成為當(dāng)下的研究熱門,也是最具前景的蛋白檢測方法。本課題采用不同的方法構(gòu)建了三種類型的適配體傳感器,以凝血酶蛋白為經(jīng)典的分析對(duì)象,對(duì)所構(gòu)建的傳感器性能進(jìn)行了驗(yàn)證討論。這些新方法的檢測性能在各原有類型的基礎(chǔ)上都得到了很大提高,論文主要內(nèi)容如下:(1)利用β-環(huán)糊精(β-CD)與二茂鐵(Fc)的主客體識(shí)別機(jī)理構(gòu)建了開關(guān)型適配體電化學(xué)傳感器對(duì)凝血酶進(jìn)行檢測研究。該傳感器是將末端修飾了Fc的適配體作為檢測探針,... 

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
中文摘要
abstract
注釋表
引言
文獻(xiàn)綜述 適配體傳感器對(duì)凝血酶蛋白的檢測研究
    1 凝血酶蛋白檢測意義
    2 適配體傳感器
        2.1 適配體
            2.1.1 適配體的篩選
            2.1.2 適配體作為識(shí)別元件的優(yōu)點(diǎn)
        2.2 適配體傳感器簡介
        2.3 適配體傳感器的類型
    3 基于適配體傳感器對(duì)凝血酶蛋白的檢測應(yīng)用
第一章 基于主客體識(shí)別的電化學(xué)適配體傳感器對(duì)凝血酶的檢測
    1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 溶液的配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 SH-β-CD的合成
        2.2 傳感器的制備
        2.3 凝血酶的檢測
    3 結(jié)果與討論
        3.1 主客體識(shí)別的驗(yàn)證
        3.2 修飾電極的電化學(xué)阻抗表征
        3.3 反應(yīng)溫度的優(yōu)化
        3.4 孵化時(shí)間的優(yōu)化
        3.5 線性考察
        3.6 特異性研究
        3.7 血清樣本的檢測
        3.8 傳感器的再生性
    4 結(jié)論
第二章 基于納米復(fù)合物功能化的電致化學(xué)發(fā)光適配體傳感器對(duì)凝血酶的檢測
    1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 溶液的配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 納米石墨烯的制備
        2.2 β-環(huán)糊精-金納米顆粒/納米石墨烯的制備
        2.3 ECL適配體傳感器的構(gòu)建
        2.4 凝血酶的檢測
    3 結(jié)果與討論
        3.1 可控電極的驗(yàn)證
        3.2 修飾電極的電化學(xué)阻抗表征
        3.3 適配體探針的優(yōu)化選擇
        3.4 凝血酶孵化時(shí)間的優(yōu)化
        3.5 線性考察
        3.6 特異性研究
        3.7 血清樣本檢測
        3.8 傳感器的再生性
    4 結(jié)論
第三章 基于均相無修飾的電化學(xué)適配體傳感器對(duì)凝血酶的檢測
    1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
        1.1 材料與試劑
        1.2 儀器與設(shè)備
        1.3 溶液的制備
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 電極的預(yù)處理
        2.2 凝血酶的檢測
    3 結(jié)果與討論
        3.1 探針結(jié)構(gòu)的驗(yàn)證
        3.2 檢測條件的優(yōu)化
        3.3 Au-S自組裝中輔助電位的比較
        3.4 阻抗表征
        3.5 線性考察
        3.6 特異性研究
        3.7 血清樣本檢測
    4 結(jié)論
第四章 結(jié)語
    1 課題結(jié)論
    2 問題與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
學(xué)位論文答辯委員會(huì)成員名單



本文編號(hào):3687989

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