目的評價氫對LPS致BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響及自噬在其中的作用。方法體外培養(yǎng)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞,接種于6孔板或96孔板,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為4組（n=24）:對照組（C組）、脂多糖組（LPS組）、富氫液培養(yǎng)基組（H組）和自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤組（3-MA組）。C組應(yīng)用10%胎牛血清MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h;LPS組加入LPS終濃度1 μg/ml孵育24 h;H組加入LPS終濃度1 μg/ml,培養(yǎng)基更換為富氫液培養(yǎng)基終濃度0.6 mmol/L孵育24 h;3-MA組加入3-甲基腺嘌呤終濃度2 mmol/L,其余處理同H組。采用CCK-8法檢測細(xì)胞存活率;采用ELISA法測定上清液TNF-α、IL-6、IL-10和轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）濃度;采用流式細(xì)胞術(shù)測定離子鈣接頭蛋白分子1（Iba-1）+細(xì)胞、Iba-1+CD86+細(xì)胞和Iba-1+CD206+細(xì)胞百分比;采用Western blot法檢測微管相關(guān)蛋白輕鏈3Ⅰ（LC3Ⅰ）、LC3Ⅱ、Bcelin-1和p62表達(dá)水平,并計算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。結(jié)果 4組細(xì)胞存活率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＆gt;0.05）。與C... 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]NLRP3炎癥小體在富氫液減輕LPS致小鼠巨噬細(xì)胞線粒體損傷中的作用[J]. 陳紅光,張楊,韓煥芝,毛幸,田婧,馮競成,謝克亮,于泳浩.  中華麻醉學(xué)雜志. 2018 (10)
[2]自噬在右美托咪定減輕LPS致小鼠巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用[J]. 毛幸,閆夢瑩,陳紅光,馮競成,王國林,謝克亮,于泳浩.  中華麻醉學(xué)雜志. 2018 (08)



本文編號：3669666