目的:通過(guò)觀察脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞（BMDMs）M1/M2亞型極化,同時(shí)從單層細(xì)胞通透性和細(xì)胞遷移愈合能力兩個(gè)方面觀察不同炎癥狀態(tài)下的巨噬細(xì)胞對(duì)小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞（PMVECs）屏障功能的影響。初步探討T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白-3/半乳糖凝集素-9（Tim-3/Gal-9）信號(hào)通路在LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞表型及功能調(diào)節(jié)中的意義及分子機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)原代BMDMs和小鼠PMVECs,用0.1 mg/L的LPS分別刺激BMDMs 0、1、3、6、12、24h,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD86、CD206,western-blot法檢測(cè)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1）等巨噬細(xì)胞分型標(biāo)記物以分析不同處理組的巨噬細(xì)胞M1/M2表型差異,激光共聚焦-免疫熒光法觀察BMDMs中Tim-3和Gal-9共定位,免疫共沉淀法檢測(cè)Tim-3和Gal-9結(jié)合程度。將不同處理組的BMDMs分別與PMVECs共培養(yǎng),伊文思蘭滲漏法檢測(cè)單層PMVECs滲透性變化,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PMVECs的遷移愈合能力。另取BMDMs并分為空白對(duì)照組、α-乳糖（a-lactose）處理組,... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２光鏡下的ＰＭＶＥＣｓ?（２００＞〇及免疫熒光鑒定結(jié)果（４００＞＜）??

圖１．１光鏡下的ＢＭＤＭｓ?（１０〇ｘ），巨噬細(xì)胞標(biāo)志物Ｆ４／８０流式鑒定結(jié)果??

圖２．１流式細(xì)胞術(shù)分析ＬＰＳ刺激后的Ｆ４／８０＋ＣＤ８６＋巨噬細(xì)胞數(shù)量隨時(shí)間變化趨勢(shì)??


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