【目的】1、建立EV71免疫磁珠富集技術與常規(guī)檢測相結合的方法,應用于患兒周圍環(huán)境標本檢測,從環(huán)境標本中分離出EV71病毒,為闡析環(huán)境標本在EV71傳播中的作用提供確切證據。2、通過分析分離自不同臨床癥狀的EV71毒株的基因組序列,尋找可能與重癥病例相關的毒力位點。3、構建突變感染性克隆質粒,拯救病毒,在細胞生物學水平和動物水平上對拯救的突變病毒的毒力進行驗證,確定位點突變對病毒毒力的影響。【方法】1、制備特異性富集EV71病毒的免疫磁珠,建立對環(huán)境標本中的EV71病毒富集和分離的方法,獲得的免疫磁珠-病毒復合物進行RT-PCR、RT-q PCR檢測和病毒分離。陽性標本進行VP1全長擴增及序列測定分析其同源性。2、對40株福建省EV71分離株的的基因組進行擴增,并從Genbank中下載48株具有明確臨床癥狀的中國其他省份獲得的EV71全基因組序列,對基因組進行遺傳進化分析;根據分離株病例的臨床癥狀將其分為重癥和輕癥毒株,比較重癥和輕癥分離株非編碼區(qū)的核苷酸序列及編碼區(qū)的氨基酸序列的變異情況。3、在EV71全長c DNA感染性克隆質粒（Nero-pcr-XL-149-08）的基礎上,利用... 

【文章頁數】：94 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
主要英文縮寫詞表 中文摘要 英文摘要 前言 第一章
    免疫磁珠富集法對環(huán)境標本中EV71檢測的應用 引言 材料與方法 結果 討論 結論 第二章
    輕重癥患者EV71全基因組序列分析可能的毒力位點 引言 材料與方法 結果 討論 結論 第三章
    EV71毒力位點的驗證 引言 材料與方法 結果 討論 結論 結語 參考文獻 課題綜述 參考文獻 致謝



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