研究背景與目的膿毒癥是機(jī)體對感染的反應(yīng)失調(diào)所導(dǎo)致的器官功能障礙,具有很高的發(fā)病率和死亡率,是兒科重癥監(jiān)護(hù)病房（PICU）主要的死亡原因。膿毒癥相關(guān)性腦�。⊿AE）是一種由膿毒癥所致的彌散性腦功能障礙,可出現(xiàn)在膿毒癥的早期,其感染部位常位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)之外。解耦聯(lián)蛋白2（UCP2）是線粒體解耦聯(lián)蛋白家族成員之一,廣泛分布在大腦、心臟、肺臟等器官和組織中,參與多種病理生理過程。研究表明,在腦卒中模型和急性腦損傷模型中,UCP2可以通過減輕細(xì)胞炎癥和抑制細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)一定的神經(jīng)保護(hù)作用,而我們的前期研究證實(shí),在膿毒癥心肌細(xì)胞模型中,UCP2可以通過解耦聯(lián)實(shí)現(xiàn)對線粒體膜電位（MMP）和ATP合成的調(diào)控。因此,本實(shí)驗(yàn)擬探討UCP2在膿毒癥星形膠質(zhì)細(xì)胞模型中的表達(dá),以及其對線粒體功能的影響。研究方法第一階段:分離純化新生大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞（Astrocyte,AS）,隨機(jī)將AS分為4組:正常對照組（對照組）;LPS（150ng/mL）+IFN-γ（200U/mL）+6 小時組（LPS+IFN-γ+6h組）:LPS（150ng/mL）+IFN-γ（200U/mL）+12 小時組（LPS+IFN... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－３各組星形膠質(zhì)細(xì)胞中ＵＣＰ２蛋白表達(dá)水平比較

＜０．０５），其中ｓｈＲＮＡ?－ＵＣＰ２－１６沉默序列轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達(dá)水平??最低（０．２１４±０．０８３比１．０００±０．００１），沉默效率最高，與對照組相比差異具有統(tǒng)??計(jì)學(xué)意義（ＰＣ０．０５），見表２－３圖２－４。故選擇ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６轉(zhuǎn)染序列進(jìn)行??后續(xù)實(shí)驗(yàn)。??確定轉(zhuǎn)染序列后，將轉(zhuǎn)染序列ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以不同濃度（２５ｍｏｉ、５０ｍｏｉ、??ｌＯＯｍｏｉ）轉(zhuǎn)染入原代星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，正常培養(yǎng)４８小時收集細(xì)胞進(jìn)行熒光定量??ＰＣＲ的結(jié)果顯示：各組ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達(dá)水平均顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５），??其中當(dāng)ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以ｌＯＯｍｏｉ濃度轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達(dá)水平最??低（０．２１４土０．０８３比１．０００±０．００１），沉默效率最高，與空載病毒組相比差異具有??統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５），見表４圖５。故選擇轉(zhuǎn)染序列ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以ｌＯＯｍｏｉ??濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。??３５??

／ｙｙｙ??，ｆ?，??圖２－４：各組星形膠質(zhì)細(xì)胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達(dá)水平比較?（ｘ±ｓ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＵＣＰ２?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（ｘ±ｓ）??注：與對照組比較，ａＰ＜０．０５．ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?３戶＜〇．０５．??表２４：各組星形膠質(zhì)細(xì)胞中ＵＣＰ２蛋

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3414874