沙門氏菌作為一種常見的人畜共患的革蘭氏陰性致病菌,高頻率地在全世界多個(gè)地區(qū)爆發(fā)。鼠傷寒沙門氏菌作為致病率最高的病原菌之一,常通過飲食進(jìn)入體內(nèi),與胃腸道中的微生物菌落競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)以及生活空間,從而打破土著微生物穩(wěn)定的生存模式,引起一系列的沙門氏菌中毒癥狀。為了降低鼠傷寒沙門氏菌感染病的爆發(fā)率,減少各國(guó)的經(jīng)濟(jì)損失,本試驗(yàn)以鼠傷寒沙門氏菌的16S r DNA/r RNA為研究對(duì)象,結(jié)合核酸修飾技術(shù)和核酸檢測(cè)試紙條（Nucleic Acid Strip,NAS）實(shí)現(xiàn)鼠傷寒沙門氏菌的便攜式和可視化檢測(cè)。研究?jī)?nèi)容如下:PCR核酸修飾技術(shù)結(jié)合核酸檢測(cè)試紙條對(duì)鼠傷寒沙門氏菌16S r DNA的可視化檢測(cè)。生物素-d UTP（Biotin-d UTP）將“Natural d NTP”轉(zhuǎn)換為“Biotin d NTP”,以沙門氏菌16S r DNA為模板,將生物素-三磷酸堿基脫氧核苷酸（Biotin d NTP）摻入DNA鏈中,使每個(gè)雙鏈DNA分子攜帶多個(gè)生物素分子。除此之外,上游引物的5’修飾了羧基熒光素（FAM）,因此,產(chǎn)生的每條雙鏈DNA都攜帶一個(gè)分子的FAM且雙鏈上攜帶多個(gè)生物素分子,使用NAS進(jìn)行可... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

LAMP原理圖（引用）

圖 1-1 LAMP 原理圖（引用）Fig1-1 Schematic illustration of LAMP (Reference)增（hybridization chain reactions，HCR）是一種核酸74]首次提出并設(shè)計(jì)了一對(duì)具有頸環(huán)結(jié)構(gòu)的探針 Hairpin 異性啟動(dòng)發(fā)夾結(jié)構(gòu)探針 Hairpin 1 和 Hairpin 2，并不斷組g Chen 等[76]利用雜交鏈?zhǔn)降葴財(cái)U(kuò)增技術(shù)與電化學(xué)方法 pM。

科學(xué)研究的進(jìn)步，專家根據(jù)酶與脫氧核苷三磷酸的相互作用，將研究需要官能團(tuán)直接引入核酸中，省去了商業(yè)化核酸修飾的時(shí)間和費(fèi)用，使核酸修種簡(jiǎn)單、方便的生物學(xué)工具而應(yīng)用于現(xiàn)代生物分子學(xué)研究中[78]。官能團(tuán)或者生物受體的 dNTP 借助酶促聚合作用，將修飾物引入雙鏈 DN的修飾物有氨基、巰基[80]、疊氮基團(tuán)[81]和生物素[82]等。2015 年 Dajie Lin生物素的 dATP 與納米磁珠聯(lián)用，對(duì)待檢測(cè)蛋白進(jìn)行信號(hào)放大，借助電化學(xué)大的核酸產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)過驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)此技術(shù)對(duì)甲胎蛋白的檢測(cè)限為 2016 年 Xiaomei Ren 等人[84]利用外切酶的消化和鏈霉親和素磁珠的分了 N3-dUTP 和 BCN 染料對(duì) DNA 的雙色熒光標(biāo)記，此方法作為一種簡(jiǎn)色法，在生物研究領(lǐng)域存在潛在的發(fā)展前景。2017 年，Mayreli Ortiz 等[85氧酸鹽（Deoxynucleotide Triphosphates, POM）的 dNTP 對(duì)耶爾森氏菌ia pestis）特異性 DNA 進(jìn)行信號(hào)擴(kuò)增，并結(jié)合電化學(xué)生物器完成生物檢測(cè)，OM 是一種熱穩(wěn)定、靈敏和酶兼容的氧化還原分子。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為基礎(chǔ)的分子生物學(xué)方法快速鑒定萬古霉素耐藥腸球菌的研究現(xiàn)狀[J]. 何淵慧,阮亙杰,鄭波.  中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2017(23)
[2]Some pathogenic characters of paratyphoid Salmonella enterica strains isolated from poultry[J]. Fabrizio Bertelloni,Giovanni Tosi,Paola Massi,Laura Fiorentini,Maria Parigi,Domenico Cerri,Valentina Virginia Ebani.  Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2017(12)
[3]一種基于液相基因芯片技術(shù)對(duì)甲型和乙型流感病毒分型檢測(cè)方法的建立[J]. 陳錦龍,呂剛,張優(yōu),符瑞佳,尹飛飛.  分子診斷與治療雜志. 2017(05)
[4]酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定中固相化方法概述[J]. 毛依陽,袁慧慧.  微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2017(05)
[5]基因測(cè)序技術(shù)在細(xì)菌性傳染病監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用[J]. 張淳,張媛媛.  中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備. 2017(07)
[6]免疫學(xué)檢測(cè)中抗體固定化方法的研究現(xiàn)狀[J]. 劉愛平,申文浩,王小紅,李誠.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2017(03)
[7]腸出血性大腸埃希菌O157免疫磁珠的制備[J]. 梁冰,張雅潔,紀(jì)雪,祝令偉,郭學(xué)軍,劉彥晶,劉軍,周偉,李麗紅,馮書章,孫洋.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2017(03)
[8]免疫層析技術(shù)在食源性病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用展望[J]. 楊娟,郭錚蕾,暢曉暉,楊向瑩,許美玲,尚士進(jìn),饒紅,張錫全,陳廣全,張捷.  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2016(09)
[9]基因芯片方法檢測(cè)耐異煙肼結(jié)核分枝桿菌準(zhǔn)確性的Meta分析[J]. 舒麗紅,丁顯平.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016(15)
[10]電化學(xué)傳感技術(shù)在羥基多環(huán)芳烴檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 李皖豫,繆文彬,沈曉芳,蔣偉,龐月紅.  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2016(01)

博士論文
[1]沙門氏菌mcr-1基因傳播機(jī)制與食源性耐藥致病菌檢測(cè)芯片研究[D]. 崔明全.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]高特異性碳納米生物傳感器快速檢測(cè)沙門氏菌的研究[D]. 寧毅.湖南師范大學(xué) 2014

碩士論文
[1]基于納米金標(biāo)記的沙門氏菌檢測(cè)方法研究[D]. 宋靚婧.江南大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3366893