多粘菌素被稱為是臨床防治多重耐藥革蘭陰性菌的最后一道防線,由質粒介導的耐藥基因mcr-1（mobile colistin resistance,mcr）的發(fā)現(xiàn)使針對多粘菌素耐藥基因的研究成為當下的熱點。為進一步完善廣州和中山地區(qū)細菌多粘菌素的耐藥基因譜,本研究以廣州市某三甲醫(yī)院的臨床分離革蘭陰性菌、中山市某些肉菜市場生鮮肉中的奇異變形桿菌和中山市某些豬場的豬源及環(huán)境中的奇異變形桿菌為對象,研究耐藥表型,檢測多粘菌素耐藥基因并研究耐藥基因的可轉移性。使用全自動微生物鑒定與藥敏系統(tǒng)和一些輔助實驗對臨床分離株進行鑒定與藥敏實驗,得到臨床分離革蘭陰性菌,并對相關結果統(tǒng)計分析。煮沸法對研究菌株進行基因組DNA的提取。采用聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction,PCR）法檢測多粘菌素耐藥基因,將檢測結果陽性的PCR產物送出測序驗證,保證PCR結果的真實性。依照美國臨床和實驗室標準協(xié)會（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）制定的標準采用Kirby-Bauer（K-B）紙片擴散法和肉湯稀釋法進行藥物敏感性實驗,研... 

【文章來源】：廣東藥科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

多粘菌素B和黏菌素結構式

(2) 對 1114 株生鮮肉、豬源及豬場環(huán)境中的奇異變形桿菌進行 mcr-1 的，通過瓊脂糖電泳初步確認耐藥基因的攜帶情況，本次 PCR 擴增共有變形桿菌的片段大小在 300bp 左右：1DM18b、1acx3a、1acx46a、1bcmx14b、1Y33a、1acD2a、19Pb 和 10Cb，見圖 3-1。(3) 經測序驗證，所有的陽性菌株均存在 mcr-1 基因。

圖 5-1 5798 接合子驗證圖Fig.5-1 The verification of 5798 conjugation從圖中可以看出，得到的 6 株接合子與 EC600 和攜帶 mcr-1 的 5798 的指紋圖譜并不完全相同，從這角度可以證明，接合成功；且這些接合子上含有 mcr-1基因。表 5-3 藥物敏感性實驗結果Tab.5-3 The results of Drug sensitivity test抗菌藥物名稱菌株編號EC600 5798 5798JH1 5798JH2 5798JH3 5798JH4 5798JH5 5798JTCY S R R R R R R RDOX S R R R R R R RPEN R R R R R R R R

【參考文獻】：
期刊論文
[1]禽源耐黏菌素大腸桿菌耐藥性分析[J]. 張文婷,張騰飛,盧琴,羅青平,王紅琳,羅玲,汪琛,邵華斌.  中國家禽. 2018(23)
[2]多黏菌素耐藥基因的變異特征及傳播規(guī)律的研究現(xiàn)狀[J]. 孫赫,張亞超,上官振坤,張益,范若蘭,李航,關松磊,張林波.  畜牧獸醫(yī)學報. 2018(10)
[3]2016年中國26個省市食源性沙門菌耐藥性特征分析[J]. 胡豫杰,劉暢,王美美,甘辛,徐進,李鳳琴,楊大進,裴曉燕.  中國食品衛(wèi)生雜志. 2018(05)
[4]臨床分離腸桿菌科細菌中mcr-1的篩查及其陽性菌株的藥敏結果[J]. 陸上,畢穎敏,楊洋,胡付品,楊帆.  中國感染與化療雜志. 2018(04)
[5]mcr-1基因介導黏菌素耐藥性研究進展[J]. 周洋,劉秋云,李玉寧,張丹艷.  動物醫(yī)學進展. 2018(03)
[6]mcr-1介導多黏菌素耐藥性的研究進展[J]. 趙菲菲,呂曉菊.  中國抗生素雜志. 2017(12)
[7]2015年分離自中國大陸食品的1070株沙門菌耐藥性分析[J]. 胡豫杰,王偉,閆韶飛,甘辛,呂涵陽,劉暢,楊大進,李鳳琴,徐進.  中國食品衛(wèi)生雜志. 2017(06)
[8]多黏菌素臨床研究進展[J]. 趙苗,張菁,張嬰元,李健.  中國感染與化療雜志. 2017(06)
[9]2016年中國CHINET細菌耐藥性監(jiān)測[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪復,蔣曉飛,徐英春,張小江,張朝霞,季萍,謝軼,康梅,王傳清,王愛敏,徐元宏,沈繼錄,孫自鏞,陳中舉,倪語星,孫景勇,褚云卓,田素飛,胡志東,李金,俞云松,林潔,單斌,杜艷,郭素芳,魏蓮花,鄒鳳梅,張泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,蘇丹虹,汪瑞忠,房華,俞碧霞,趙勇,龔萍,郭大文,趙金英,劉文恩,李艷明,金炎,邵春紅,溫開鎮(zhèn),張貽榮,徐雪松,鄢超,喻華,黃湘寧,王山梅,楚亞菲,張利俠,馬娟,周樹平,周艷,朱鐳,孟晉華.  中國感染與化療雜志. 2017(05)
[10]1株攜帶mcr-1的食品動物源多藥耐藥奇異變形桿菌耐藥性狀分析[J]. 張德福,安慧,張健,趙禹宗,張蕊,劉雪飛,楊立娜,白鳳翎,李春,周冬生,李鈺金,殷喆,勵建榮.  食品科學. 2018(14)

博士論文
[1]奇異變形桿菌可移動耐藥基因島研究[D]. 畢水蓮.華南理工大學 2011

碩士論文
[1]抗藥性沙門氏菌及其噬菌體的相互作用關系[D]. 商延.山東大學 2018
[2]沈陽地區(qū)腸桿菌科細菌mcr-1基因篩查及其對多黏菌素耐藥表型相關性的研究[D]. 王齊暉.中國醫(yī)科大學 2018
[3]質粒介導的黏菌素耐藥基因mcr-1的發(fā)現(xiàn)[D]. 劉藝云.華南農業(yè)大學 2016
[4]上海某豬場大腸桿菌中mcr-1基因的傳播機制研究[D]. 俞林鋒.華南農業(yè)大學 2016



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